close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

7378.РАЗРАБОТКА КОМПЛЕКСНЫХ МЕТОДОВ БИОФИЗИЧЕСКОГО И ЭНДОКРИНОЛОГИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ НА РЕПРОДУКТИВНУЮ ФУНКЦИЮ КОРОВ

код для вставкиСкачать
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
S-tf*&
На правах рукописи
АНЗОРОВ Ваха Асхадович
РАЗРАБОТКА КОМПЛЕКСНЫХ МЕТОДОВ
БИОФИЗИЧЕСКОГО И ЭНДОКРИНОЛОГИЧЕСКОГО
ВОЗДЕЙСТВИЯ НА РЕПРОДУКТИВНУЮ ФУНКЦИЮ
КОРОВ
03.00.13 — Физиология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
доктора биологических наук
Дубровицы Московской области
2005 г.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Работа выполнена в отделе эндокринологии сельскохозяйственных
животных Всероссийского государственного научно-исследовательского
института животноводства (ВГНИИЖ)
Научный консультант:
доктор биологических наук, профессор
Клинский Юрий Дмитриевич
Официальные оппоненты: доктор биологических наук,
профессор Ерохин Анатолий Сергеевич
доктор биологических наук, профессор
Гавриков Александр Михайлович
доктор биологических наук
Семенютин Владимир Владимирович
Ведущая организация: Курская государственная сельскохозяйственная
академия (КГСХА)
Защита диссертации состоится « 18 »
часов
на
заседании
диссертационного
октября
совета
2005 года, в 10
Д.006.013.01
при
Всероссийском государственном научно-исследовательском институте
животноводства
Адрес института: 142132, Московская область, Подольский район,
п.Дубровицы, ВГНИИЖ
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВГНИИЖ.
Автореферат разослан « / & » сентября 2005 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета,
/
кандидат биологических наук
faee^J
В.П. Губанова
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
3
1. О б ш а я характеристика работы
Актуальность темы. На протяжении последних десятилетий в
молочном скотоводстве Российской Федерации сложилась ситуация, в
которой производство необходимого количества молока в государственном
масштабе возможно обеспечить только путем ускоренного увеличения
продуктивности коров на основе создания и совершенствования линий,
семейств и пород животных, максимально удовлетворяющих конъюнктуру
рынка
Необходимым условием для этого является
расширение
генеративного
потенциала,
без
чего
невозможно
осуществить
интенсификацию селекционного прогресса (Н.И. Стрекозов и др., 2001, 2002;
Л.К. Эрнст, 2003, 2004; А.Т. Мысик, 2003). Однако этот процесс
сдерживается ранней выбраковкой и снижением репродуктивного статуса
поголовья с генетически запрограммированной высокой молочной
продуктивностью. Данная тенденция характерна для всех современных
технологий содержания и эксплуатации животных. Это определяет острую
потребность ЛПК в исследованиях, касаюшихся изучения характера
различных нарушений физиологических функций организма животных и,
прежде всего, репродуктивной функции. С повышением уровня молочной
продуктивности
коров
тесно
связано
устойчивое
увеличение
репродуктивных нарушений. В этом смысле нарушения гормональной и
генеративной функции яичников представляют собой наибольшую проблему
(М. Зухрабов и др., 2002; Ю.Д. Рубан, 2003; А.Л. Шубин и др., 1999),
вследствие чего исследования по нормализации репродуктивной функции на
эндокринном уровне приобретают особую актуальность (A.M. Чомаев и др.,
1997; Ю.Д. Клинский и др., 2000, 2003). Имеющиеся в арсенале специалистов
гормональные, или биотехнологические, методы регуляции половых
процессов, теоретические принципы которых были впервые разработаны
отечественными учеными (М.М. Завадовский и др., 1934, 1936, 1963),
представляют собой хорошую перспективу борьбы с бесплодием, причем
принципиально новых методов в обозримом будущем не предвидится (М.
Oettel, 1999).
Эффективность биотехнических мероприятий, основанных
на
применении гормональных регуляторов, резко снижается из-за широкого
распространения, до 70-80%, в высокопродуктивных стадах у коров в
послеродовой период и период лактации нарушений воспалительного
характера—эндометритов и маститов (И.Н. Зюбин, 1994; Н.И. Полянцев,
1997, 1999). В этой связи санацию матки рассматривают как обязательный
элемент биотехнологии воспроизводства. Используемые с этой целью
антимикробные препараты не всегда оказываются достаточно эффектив­
ными. Кроме того, применение лекарственных препаратов на лактируюших
коровах
влечет
за
собой
экологическую
нагрузку:
снижаются
потребительские качества молочной продукции. Э т л и к т у в т необходимость—
поиска новых экологически безопасных средств (- I.K. Эрнс|1\(2§о$£;;09этому i
в практике все более широкое применение Haxoz ^{бдафи^гедавд^т^йРгДОы I
w f-лт?
1
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
4
воздействия, как экологически безопасные. Для профилактики и
нормализации
воспалительных
процессов
наиболее
широкое
распространение получают методы квантовых воздействий (УВЧ- и
лазеропрофилактика).
Промышленность
выпускает
оригинальные
портативные
аппараты,
разработанные
отечественными
учеными,
позволяющие с достаточной эффективностью проводить мероприятия без
ущерба для производственно-технологических
процессов получения
продукции. Однако внедрение данных методов как элемента биотехнических
мероприятий требует дальнейшего совершенствования научного и
производственного испытания (И.И. Валковой и др., 1999, 2003; А. Тулкин,
2002).
Цель и задачи исследований: целью работы явилась разработка
комплексных методов биофизического и эндокринологического воздействия
на репродуктивную функцию коров.
Для достижения цели необходимо сформулировать и решить
следу юшие задачи:
- изучить структуру нарушений репродуктивной функции у коров в
сельскохозяйственных предприятиях ряда регионов Российской Федерации с
учетом характера кормления, содержания, эксплуатации и климатических
факторов;
- разработать приемлемые биофизические методы воздействия на
органы репродуктивной системы для профилактики и нормализации
патологических процессов воспалительного характера при проведении
биотехнологических мероприятий;
- разработать рациональные приемы гормональной активизации
репродуктивной функции коров, в т.ч. в послеродовой период;
усовершенствовать
биотехнические
методы
нормализации
репродуктивной функции коров при нарушениях генеративного и
воспалительного характера;
- исследовать причины и пути снижения эмбриональной смертности на
основе применения биорегуляторов;
- определить влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на
иммунобиологический статус организма коров;
- изучить характер влияния воспалительных процессов, протекающих в
молочной железе, на репродуктивную активность;
провести обобщающие научно-производственные
испытания
комплекса биотехнологических мероприятий, включающего биофизические
методы воздействия с целью нормализации структурных нарушений
воспалительного характера в эндометрии и молочной железе.
Научная
новизна
работы.
Изучена
структура
нарушений
репродуктивных органов и молочной железы у коров в условиях различных
природноклиматических регионов Российской Федерации с учетом характера
содержания
и
качества
кормления
животных.
Показана
взаимообусловленность патологического процесса яичники — матка —
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
5
молочная железа, что диктует необходимость системного подхода при
изучении нормы и патологии, а также при регуляции репродуктивной
функции. Дана методическая основа комплексной квантовой терапии и
профилактики
патологии
репродуктивной
системы.
Определены
оптимальные безопасные для организма животных параметры и методы
воздействия квантовых излучений для профилактики и устранения процессов
воспалительного
характера
при
проведении
биотехнологическнх
мероприятий с целью повышения репродуктивного статуса поголовья.
Выяснено
влияние
низкоинтенсивного
лазерного
излучения
на
иммунобиологический статус и гемопоэз, подтверждающее его позитивное
биологическое действие на организм коров и его репродуктивную систему.
Дано
научно-экспериментальное
обоснование
для
применения
низкоинтенсивного лазерного излучения как неотъемлемого элемента
биотехнологии воспроизводства в молочном скотоводстве.
Практическая значимость работы. Дано научно-практическое
обоснование использования низкоинтенсивного лазерного излучения как
элемента биотехнических мероприятий, проводимых с целью норм&тизации
эндокринной регуляции воспроизводительной активности коров, в т.ч.в
послеродовой период. Апробировано и рекомендовано для условий
производства применение портативных аппаратов лазеротерапии и
профилактики репродуктивных нарушений как экологически безопасного
элемента
биотехнологических
мероприятий
по
оптимизации
воспроизводительного статуса поголовья. Это открывает новую перспективу
более широкого и эффективного применения биотехнологии в отрасли
молочного скотоводства.
Реализация результатов исследований. Материалы исследований
вошли в следующие нормативные документы, утвержденные Департаментом
ветеринарии Минсельхозпрода Российской Федерации:
- Наставление по применению магнито-инфракрасного лазерного
аппарата «РИКТА - MB» в ветеринарии. - М. - 1999.
Методические указания по диагностике терапии и профилактике
болезней органов размножения у коров и телок. — М. - 2000.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и одобрены на
заседания ученых советов СЗНИИЛПХ, БНИИСХ, ВГНИИИЖ, МЭИ, ГТАУ,
ЧГУ, НГСХА (1995-2005 гг.); на всероссийских, зональных
и
республиканских конференциях (Москва, Дубровины, Уфа, Оренбург, Львов,
Нижний Новгород, Вологда, Элиста, Душанбе, Владикавказ, Воронеж (19952005 гг.). Основные научные результаты, включенные в диссертацию,
опубликованы в 73 научных работах, в том числе и в шести методических
рекомендациях.
Объём и структура. Диссертация изложена на 268 страницах
машинописного текста, состоит из введения, материалов и методов
исследований, 4 разделов, обсуждения, выводов, предложений для
производства, библиографического списка, содержит 50 таблиц, 18 рисунков
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
6
и приложения. Обзор литературы включает 388 источников, в т.ч. 156
иностранных.
Основные положения, выносимые на защиту:
параметры
воспроизводительного
статуса
и
структура
репродуктивных нарушений у коров с учетом климатических факторов;
- влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на органы
репродуктивной системы и организм животных при проведении
биотехнических мероприятий с целью оптимизации воспроизводительного
статуса;
- параметры и методы воздействия квантовых излучений на молочную
железу;
- эффективность низкоинтенсивного лазерного излучения при
одновременном воздействии на гениталии и молочную железу в комплексе
биотехнологии воспроизводства.
2. Собственные исследования
2.1. Материалы и.методы
исследований
Работу выполняли в отделе эндокринологии ВГНИИЖ на протяжении
1996 - 2005 гг. (схема исследований, рис. 1).
Экспериментальные
исследования
проводили
в
хозяйствах
Северокавказского региона, Московской, Белгородской, Астраханской,
Вологодской областей и Республики Башкортостан на коровах чернопестрой, симментальской и айрширской пород.
В целом показатели воспроизводительного статуса поголовья
оценивали по общепринятым в зоотехнической практике методам.
Учитывали сроки прихода коровы в первую охоту после отела, индекс
осеменений, продолжительность сервис-периода. Для характеристики
нарушений воспроизводительной функции у коров и выяснения
эффективности биотехнических методов их устранения применяли
комплексный подход согласно «Методических указаний по диагностике,
лечению и профилактике акушерско-гинекологических болезней и
ветеринарному контролю за воспроизводительной функцией коров» (1985).
Определение характера воспалительных нарушений молочной железы у
коров проводили в соответствии с «Рекомендациями по борьбе с маститом
коров» (1983 г.).
Индуцирование половых циклов, определение результативности
применения разных препаратов, осеменение коров и телок осуществляли по
методикам и инструкциям МСХ РФ и ВГНИИЖ.
Стимуляцию активности яичников у «проблемных» коров при
нарушениях фолликулогенеза проводили на более чем 850 коровах с
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
7
использованием различных биорегуляторов отечественного производства:
ФСГ-супер,
ГСЖК
в
комплексе
с
ирогестагенами,
аналогами
гонадолиберина, ХГЧ, синтетическими простагландинами в различных
Анализ данных отечественной и зарубежной литературы
J
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Анализ данных, характеризующих воспроизводительный статус в молочном
скотоводстве сельскохозяйственных предприятий ряда регионов РФ
Влияние iiapai ипических факторов на показатели репродуктивной активности
поголовья
Разработка биофизических методов
воздействия на репродуктивную
функцию
Эффективность композиций
отечественных биорегуляторов
Лазерные аппараты и разработка
режимов воздействия
Влияние лазерного излучения на
иммунобиологические показатели
крови и гемопоэз
Z
Устранение нарушений
фол ли кулогенеза
X
Испытания унифицированных
обработок
Повышение
результативности
осеменений
Снижение
эмбриональных
потерь
Устранение эндометральных
нарушений и нарушений
воспалительного характера в
молочной железе
Учет влияния сезонных факторов
на репродуктивную активность и
эффективность проведенных
мероприятий
Лабораторные исследования
гематологических показателей и
показателей гормонального
статуса
Анализ и обсуждение полученных результатов,
формулирование выводов и практических предложений
Рис. I. Общая схема исследований
сочетаниях и дозировках. Эффективность лютеостабила в качестве средства,
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
8
снижающего эмбриональную смертность, испытали более чем на 180коровах.
Применяемые в этом разделе элементы эмбриотрансплантации
индуцирование суперовулянии, извлечение и оценку качества эмбрионов
осуществляли по инструкциям ВГНИИЖ.
Для разработки и изучения эффективности биофизических методов
профилактики и устранения нарушений воспалительного характера при
проведении биотехнических мероприятий применяли лазерные аппараты со
следующими параметрами работы: мошность от 4,0 до 15,0 Вт, длина волны
от 870 до 970 нм, частота модуляции от 50,0 до 5000,0 Гц, экспозиция 1, 2, 5
минут по одному сеансу в день, курс 8-10 дней. В т.ч. применяли аппарат
квантовой терапии РИКТЛ-МВ. Излучатель аиплицировали по Г.В. Казееву
(1999) по секторам расположения корпоральных биологически активных
точек (БАТ), которые представляют органы и различные системы организма
на поверхности тела животных.
Исследования но влиянию климатических факторов различных
регионов РФ на репродуктивную функцию коров проводили в 1999-2004 гг. с
использованием документов зоотехнического учета.
В ходе исследований использовали статистические обзоры и отчеты
отделов (управлений) животноводства при администрациях областей, краев,
республик, районных станций по борьбе с болезнями животных, областных
и районных ветеринарных лабораторий и облстатуправлений ЦСУ РФ.
Для сравнительного изучения характера изменений в организме
животных в процессе исследований проводили лабораторные исследования.
Концентрацию стероидных гормонов определяли радиоиммунологическим
методом.
Иммунобиологическое
состояние
здоровых
и
больных
эндометритом
и маститом
коров определяли путем
проведения
гематологических и биохимических исследований проб крови. Уровень
общего белка в сыворотке крови (СК) определяли рефрактометрически
(рефрактометр ИРФ-22). Уровень общих иммуноглобулинов - цинксульфатным методом по A.D. McEwan, E.W. Fisher, J.E. Selman, W.R. Penhale
(1970); белковые фракции определяли по Оллу Маккорду в модификации
Карпюка (1962); общие лип иды - по А.Ф. Криницкому в модификации В.И.
Волгина (1969), холестерин - по Ильку (И.П. Кондрахин и др., 1985);
гемоглобин - при помощи ФЭК по Г.В. Дервизу и А.И. Воробьеву (1959);
бактерицидную активность сывороток крови - по О.В. Смирновой и Т.А.
Кузьминой (1966); активность р-лизинов - по О.В. Бухарину и Н.В.
Васильеву (1977); эритроциты - по А.И. Воробьеву (1959); количество
лейкоцитов и лейкоцитарную формулу - по А.А. Кудрявцеву и Л.А.
Кудрявцевой (1973).
Детально методики ряда опытов сочли целесообразным отразить по
ходу изложения.
Статистическую обработку экспериментального материала проводили
по Е.К. Меркурьевой (1983 г.) на персональном компьютере с
использованием программы Microsoft Excel.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
9
3 . Р е з у л ь т а т ы с о б с т в е н н ы х исследований
3.1. Репродуктивный статус коров в зависимости от
паратипических факторов Факторы, влияющие на показатели репродуктивной активности при
эксплуатации крупного рогатого скота можно разделить на 2-е группы: орга­
нические и индуцированные. К первой ipynne следует отнести: породу, про­
дуктивность, возрасг, наследственность животных. Кроме того, данные фак­
торы обусловливают специфику реакции организма на воздействие гормо­
нальных средств. При прочих равных условиях данные факторы объективно
программируют как низкие, так и высокие по эффективности показатели
плодовитости и результаты ее направленной корректировки. Ко второй
группе следует отнести, так называемые, симптоматические, или
индуцированные факторы. Их можно разграничить на две подгруппы: Л связанные с патологией репродуктивной системы: это - нарушенный по­
слеродовой период, различные виды овариопатологий, эндометриты, другие
виды нарушений и Б - нарушениями технологии кормления, содержания и
эксплуатации животных. Этого мнения придерживаются и другие
исследователи (J. Saumande и др., 1997). Принимая во внимание данные
факторы, анализ снижения репродуктивной активности поголовья коров,
проведенный совместно со специалистами Департамента ветеринарии
Минсельхозпрода (И.И. Балковой, В.П. Иноземцев, 1997 - 2004) с
использованием данных зооветотчетности за 1997 - 2004 гг. по
контролируемым хозяйствам Российской Федерации показал, что ежегодно
акушерско-гинекологической диспансеризации подвергается 3450,3 - 3484,3
тыс. голов крупного рогатого скота, что составляет 30,2 - 40,2% от общего
количества коров, находящихся в сельхозпредприятиях страны различных
форм собственности. В среднем, различные нарушения репродуктивной
функции были зарегистрированы у 21,5% обследованных животных с
колебаниями по годам 20,2 - 22,7%. Если сравнить с периодом 1990 - 1997
гг, когда нарушения репродуктивной функции было зарегистрировано у
23,2% животных, то можно констатировать некоторую тенденцию к
снижению этих болезней. Однако приводимые данные позволяют заключить,
что патология органов репродуктивной системы у коров продолжает
удерживаться на достаточно высоком уровне и составляет одну из
актуальных проблем практики молочного скотоводства.
Одновременно
можно
констатировать,
что
территориальная
неравномерность частоты акушерско-гинекологической патологии у коров не
носит резко выраженного контрастного и закономерного характера.
Установлено, что частота репродуктивных нарушений в определенной
степени зависит от уровня кормления животных.
Неполноценное кормление и неблагоприятные условия содержания
животных отрицательно сказываются на состоянии обмена веществ и
устойчивости их организма к репродуктивным нарушениям. Биохимический
анализ сыворотки крови коров свидетельствует, что периодически
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
10
сниженная
репродуктивная
активность
в
отдельных
регионах
сопровождается гипопротеинемией у 39,9-60,9% животных, гипогликемией
у 41,6 - 62,0%, показателями щелочного резерва ниже нормальных величин
у 39,7 - 68,1% молочных коров. Происходят негативные изменения
гормонального статуса: уровень концентрации прогестерона в период
максимальной эндокринной активности желтого тела цикла на 10-15% ниже
средне-статистических
величин, общепризнанных
нормальными,
а
эстралиола - на 12-17% выше. В этом отношении показательны
исследования, проведенные в 1996-1997 гг. в хозяйствах Астраханской
области. В колхозах «Старицы» и имени К. Маркса Черноярского района, в
колхозе «Победа» Володарского района и АОЗТ «Пойменный» Пригорского
района. Было установлено, что число проблемных коров снижалось в летние
месяцы до 11,5% и повышалось в осенне-зимние и зимне-весенние месяцы
до 28-60%. Данная картина не характерна, т.к. в летний период, как
правило, происходит снижение репродуктивной активности поголовья, а
осенне-зимний и зимне-весенний - повышение. Факты снижения
воспроизводительной активности зимой были связаны с низким уровнем
организации технологии кормления из-за несбалансированности рационов.
Снижение содержания каротина в крови коров происходило до 30% от
нормы. Основной причиной неблагоприятной ситуации обусловившей
недокорм животных являлся значительный неурожай пастбищ в
Астраханской области летом 1996 года из-за отсутствия разлива в дельте
Волги. Однако, несмотря на тяжелые условия, проведение биотехнических
мероприятий позволяло улучшить ситуацию с воспроизводством. Данный
факт доказывает практическую ценность и значимость современных
биотехнических методов воспроизводства.
В основе снижения репродуктивной активности поголовья было
наличие у коров гипофункции яичников. Данную патологию фиксировали у
16,1 - 61,8% проблемных коров.
Анализ фактов снижения плодовитости коров позволяет заключить,
что нарушения репродуктивной функции у животных имеют достаточно
широкое распространение, но имеют тенденцию доминировать в районах с
более экстремальными условиями содержания и эксплуатации животных
(Вологодская и Астраханская обл.), что подтверждает важную роль
природно-климатических
факторов
в
возникновении
и
развитии
репродуктивных патологий и особую роль организационно-хозяйственных
условий, в частности, полноценности кормления животных.
Выделяя последний фактор, следует сказать, что данные по
обеспеченности животных кормами, сложившейся на протяжении ряда
последних лет, свидетельствуют, что молочное скотоводство страны как в
настоящее время, так и в ближайшей и более отдаленной перспективе будет
находиться в зоне определенного риска относительно благополучия
воспроизводительной активности поголовья. Это положение аргументируют
данные, приводимые в первой главе диссертации.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
II
Изучение частоты проявления послеродовых и других репродуктивных
нарушений у коров на протяжении ряда лет в хозяйствах Московской,
Вологодской, Астраханской, Нижегородской и других областей РФ,
проведённое совместно со специалистами сельхозпредприятий и районных
станций по борьбе с болезнями животных показало, что соблюдение
зоогигиснических норм кормления, содержания и эксплуатации не
исключает снижение репродуктивного статуса поголовья. Под наблюдением
находились коровы черно-пестрой, симментальской, холмогорской и
айширской пород, которые содержались в типовых помещениях, имели
нормальную упитанность. Во многом это связано с генетически
запрограммированной молочной продуктивностью', по мере роста
продуктивности ухудшаются показатели воспроизводительного статуса
(табл.1).
Таблица I
Молочная продуктивность и репродуктивный статус
Молочная J Число
п ролу кнаблн>
тивность, 1 лений,
кг
|
п
< 3000
3000
5000
6000
>6000
*
**
***
124
199
97
S1
81
Р<0.05
Р<0,01
Р<0,01
1
Количество
дней от
отела до Iой охоты,
М±т
28,9+6,10*
31,9+7,91
46,1+8.16
46,9+7,72
48.1±8,|3
Плодотворность
1-го осеменения
п- %
Индекс
осемене­
ния,
Сервис-период,
М+т
М±т
72-58,1±4,43*»
П5-57,8±3,50**
44-45,4+5,06
36-44,4±5,52
32-39,5+5,43
1,5±0,01*
1,5+0,11
1,7±6,23
1,9+0,010
2,1 ±0,34
78,1±9.18***
78.7±7.9|**«
99,li8,12*«
139,9± 11.90
148.7±13.34
Результаты исследований показывают, что из всего перечня
репродуктивных патологий акушерско-гинекологических
патологий,
регистрируемых
в скотоводстве, и приводящих к снижению
воспроизводительного статуса, доминирующее положение занимает
гипофункция яичников и в меньшей степени другие виды овариопатологий.
Динамика функциональных нарушений яичников в количественном
отношении (при сохранении структуры) имеет тенденцию сокращаться в
осеннее-зимний и зимнее-весенний периоды и увеличивается в летний, что
хорошо видно на примере ОПХ «Баймакское» РБ (рис.2). Следует
особо обратить внимание, что у более половины коров с тем или другим
видом овариопатологий одновременно зафиксировали структурные
нарушения эндометрия.
Полученные данные еще раз подтверждают большую научную и
практическую значимость проблемы разработки новых эффективных
средств и методов восстановления репродуктивной активности.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
12
П Нерснстенция
ЖТ
В Гипофункция
яичников
И Кисты
яичников
зимнелетний
весенний
Рис. 2. Структура нарушений овариальной функции
Обращая внимание на случаи низкой репродуктивной активности
поголовья в хозяйствах с высокой технологической культурой содержания,
кормления и эксплуатации животных. Следует констатировать, что одними
мерами улучшения условий кормления и содержания без внедрения
современных биотехнических методов воспроизводства достаточную
репродуктивную активность стада обеспечить не представляется возможным.
В то же время, успех применения биотехнологических методов
воспроизводства возможен только на базе безусловного соблюдения норм и
требований технологии кормления, содержания и эксплуатации животных,
разработанных зоотехнической наукой.
3.2. Оптимизация репродуктивой активности коров на основе
проведения биотехнических мероприятий
3.2.1. Нормализация овариальной функции при различных формах
нарушенного
фолликулогенеза
Обследованиями поголовья проблемных по воспроизводству коров
установлено, что основной причиной депрессии показателей воспроизво­
дительной активности является гипофункция яичников. В ряде случаев
гипофункциональное состояние яичников может сохраняться на протяжении
6-8 месяцев. Патогенез гипофункционального состояния яичников имеет
несколько стадий: начальная, промежуточная и стадия глубокой
гипофункции ( Ю Д . Клинский и др., 1987; В.М. Шириев и др., 2001).
Проявление этой формы овариопатологии имеет место во всех
хозяйствах и характерно для всех пород животных. Наиболее часто
неактивные яичники диагностировали у молодых коров между 43 и 60 днями
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
13
после отела; в 38-70% случаев гипофункцию регистрировали но 1 и 2-ой
лактация м и в гораздо меньшей степени - по 3-ей.
У коров но третьей, четвёртой и более поздних лактации чаше
регистрируют другие вилы нарушенного фолликулогенеза—фолликулярные
и лютеапьные кисты. Важно учитывать следующую динамику патогенеза
этих морфо-функциональных нарушений. Несвоевременный, вследствие
блокады прогестероном, запоздалый выброс пика ЛГ на фоне общей
недостаточности
гонадотропинов
приводит
к
возникновению
персистирушего фолликула и трансформации его в фолликулярную кисту.
Гормональная активность фолликулярных кист отражается соответствующей
клиникой - у коров регистрируют постоянные признаки течки и половой
охоты. Возможна лютеинизация образовавшейся фолликулярной кисты с
последующим ее лизисом в случае нормального образования и секреции
маточных простагландииов и возобновления нормоцикличности. Однако, при
нарушении образования простагландииов происходит формирование стойкой
лютеальной кисты. В кистозном образовании наступают глубокие
дегенеративные изменения и атрофические процессы, приводящие к
прекращению гормональной активности кист в результате перерождения
специфических структур, что вызывает у коров анофродизию.
Гистологические изменения захватывают кровеносные сосуды,^
прилегающей к патологическим образованиям ткани яичника. В следствие
этого происходит нарушение тканевого питания, что в свою очередь служит
причиной
развития
неспеиифической
соединительной
ткани,
способствующей фиброзному перерождению яичника. Морфологически это
соответствует уменьшению объема и уплотнению тканей яичников, а
функционально - к гипо- и затем к дисфункции. Данный, кратко изложенный
патогенез, обусловливает методику заместительной гормональной регуляции
циклической деятельности яичников с учетом механизма «плюс - минус»
взаимодействия гипоталамо-гипофизарной системы.
Исследовательскими коллективами и в процессе собственных
исследований по повышению репродуктивного статуса в стадах с
проблемами воспроизводства было испытано большое число схем и режимов
обработок коров с целью нормализации фолликулогенеза.
Предлагаемые схемы индуцирования охоты при нарушении
фолликулогенеза с применением ГСЖК, простагландииов, гонадолиберинов
и других биологически активных веществ позволяют преодолеть сезонное
анэстральное состояние коров и явления постфизиологической ациклии,
обеспечивая повышение показателей по воспроизводству стада. Однако,
практически, все схемы и режимы обработок, применяемые с учетом
конкретного характера овариопатологии, не давали стабильной приемлемой
эффективности. В основном это связано с трудностью точной диагностики
того или другого вида овариопатологии, проводимой методом ректальной
пальпации. Даже опытные исследователи при данном виде диагностики
совершают ошибку в 20-30% случаев. Принимая во внимание это
обстоятельство, мы поставили цель разработать унифицированный метод,
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
14
позволяющий добиваться более стабильной эффективности. Для этого
испытали обработки на фоне предварительной гестагенизации.
Позитивное воздействие препаратов этого ряда определяются двумя их
противоположными свойствами: блокировать активность фолликулогенеза и
активизировать
воспроизводительную
функцию.
Второе
свойство
обусловлено тем, что после прекращения действия экзогенных прогестагенов
проявляется инверсия ответа, характеризуемая целесообразной оптимизацией
выброса гипофизом гонадотропных гормонов. В рамках биотехнических
мероприятий, благодаря этому эффекту, прогестагены потенцируют
эффективность гонадотропных препаратов и гонадолиберинов. Поэтому
инъекции прогестагенов, вводимые в режимы обработок при индуцировании
охоты, значительно повышают вероятность наступления и точность ее
синхронного проявления у максимального числа животных. Длительный
период имитации гормональной активности желтого тела блокирует
интенсивность овариальных процессов. За этот период времени происходит
нормализация структурных нарушений как в яичниках, так и в
эндометриальных слоях. Этим можно объяснить усиление положительного
эффекта, когда при гипофункции яичников в обработку гонадотропинами
вводят прогестагены.
Включение
прогестерона
в
обработку
гонадотропинами
и
простагландинами обеспечивало приход в охоту до 100% коров и в
анэстральный период. Учитывая полученный положительный эффект,
провели опыт на коровах без клинически выраженных признаков патологии.
Таблица 2
Результативность индуцирования охоты фронтальным методом с
введением в режим обработки погестерона и сурфагона
Группа
ПОКАЗАТЕЛЬ
1
п
Обработано
животных, п
Пришли в охоту,
всего
- в том числе через:
48 часов
72 часа
Не пришли в охоту
Результативность
первого
осеменения
Индекс осеменения
* -Р<0,05
** . -Р<0,01
*** -Р<0,001
II
"/.
п
III
%
100,0
13
65,0+10,67
53,8±11,15
46,2±11,15
35,0±10,67
46,7±11,16
20
100,0
20
100,0
16
80,0+8,94
20
100,0±0,00**
15
1
4
75,0+9,88
5,0+4,87**
20,0±8,94
18
2
90,0+6,71*
10,0±6,71*
-
-
7
6
7
10
62,5± 10,83
13
65,0± 10,67
б
иS+0,09*
1,6+0,08***
%
п
20
2, 1± 0,08***
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
15
С целью синхронизации применили 3 схемы обработки: 1-й группе в/м
вводили 1% масляной раствор диамола в дозе 5 мл, через 10 дней - ГСЖК и
эстуфатан в дозе 300 ед. и 500 мкг, соответственно. Во второй группе
проводили то же самое мероприятие, но перед инъекцией диамола в/м
инъецировали 10,0 сурфагона. В третьей группе охоту индуцировали при
хорошо выраженном желтом теле 500 мкг эстуфалана. Перед осеменением в
индуцированную охоту коровам опытных групп проводили еще одну
инъекцию сурфагона. Вторую группу обработали так же.
Введение сурфагона дало позитивные результаты (табл. 2).
Учитывая, что обработки в группах проводили фронтально, эффект
первой инъекции сурфагона во второй группе можно объяснить овуляцией
или лютеинизацией фолликула, который неизбежно присутствоват у какогото числа животных, а вторая инъекция сурфагона, проведенная при
осеменении, стимулировав овуляцию в оптимальные сроки. Если учесть,
что при фронтальной обработке большой группы коров в их числе окажутся
животные с фолликулярной кистой, то инъекция сурфагона вызовет ее
лютеинизацию. При наличии в группе коров с лютсиновой кистой и
персистентным желтым телом действие сурфагона и прогестерона усилит
циторсцепторную
чувствительность
лютеальных
образований
к
последующей инъекции простагландина. Интегрированная в настоящий
режим обработок инъекция гонадотропина будет способствовать унификации
предовуляторной фазы у всех взятых в обработку животных независимо от
исходного состояния яичников. В результате все, подвергнугые обработке
коровы, синхронно проявляют детерминированную в оптимальный срок
охоту. Данное обстоятельство дает основание считать предлагаемый режим
гормоначьного воздействия в определенной степени унифицированным, что
позволяет применять как в сомнительных случаях, так и при твёрдо
установленном характере овариопатологии—персистентном жёлтом теле,
фолликулярной и лютеальной кисте.
3.2.2. Разработка биофизических методов нормализации
нарушений
воспалительного
характера
как
элемента
биотехнологии
воспроизводства
Подавляющее большинство исследований по разработке методов по
биотехнологии гормонального контроля репродуктивной функции коров
относится к регуляции генеративной функции яичников в норме и патологии.
И лишь отдельные исследования в рамках программы биотехнологических
методов воспроизводства поголовья в скотоводстве посвящены проблемам
структурных нарушений воспалительного характера органов репродуктивной
системы, что значительно снижает их практическую эффективность. В этом
смысле показательны собственные исследования, определившие степень
негативного влияния на воспроизводительную функцию сопряжено
протекающих с овариопатологией воспалительных процессов в матке.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
16
В агрофирме «Родина» Гафурийского района РБ распространение эндо­
метритов, сопряженных с гипофункциональным состоянием яичников
составляло в 2003 г. 51,9% от числа обследованных коров. В других
хозяйствах из 300 обследованных в 2002 г. коров с различными формами
овариопатологии у 29,6% зафиксировали эндометриты, а в 2003-2004 гг. из
180 обследованных проблемных коров у 80% в сочетании с гипофункцией.
Возникала ситуация, когда эндометриты, перешедшие в хроническую трудно
диагностируемую
форму
течения,
после
восстановления
нормофункиионалыюй
циклической
активности
яичников
крайне
отрицательно влияли на плодотворность осеменений. Поэтому очевидно, что
профилактика и устранение эндометральных нарушений — один из
важнейших
аспектов,
определяющих
конечную
эффективность
биотехнологии воспроизводства. Особую проблему представляют животные
с субклиническим течением эндометрита. По нашим данным из общего
количества проблемных коров, доля животных с субклиническими
эндометритами может достигать 49%. Если диагностика клинически
выраженных эндометритов не представляет сложности и больных
подвергают
своевременным
обработкам,
то
точная
диагностика
субклинических форм эндометрита возможна только при гистологическом
исследовании биоптатов эндометрия (М.В. Емельянова и др., 1989; К.
Arbeiter, 1995), что в условиях производства не представляется возможным.
В подобной ситуации особое значение придают метафилактическим
утероинфузиям, т.е. обработкам потенциально больных животных, к которым
относят коров, проявивших отклонения во время родов (Berger, 1997).
Публикации, отражающие исследования по локальным метафилактическим
мероприятиям
касаются
в
основном
применения
антибиотиков,
сульфаниламидов, нитрофурановых препаратов и др. в различных
сочетаниях, что на практике далеко не всегда приводят к успеху.
Рассматривая профилактическую санацию матки как неотъемлемый
элемент при проведении биотехнических
мероприятий, отмечают
проблематичность целесообразности утероинфузий в послеродовой период
(W. Bentle, 1999; G. Berger, 1997). В течение первых двух суток после отёла
формируется слизистая
пробка шейки матки. Слизистая
пробка
предупреждает проникновение инфекции, создает условия для нормального
распада карункулов и регенерации эндометрия. В случае разрушения
слизистой пробки велика вероятность осложнений. На основании этого не
рекомендуют промывание матки после родов. В целом, до настоящего
времени не полностью разработаны достаточно эффективные и надёжные
методы профилактики и нормализации структурных нарушений эндометрия.
Для
функциональной
и
структурной
нормализации
эндометрия
традиционными методами требуется длительное применение препаратов, в
т.ч. импортных, значительная трудоёмкость, что обусловливает финансовоэкономические издержки. Данный фактор аргументировал проведение
исследований по разработке режимов биофизических методов воздействия на
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
17
органы репродуктивной системы для нормализации различных видов
структурных отклонений.
В процессе проведения работ по этому разделу мы пришли к
заключению, что для проведения биотехнических мероприятий необходимы
портативные, переносные, с автономным электропитанием лазерные
аппараты, со следующими параметрами работы: мощность от 4,0 до 15,0 Вт,
длина волны от 870 до 970 нм, частота модуляции от 50,0 до 5000,0 Гц,
позволяющие проводить обработку животных в стойлах, на скотных дворах и
в летних лагерях. Аппараты должны быть предназначены для воздействия на
биологически активные точки (БАТ), кожные покровы и путём
внутриполостного применения. Этим требованиям отвечают лазерные
аппараты СТП-3, Милта-МВ, Вега-МВ и др.
Механизм биологического эффекта, достигаемый при применении
этих аппаратов реализуется посредством четырех физических факторов:
низкоинтенсивного импульсного лазерного излучения (ЛИ), непрерывного
инфракрасного (ИК), пульсирующего красного (ПК) и постоянного
магнитного поля (ПМП).
Нами было проведено большое число исследований для отработки
методов и режимов лазерного облучения матки. Исследованиями
установлена высокая и приблизительно равная эффективность всех
рекомендуемых методов облучения (накожный, ректальный и на БАТ).
Тенденцию по получению более высокой и стабильной эффективности
получали в
группах коров при сочетанном методе—в дополнение к
лазеропунктуре применяли препарат гистерофур согласно инструкции.
Поиск БАТ, а также оценку их функционального состояния проводили
прибором «Ветта-Д», выбор БАТ для облучения определяли с учетом
топографического
расположения матки, руководствуясь при этом
«Наставлением по применению метода акупунктуры для профилактики и
терапии акушерско-гинекологических заболеваний коров и импотенции
быков» (1994).
Проведением сравнения данных по применению облучения БАТ была
установлена наибольшая эффективность если лазеропунктуру выполняли по
точкам № 11, 12, 32. При этом улучшаются такие показатели, как индекс
осеменения и число дней бесплодия в расчете на одну корову.
В основе терапевтического действия низкоэнергетического лазерного
изучения лежит активизация в организме животных общего и местного
иммунитета. В этой связи большую актуальность имеют исследования,
направленные на изучение влияния лазерного излучения на динамику
иммунобиологических
показателей организма коров. Исследования
относительно данного аспекта провели на коровах, которые по принципу
аналогов были разделены на две группы: опытную и контрольную. Опытная
группа состояла из 10 коров с послеродовым эндометритом, которых
облучали монолазеропунктурным методом, воздействуя на биологически
активные точки-рецепторы согласно «Наставлению по применению метода
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
18
акупунктуры для профилактики и терапии акушерско-гинекологических
заболеваний коров» (2000).
Вторая группа - контрольная — состояла из 10 интактных коров.
Проведение лазеропунктуры осуществляли аппаратом квантовой
терапии РИКТА-МВ. Отбор проб крови проводили в день начала опыта и
после 8 сеансов лазеропунктурного лечения.
Таблица 3
Биохимические показатели крови больных эндометритом коров
Контрольная группа
Показатели
До начала
опыта
Общий белок, г/л
Опытная группа
После опыта
До начала
опыта
После опыта
76.7±0,91
78,7± 1,34
81,2±1,30*
82,4±1,82
38,5*2,07
39,l±t,86
43,4±2,23
40.8±1,91
а-глобулин, %
1
11,4±0,49
12,1 ±0,52
10,6±0,72
16.5±0.62***
р-глобулин, %
|
Альбумины. %
15,7±0,25
16,2±0,74
13,8±0,81*
15.2t0.95
у-глобулин, %
29.8±1.6
27,9*1,68
30,9±1,54
37,6±1.84*
IgG, мг/мл
20,4*0,71
21,2±0,94
21,8±0,70
22,511.25
IgM, мг/мл
1.9±0,32
2,1 ±0,26
2,3±0,21
2,7±0.42
Общие лип иды, г/л
2.SA0.25
2,6±0,27
3,4±0,32
3,6±0,41
Холестерин, ммоль/л
4,4±0.28
4,2±0,33
4,6±0,28
5,3±0.24
Глюкоза, ммоль/л
2,5±0.16
2,8±0,18
2,8±1,31
2,6±1.08
Гемоглобин, г/л
98.7±1,52
102,0±2,48
101,0±1.83
99.4±1,63
Гематокрит, %
33.0±0,92
32,4±1,05
32,8±1,37
32,5±1,84
Бактерицидная
активность сыворотки
крови, %
56.3±0,39
57,2±1,26
50,4±0,71***
68,6±0,91***
*
-Р<0,05
*** -Р<0,001
Результаты исследований (табл.3)
свидетельствуют, что все
биохимические показатели в контрольной и опытной группах находятся в
нормативных физиологических пределах.
Исследования по проблематике «маститы и репродуктивная функция
коров» проведенные нами в различных хозяйствах Северо-Кавказского
региона, совместно с научными сотрудниками ГТАУ, убедительно показали,
что воспалительные процессы молочной железы оказывают резко негативное
влияние на репродуктивный статус в молочном скотоводстве в целом и на
эффективность биотехнических мероприятий по регуляции репродуктивной
активности, в частности.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
19
На каждый текущий день болеют маститом в среднем 15,3% коров, в
том числе выраженным клинически 4,04% и скрытым 11,2%. У 40,9%
больных маститом коров диагностировали те или иные нарушения
репродуктивной функции. Существенно то, что для скрытой формы маститов
характерно сочетание патологии репродуктивной функции в 42,2% случаев.
Маститы отрицательно влияют на воспроизводительную функцию
коров и проведение биотехнических мероприятий по воспроизводству даже в
тех случаях, когда не регистрируют клинически выраженной патологии
органов репродуктивной системы, причём негативное влияние мастита имеет
проявление не только в период течения патологического процесса, но и на
протяжении двух месяцев после восстановления. У таких коров фиксировали
нарушения
половой
цикличности
и
снижение
плодотворности
искусственного осеменения до 21%, по сравнению с контролем.
Сравнивая результаты наших исследований с данными литературы,
можно
сделать
заключение,
что
нарушения
молочной
железы
воспалительного характера, проявляясь в скрытой или клинически
выраженной форме, имеют повсеместное распространение и регистрируются
у 30-40 и более процентов лактирующих коров. Это влечет за собой не
только снижение молочной продуктивности, но и резкое ухудшение
показателей воспроизводства. Более того, не принятое во внимание наличие
патологического процесса в молочной железе снижает эффективность
биотехнических мероприятий по нормализации репродуктивного статуса.
Учитывая, что очень часто патология репродуктивной системы
протекает скрыто, это диктует необходимость комплексных мероприятий при
проведении работ по биотехнологии воспроизводства. Это обстоятельство
послужило аргументацией проведения исследований по этой теме в
достаточно широком объеме.
Проведённые исследования показали, что монолазерное облучение
является безболезненным и эффективным методом воздействия при
маститах, быстро приводящее к позитивной коррекции патологического
процесса в 91,5 % случаев. Однако, при гнойном характере воспаления
зарегистрирован низкий уровень восстановления, не превышающий 28,5 %,
что можно объяснить глубокими деструктивными и необратимыми
изменениями паренхимы молочной железы.
В целом, эффективность лазерного облучения при субклиническом
течении маститов достигала 97,1%, что является хорошим результатом,
намного превышающим лучшие способы медикаментозной терапии.
Для изучения вопроса об эффективности лазерного облучения вымени
при различных формах патологии в производственных условиях мы
провели анализ результатов мероприятий, проведённых по составленным
нами методикам штатными специалистами на коровах, эксплуатируемых на
молочных фермах
Агрофирмы «Прокошево» Кстовского
района
Нижегородской области.
Мероприятия осуществляли, используя лазерный аппарат СТП-3,
путем облучения молочной железы контактным сканирующим методом в
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
20
режиме: частота импульсов 10-200 Гц, экспозиция 2-3 мин. Курс— 5-8
сеансов.
Таблица 4
Данные результатов лазерного облучения молочной железы с различной
формой патологии
Диагноз
Клинически выраженный
мастит (не зависимо от
дифференциации)
Субклинический мастит (не
зависимо от
дифференциации 1
Отек вымени
Раны вымени
Раздражение вымени
Выявлено коров с патологией
молочной железы н подвергнуто
облучению (по голам)
1997 1998 1999 Г2000 Всего
Эффект и внос i ь
п
%
220
90
446
613
1369
1163
85.1±0,96
130
303
330
192
949
931
98,1±0.44***
85
15
100
90
11
120
78
6
190
111
20
200
359
52
610
359
48
610
100.0+0,00***
92.4+3.70
100.OrO.00***
*** -РОДЮ1
Данные подтвердили, что лазерное облучение коров с различной
патологией вымени обладает высокой позитивной эффективностью, которая
получена в производственных условиях с типовым содержанием,
кормлением и доением коров (табл. 4). Эффективность лазерного
облучения при клинически выраженных маститах составила 85,1%, что
несколько меньше аналогичных показателей, получаемых нами в экспери­
менте. Эффективность облучения молочной железы при субклиническом
мастите и ранах вымени, полученных в производственных условия оказались
выше экспериментальных, приблизительно, на 1,0-2,0%. При лазерном
облучении отеков и раздражений вымени
специалистами-практиками
получен 100% результат.
Таким
образом,
полученные
нами
экспериментальные
и
производственные данные дают основание утверждать, что практика
молочного
скотоводства
имеет
высокоэффективный,
простой
и
экономичный
метод
биофизического
воздействия,
который
по
эффективности не только не уступает медикаментозному, но и
превосходит его. Лазерное облучение коров, имеющих нарушения молочной
железы, можно применять во всех молочных хозяйствах различных форм
собственности. После ознакомления с методикой применения, лазерное
облучение могут проводить специалисты среднего звена, что позволяет
рассматривать этот метод биофизического воздействия, при одновременной
экономичности
и
эффективности,
широко
доступным.
Данное
обстоятельство квалифицирует его как технологический
элемент
мероприятий по активизации репродуктивной активности.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
21
В дополнение к гематологическим исследованиям, проведённым на
коровах после облучения для нормализации эндометральных нарушений мы
изучили влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на гемопоэз.
Исследования выполнили на 30 коровах черно-пестрой породы в возрасте 3-9
лет, которые были распределены на три группы. Животные первой группы
(10 коров с воспалением молочной железы) ежедневно в течение 10 дней
подвергались лазерному воздействию в области пораженных четвертей
вымени накожным контактно-сканирующим методом. На коров второй
группы (п = 10) с эндометритом, действовали трансректальным методом. Для
облучения использовали лазерный аппарат СТП-3 при продолжительности
каждого сеанса - 1-2 мин., всего 10 сеансов. Здоровые коровы (п = 10)
служили контролем.
Таблица 5
Морфологические показатели крови коров до и после лазерного
облучения
О п ы т н ы е группы
Контрольная
группа
До
облуч.,
Эритроциты,
10|2/л
5,6±0,07
5,8*0,10*
5.5±0.07
5.9±0,18
5,2*0,08
5,4*0,11
Лейкоциты,
Ю'/л
9,3*1,93
9,1±0,66
9,3*1,04
7,1 ±0,24*
6,7*0,52*
6,6*0,78
Базофапы, %
0,4±0,22
0,2*0,21
0,3±0,20
0,6±0,19
0,5*0,19
0,7*0,13
14,0*3,80
12,8*0,89
Показатели
III
Эндометрит
До
облуч.,
М±т
III
Мастит
После
До
облуч.,
облуч.,
Эозинофилы, %
13,7±2,50
11,4±1,09
9,6*1,80
11,9*1,21
Юные нейтрофилы, %
0,2*0,21
0,5*0,52
0,2*0.13
0,3±0,Ю
0,1*0,08
0,4*0,20
Палочкоядеркые, %
5,4*1,41
5,0*0,87
4,8*0.71
6,1±0,55
3,2*0,52
4,1*0,57
Сегментоядерные, %
15,1*1,82
12,2*1,13
16,2±3,Н
14,4*1,10
12,2*1,56
12,0*1,01
Лимфоциты, %
61,7*2,09
66,8*1,61
67,3*4,33
64,3*2,10
67,7*1,92
Моноциты, %
1,5±0,4
1,9±0,28
1,6±0,37
2,4*0,71
2,2*0,41
69,4*2,12
0,5*0,20*
*
* - Р<0,05
** -Р<0,01
Лабораторно проводили морфологические исследования крови перед и
после 10 сеансов лазерного облучения. В контроле отбор проб крови
проводили в те же сроки, что и у животных опытных групп.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
22
Изучение морфологических показателей крови животных контрольной
группы за время постановки опыта выраженных изменений выходящих за
пределы нормы, не зафиксировали (табл. 5).
Воздействие лазерного излучения на молочную железу положительно
сказалось, на эритропоэзе, в результате чего количество эритроцитов
увеличилось и превосходило показатели в контроле на 7,4%. Показатели
солержания нейтрофилов, лимфоцитов и моноцитов приблизилось к
показателям контрольных животных.
Можно констатировать, что после лазерного облучения наблюдается
незначительное снижение числа базофилов и эозинофилов. Снижение числа
эозинофилов почти до нормы дает основание считать, что лазерное
облучение обладает корректирующим действием в отношении показателей
лейкограммы.
Данные гематологических исследований эндометритных коров
свидетельствуют, что воздействие лазерным излучением на репродуктивные
органы, также как и при воздействии на молочную железу, способствует
увеличению в крови количества эритроцитов и снижению количества
лейкоцитов. Это свидетельствует о положительном влиянии лазерного
облучения на эритропоэз и затухание воспалительного процесса.
В целом, анализ результатов гематологических исследований
показывает, что при низкоинтенсивном лазерном облучении в организме
коров
происходит
активизация
неспецифического
клеточного
и
гуморального иммунитета и при этом не нарушается кроветворная функция
организма.
3.3. Причины и пути снижения эмбриональной смертности
3.3.1. Основные факторы, приводящие к эмбриональным потерям
Анализ результатов собственных исследований* показывает высокую
вариабельность показателей жизнеспособности эмбрионов. В ряде случаев
жизнеспособность эмбрионов может достигать S0,0%, но может не
превышать
10,0-17,0%.
Выяснено,
что
эмбрионы
здоровых
высокопродуктивных и проблемных коров имеют низкую степень
жизнеспособности по сравнению с эмбрионами коров со средней молочной
продуктивностью.
Анализ морфологической оценки показал, что у большой части
зародышей здоровых коров со средней продуктивностью стадия развития
соответствует своему возрасту. Число нормальных эмбрионов достигает
* В этом разделе в качестве метода исследований использовали элементы
технологии трансплантации
эмбрионов—индуцирование
овуляции,
извлечение,
морфологическую оценку и культивирование эмбрионов
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
23
68,9%, дегенерированных — 20,8% и неоплодотворённых яйцеклеток 10,3%, в то время как число нормальных эмбрионов у высокопродуктивных
здоровых и проблемных коров меньше на 13, 0 и 16,6% и больше
дегенерированных эмбрионов — на 4,7 и 4,1%, соответственно.
Оплодотворяемость яйцеклеток у среднепродуктивных коров выше на 8,2%12,6.
Таблица 6
Процентное соотношение численности извлекаемых эмбрионов на
разных стадиях развития*
Стадии развития
эмбрионов
Здоровые коровы-доноры
Высокопродук­
Среднепродуктивные**
тивные**
Проблемные
коровыдоноры**
2-клеточные
0,6-1,0
3,9-5,3
4.0-7.6
4-клеточныс
0.4-1,1
3,9-4,4
2.4-4,5
8 -клеточные
0,4-1,0
1,9-2.5
1.9-2.0
1,1-1,5
20,6-36,4
40.8-1,8
1 6-кл сточные
0,3-1,2
Ранняя морула
13,7-16,0
Поздняя морула
37,6-40,0
Ранняя бластоциста
Окспандированная
бластоциста
0.9-3.9
28,0-29.9
19,1-22,7
19,9-32,9
9,1-15,1
12,1-16,1
0,9-1,1
0.8-1.0
5.1-10.1
* Все извлечения проведены на 7-ой день после первого осеменения. Всего исследовано
9487 эмбрионов, в т.ч. 3733 от среднепродуктивных, 2825 и 2929 высокопродуктивных и
проблемных коров, соответственно
** Колебания средних показателей выхода интактных эмбрионов в различных опытах
составляли 6,1 ±0,2— 7,9±0,2; 5.3*0,3—7,6*0,1; 4,3i0,01 — 6,9*0,2 (Р<0,01) для
среднепродуктивных, высокопродуктивных и проблемных коров, соответственно.
Более 50% жизнеспособных эмбрионов здоровых коров со средней
продуктивностью на седьмой день эмбриогенеза достигают стадий поздней
морулы или ранней бластоцисты (табл. 6).
Доля отстающих в развитии эмбрионов от высокопродуктивных и
проблемных коров составляет в среднем до 13,7 и 14,2%, соответственно.
Причём прослеживается тенденция отставания в скорости развития как для
ранних и поздних морул, так и бластоцист. Таким образом, следует
констатировать, что характерная особенность эмбриогенеза у проблемных и
здоровых высокопродуктивных коров заключается в снижении скорости
развития эмбрионов.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
24
Опыты по культивированию эмбрионов отличного и хорошего качества
показали, что снижение жизнеспособности во многом обусловлено
негативными
морфологическими
изменениями
эмбрионов
на
ультраструктурном уровне, являющихся производными физиологического
статуса коров-доноров.
В определённой степени это подтверждается исследованиями,
проведёнными на коровах разного возраста, продуктивности и породной
принадлежности. Основанием для регистрации гибели зародышей было
наличие у животных удлиненного интервала между осеменениями - 25-35 и
более суток. Было выяснено, что при плодотворности осеменений
составляющей до 52%, основные эмбриональные потери приходились на 17 и
22 дни после осеменения, в последующие сроки они снижаются от 10 до 2%
(рис 3).
••*
/\ - лч
Ч~1
о4
3
О
О
5
О
3
СО
\
Ф
9'
<^1
<ч
V"!
аль
X
о
о
О
Ч
\
*Ч
\\
х
\
Ч
ч
\
\
\
\ *•
\
•
<о
10
20
30
40
50
60
70
сроки стельности
''
чёрно-пёстрая порода
симментальская порода
айширская порода
Рис 3. Эмбриональные потери в различные сроки начального периода
стельности
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
25
**.
£
отер
я
**
"3-
о
т
в
X
5
С-1
g
М"\
iO
о
о
«л
'••'
/
.••*v*
s
.•• *
X
.-• .•••
s '
^^S
2
3
4
S^
/
5
6
7
молочная продуктивность, тыс. кг
чёрно-пёстрая порода
симментальская порода
айшнрская порода
Рис 4. Количество эмбриональных в зависимости от числа лактации
л-
4
5
6
число лактации
чёрно-пёстрая порода
симментальская порода
айшнрская порода
Рис.5. Зависимость величины эмбриональных потерь от молочной
продуктивности
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
26
Число случаев эмбриональных потерь достоверно коррелировало с
показателями удоев коров по 4-5-ой лактации, г = 0,35 (рис 4). Менее всего
эмбриональные потери характерны для коров-первотелок и коров 7 лактации,
в других возрастных группах количество эмбриональных потерь достигает,
приблизительно, одного, достаточно высокого уровня (рис. 5).
Таким образом, частота ранней эмбриональной гибели у коров не
зависит от породной принадлежности и зависит, в основном, от величины
удоя н возраста. При этом следует констатировать, что повышение частоты
эмбриональной смертности и ухудшение других показателей репродуктивной
активности, наряду с другими факторами, в первую очередь, вызваны
ослаблением у высокопродуктивных и проблемных коров потенциальной
способности подготовки к новой стельности в период, приходящийся на рост
и пик лактационной кривой.
3.3.I. Изучение
свойств антипростагландинов,
как
средств
снижения эмбриональной
смертности
Реальной возможностью позитивно продвинуться в решении проблемы
эмбриональной
смертности,
послужили
исследования
свойств
лютеостабила—препарата, относящегося к группе антипростагландинов. На
7-8 сутки после оплодотворения из зиготы формируется поздняя морула,
которая, проникая в матку, вступает в стадию развития ранней бластоцисты,
после чего происходит ее имплантация, опосредованная механизмом
«материнского распознавания начала беременности». В результате этого
желтое тело цикла трансформируется в желтое тело беременности, что
обусловливает критическую фазу в эмбриогенезе, так как нарушение
регуляторного механизма инкреции прогестерона желтым телом, неизбежно
приводит к эмбриональной гибели. Негативную ситуацию можно
компенсировать введением лютеостабила в период с 4 по 10-е сутки после
осеменения коров, учитывая свойство лютеостабила блокировать действие
маточного простагландина и тем самым предотвращать полный или
частичный лизис желтого тела, а следовательно, сохранять его инкреторную
активность. Механизм такой блокады основан на конкурентноантагонистическом
свойстве
лютеостабила
вступать . в
связь
с
циторецепторами лютеальной ткани, после чего желтое тело становится
индифферентным к действию маточного простагландина.
В задачу нашей работы входила оценка антилютеолитических свойств
лютеостабила. Исследования включали опыты, которые проводили в колхозе
им. Фрунзе (Белгородская обл.) на здоровых коровах черно-пестрой породы в
возрасте 4-5 лет с удоем 4-5 тыс. кг молока за лактацию.
Анализировали способность лютеостабила оказывать поддержку
функциоанльной активности желтого тела за счет блокады лютеолитического
действия простагландина Fjcu Функциональное состояние репродуктивной
системы коров соответствовало 7-10 суткам полового цикла; животные
имели хорошо выраженное желтое тело в одном из яичников. Было
сформировано четыре группы коров по 10 гол. в каждой: I - контроль; II -
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
27
внутримышечные инъекции эстрофана (500 мкг) для стимуляции
лютеолизиса; Ш - внутримышечные инъекции лютеостабила (1 мг) с целью
блокады спонтанного лютеолизиса; IV - внутримышечные инъекции
эстрофана (500 мкг) и лютеостабила (1 мг). У всех животных проводили 5кратный забор крови с интервалом 24 ч. для оценки динамики концентрации
прогестерона.
Режим проведения опыта позволял по изменениям концентрации
прогестерона в крови в сравнительном аспекте проследить за характером
снижения инкреторной активности желтого тела в период спонтанного (I
группа) и индуцированного (II группа) лизиса, но главное - подтвердить
возможность в тех же условиях (соответственно II и III группы) блокировать
лизис (благодаря введению лютеостабила) и оценить инкреторную
активность желтого тела.
5,0
4,5
4,0
3,5
III
^—^111"
\
3,0
^ ^
\ _ — — —
2,5
'
^ ^ ^ ^
Ч
\
2,0
1,5
Х
>
0
24
48
72
96
120
Время забора проб крови после инъекции, ч
l-IV-группы животных
Рис. 6. Динамика концентрации прогестерона в крови коров чернопестрой породы после внутримышечных инъекций эстрофана и
лютеостабила: I - IV — группы животных. Р<0,01.
Результаты опытов показали, что у всех обработанных коров II
группы инъекция эстрофана вызывала быстрый лизис желтого тела и
проявление признаков охоты, что сопровождалось физиологически
нормальным снижением концентрации прогестерона в крови до
исходного значения с последующим постепенным повышением
последней к 96-120 ч. после инъекции (рис. 6).
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
28
В контроле (I группа) нами было зафиксировано постепенное
снижение концентрации прогестерона в крови, свидетельствующее о том,
что пик функциональной активности желтого тела у большинства коров
пройден и начался постепенный процесс его регрессии, что отражает
нормоциклическое функционирование яичников.
Динамика концентрации прогестерона у коров III группы
свидетельствует о том, что после инъекции лютеостабила к 48 ч.
спонтанная регрессия желтого тела заблокирована, и, более того,
усилилась
циторецепторная
чувствительность
последнего
к
лютеотропному гормону (ЛТГ). Вследствие этого к 96-120 ч. произошло
восстановление, активация и в определенной степени стабилизация
функциональной деятельности желтого тела на более высоком уровне, о
чем свидетельствует повышение концентрации прогестерона - выше
исходного уровня на 0,5 нг/мл.
Характер динамики концентрации прогестерона в крови коров IV
группы был аналогичен таковому животных II группы в течение 24 ч.
после инъекций, а затем экзогенно стимулированный лизис желтого тела
был заблокирован лютеостабилом. Однако полного восстановления
эндокринной активности не произошло, что, по-видимому, обусловлено
необратимыми структурными изменениями, успевшими к этому времени
произойти в некоторых гистологических структурах желтого тела в
результате действия синтетического аналога простагландина. Тем не
менее можно констатировать, что в целом инкреторная активность
желтого тела не снижалась до критического уровня, который мог бы
обусловить эмбриональную смертность на начальных стадиях развития
зародыша.
Это
обстоятельство
аргументирует
правомочность
применения лютеостабила как средства борьбы с эмбриональными
потерями.
3.3.2. Эффективность мероприятий, направленных на снижение
эмбриональных потерь
В процессе собственных исследований для предотвращения ранней
эмбриональной смертности мы проводили испытания
инъекций
прогестерона, сурфагона и лютеостабила в сочетании с другими
биорегуляторами. Испытания показали приблизительно одинаковую,
колеблющуюся в определённых пределах, но приемлемую эффективность
испытанных препаратов.
На заключительном этапе работы мы провели эксперимент с учётом
того, что на практике показатель стельности коров после трех осеменений в
целом может достигать 85-90%. Для успешного осеменения оставшихся
коров требуется проведение специальных мероприятий. Предполагая, что во
время третьего эструса с высокой долей вероятности возможна
лютеинизация фолликула, рекомендуют стимулировать овуляцию либо
введением синтетического гонадолиберина, либо ХГЧ. Положительные
результаты проведенных опытов с целью определения эффективности
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
29
введений сурфагона и ХГЧ параллельно осеменению в индуцированную
ГСЖК - эстуфаланом охоту на фоне предварительной гестагенизации, дали
основание испытать сравнительную эффективность инъекции сурфагона,
ХГЧ, прогестерона и лютеостабила на 7-10-й день после осеменения с целью
профилактики эмбриональных потерь. Для профилактики или устранения
возможных эндометральных нарушений применяли лазерное облучение
матки.
Сформировали контрольную и четыре опытных группы животных. Во
все группы подбирали коров, находящихся в состоянии лютеальной фазы
полового цикла. У коров всех групп охоту индуцировали ГСЖК —
эстуфаланом на фоне предварительной гестагенизации. Перед осеменением
коровам всех групп стимулировали овуляцию инъекцией сурфагона. Коровам
второй, третьей, четвертой и пятой групп на 7-10-й день после осеменения
вводили сурфагон, ХГЧ, прогестерон и лютеостабил для предотвращения
вероятной эмбриональной смертности. Препараты вводили в дозах согласно
наставлениям.
Таблица 7
Результаты биотехнических мероприятий по профилактике эмбриональных
потерь, проведенных после осеменения в индуцированную охоту
Показатели
Число Плодотворность Сервис-период
коров 1-го осеменения
Индекс
осеменения
Всего стельных за
опытный период
п
п-У.
М+т*
М±т*
п-%
Irp.
(контроль)
25
1 4 - 56,0+9,93
119.0 ±8,10
2,1+0,01
21-84,0+7.33
Игр.
25
16-64,0+9,60
81,9 ±533***
1,9 ±0,01***
24-96.0±3,92
Шгр.
35
23 - 65,7±8.02
84,1 + 4,11*** 1,7 ±0,10***
3 5 - !00,0±0,00*
IV гр.
30
19-63,3±8,80
80,0 ±3,33***
1,8±0,П*
3 0 - 100,010,00*
Vip.
25
16-64,0+9,60
82,1 ±3,13***
1,8 ±0,09**
23-92,0+5,43
* - Р < 0,05
** -Р<0,01
*•* -Р<0,001
Результаты опыта на перегулявших коровах, осемененных в
индуцированную охоту, показали, что применение предварительной
гестагенизации
и
инициация
сурфагоном
овуляции
экзогенно
стимулированного к росту и созреванию фолликула приводят к улучшению
результативности осеменения. Весь комплекс проведенных обработок,
включающий профилактику эндометральных нарушений и эмбриональных
потерь, в достаточной степени предотвращает эмбриональную смертность на
ранних этапах развития зародышей. Введение сурфагона, ХГЧ, прогестерона
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
30
и лютеостаоила на 7-10-й день после осеменения
одинаковые, позитивные показатели (табл. 7).
дают
примерно
3.4. Обобщающие исследования по улучшению репродуктивного
статуса на основе биотехнических мероприятии
3.4.1. Роль лазеропрофияактики нарушений
воспалительного
характера органов репродуктивной системы при синхронизации охоты
Увеличение или уменьшение продолжительности
48-часового
интервала от момента инъекции простагландина до проявления охоты,
приводят
к
снижению
результативности
осеменения
в
охоту,
индуцированную простагландинами (Л.К. Эрнст и др., 1993; W. Bentle, 1990).
Поэтому срок прихода коров в индуцированную охоту определяет
эффективность схем и режимов обработок с целью синхронизации. С учетом
этого мы провели исследования сравнительной эффективности применения
отечественных аналогов простагландина F2a - клатрапростина, эстуфалана и
анипроста в комплексе с прогестагенами и лазеропрофилактическим воздей­
ствием на матку и молочную железу. Обоснованием включения лазерного
облучения в дополнение к комплексу гормональных средств, инлуцируюших
наступление охоты, служили сведения об оптимизации функциональных
механизмов гипоталамо-гипофизарно-яичниковой системы в результате
квантовых воздействий. Поэтому мы предположили, что квантовое
воздействие, включенное в комплекс обработок должно улучшить
результативность по сравнению с контролем, что определит степень
ценности метода как элемента биотехнологии воспроизводства. Критерием
биологической полноценности того или иного метода воздействия служил
интервал времени прихода коров в охоту после инъекции простагландина,
причем, оптимум должен быть близок к 48-часовому интервалу.
Исследования по данному разделу проводили в хозяйствах Уфимского
района с учетом зимне-весеннего, летнего и осенне-зимнего периодов на
коровах черно-пестрой породы.
Было сформировано шесть групп коров. Коровам первой, второй и
третьей групп охоту вызывали в спонтанный цикл, коровам четвертой, пятой
и шестой групп—в индуцированный введением 500 мкг эстуфалана цикл.
Синхронное проявление охоты у всех животных вызывали фронтальным
введением прогестагена мепрегнолацетат (5 мл 2% масляного раствора) и на
восьмой день инъецировали синтетические аналоги простагландина эстуфалана или анипроста в дозах согласно наставлениям. Коровам второй и
пятой групп за три дня перед началом обработок с профилактической целью
проводили трансректальную санацию матки лазером, с экспозицией по 2
мин. в день. Использовали лазерный аппарат «Рикта 01 (М2В)». Коровам
третьей и шестой групп дополнительно проводили лазерное воздействие на
молочную железу (табл.8).
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
31
Таблица 8
Сроки начала охоты после введения зтуфалана по периодам года
Группы
1(п = 20)
Н(п = 28)
III (n = 18)
IV ( п - 15)
V ( n = 21)
VI (п=21)
Методы воздействия
Перипл
гола
Гестаигеннз
Гестаигеннз
Гестаягениз
ация
ация
ация
Гестагениза
Гестагениза
ЛазероЛазероЛазероиия
иня
профилакти
профилакти
профнлакти
ка матки и
ка
ка
вымени
Гестаигеннз
ация
Лазеропрофилакти
ка матки и
вымени
Прололжительность интервала, ч ( М ± т )
Зимне53,9 ±1.64 48,6*1,11 48.0 ±1.01
весенний
Летний 55,9 ±1,90 50,8 ±1-20 49.8 ± 1.21
54.5 ±
0.08**
55,1 ±
1,09**
49,4 ±1,68 48,0 ±1.70
48,4 ± 1,60 48,0 ±1,01
Осенне- 50,1 ±2,10 49,1 ± 1.60 48.0 ± 1.06 50.1*1,19
49,4 ±
48,4 ±1,21
зимний
1,18**
В сред­
нем по
53,3 ±
53,3 ±
49,1 ± 1,48 48,2 ±1,31
49,5 ± 1.30 48.6 ± 1.10
трем пе­
0,79*
1,88*
риодам
* - Р<0,05
** -Р<0,01
Сроки проявления признаков индуцированной охоты имели опре­
деленную степень вариабельности. Разницу сравниваемых задержек
проявления охоты при синхронизации, проводимой в спонтанный (1, 2 и 3
гр.) и индуцированный цикл (3, 4 и 6 гр.), можно объяснить присутствием
различного числа растущих фолликулов предшествующей волны популяции,
т.е. как последействие нормальной динамики фолликулярного роста.
Средние интервалы стимулированной охоты в индуцированный цикл
различались по группам незначительно. Однако при обработке в осеннезимний и зимне-весенний периоды проявлялась тенденция к задержке
проявления охоты. Лазеропрофилактика оказывала влияние на выравнивание
этих показателей. Это можно объяснить тем, что воздействие лазером
приводит к нормализации структурно-функциональных нарушений в
эндометральных слоях, которые играют негативную роль в реализации
механизма плюс — минус взаимодействия гипоталамо-гипофизарного
комплекса, регулирующего последовательность проявления течки, охоты и
овуляции. Такие нарушения неизбежно присутствуют у определенной части
обрабатываемых животных, причем без каких-либо клинических проявлений.
Последовательное улучшение, т.е. приближение срока проявления
индуцированной охоты к оптимальному, показателей произошло в группах
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
32
111 и VI, в которых лазеропрофилактика была проведена в комплексе, на
матку и молочную железу.
3.4.2.
Стимулирование
овариальной
активности
в
поспеотёлышй
период
Осеменения в течение первых 30 дней после отела имеют наименьшую
результативность - до 2 1 % . В ачучае неплодотворного осеменения в этот
период для получения стельности необходимо провести не менее двух
осеменений. Наибольший процент коров после неплодотворного осеменения
в этот период приходит в охоту повторно через 28 и более дней. Данный
фактор является признаком эмбриональной смертности, которая по
учитываемым хозяйствам составляла в среднем до 31,8%.
Однако очевидно, что процесс осеменений, переносимый на более
поздние сроки после отела сопряжен с экономическими убытками за счет
возрастания дней бесплодия. Выходом из этой ситуации является
профилактика эмбриональной гибели. К такой профилактике правомочно
отнести стимуляцию овариальной активности в первый месяц после отела.
Данные мероприятия должны повысить показатели плодотворности
осеменений до сравнимых с показателями, получаемыми в более поздние
сроки. Для подтверждения этого тезиса мы провели опыты по
стимулированию репродуктивной функции в послеотельный период.
В рамках этих исследований нашей задачей было определить
оптимальный срок осеменения коров после отела и оптимизировать функции
яичников.
В результате исследований было установлено, что при осеменении
коров во временном интервале до 30 дней после отела стельными
становились 19,7% животных, что приблизительно вдвое меньше, чем в
более поздние сроки. Однако при таком сроке первого осеменения
отсутствовала выбраковка коров по причине многократных перегулов. При
осеменении в более поздние циклы оплодотворяемость возрастала и
достигала следующих показателей: при приходе в охоту в период 31-60 дней
после отела; б 1 -90 дней - 34,9%, более 90 дней - 35,8%.
С целью стимуляции воспроизводительной активности у 85 коров в
послеродовой период, начиная с 8-10 дня после отела, применили
следующую схему обработок: у коров независимо от функционального
состояния яичников проводили лазерное облучение матки и молочной
железы (см. методику), затем им инъецировали 1%-ный масляный раствор
прогестерона в дозе 10,0 мл, на восьмой день - ГСЖК и эстуфалан в дозах
1000 ИЕ и 2 мл соответственно и перед осеменением — 4,0 мл сурфагона. За
24 часа до введения прогестерона и перед осеменением инъецировали по 10,0
мл сурфагона.
Опытных животных дифференцировали на две группы: в I группу
включили животных, роды у которых прошли нормально, без осложнений, во
II - коров, имевших осложненные отелы.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
33
Выяснилось, что испытанная схема регуляции воспроизводительной
функции повысила долю коров, оплодотворившихся в течение первых 30
дней после отела, роды у которых были нормальными до 50% и д о 4 0 % у
коров после отёлов с осложнениями.
Таблица 9
Эффективность стимуляции функциональной активности яичников
Срок
первого
осемене­
ния
(дней)
Количе-ство
осеме­
ненных
коров
Оплолотворяемость после пер­
вого осеменения
п
%
Количество
перегулявших
коров
п
Показатель
выбраковки
многократно
перегулявших
коров
%
п
%
При нормальных отелах
До 30
20
10
50,0+11.18
10
50,0±11,18
31-60
10
6
60.0+15,49
4
40,0± 15,49
-
-
61-90
10
6
60,0+15,49
4
40,0± 15,49
1
25,0+21,65
<90
Всего
-
-
-
-
-
-
-
40
22
55,0+7,87
18
45,0±7,87
2
11,1+7,40
При осложненных отелах
До 30
20
8
40.0 + 10,95
12
60,0± 10,95
2
16,7+19,77
31-60
21
9
42,9+10,80
12
57,1 ±10,80
2
16,7± 10,77
61-90
28
12
42,9±9.35
16
57,119,35
3
I8,8t9,77
<90
16
6
37,5+12,10
10
62,5±12,10
2
20,0±12,65
Всего
85
35
41,2±5.34
50
58,8+5,34
9
18,0+5,43
Таким образом, использование примененной схемы обработки
способствовало восстановлению половой активности у анэстральных
лактирующих коров, что подтвердилось достоверным уменьшением
интервала от отела до оплодотворения на 15-40% по сравнению с контролем.
3.4.3. О влиянии сезонности на воспроизводительную
активность
Оценку влияния сезонности на плодотворность осеменения коров в
спонтанную охоту определяли методом ретроспективного анализа данных
зоотехнического учёта. Проанализировали данные по 900 коровам,
содержащимся в различных районах РБ. Кроме того, провели опыты по
изучению влияния сезона года на плодотворность искусственного
осеменения в индуцированную охоту на коровах по прошествии 60 и более
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
34
дней после отела без клинически выраженных признаков нарушения половой
функции. В четырех сериях экспериментов анализировали степень
положительного влияния биорегуляторов полового цикла и биофизического
воздействия на плодотворность осеменений.
В первой серии опытов коровам вводили сурфагон перед осеменением
в индуцированную ГСЖК и эстуфаланом охоту.
Вторая серия опытов отличалась тем, что охоту индуцировали
введением комплекса прогестаген - ГСЖК - эстуфалан.
В третьей серии опытов охоту индуцировали так же прогестагеном,
ГСЖК и эстуфаланом, а в дополнение к инъекции сурфагона перед и после
осеменения в течение трех дней коров обрабатывали лазером путем
воздействия на биологически активные точки (ВАТ), расположенные во
впадинах между остистыми отростками поясничных и крестцовых позвонков
и паравертебрально слева и справа на расстоянии 4-х поперечников пальцев
от дорсальной линии.
Лазерную обработку проводили один раз в день контактным
мобильным методом, передвигая лазерный излучатель в каудокраниальном
направлении с экспозицией 2-3 мин. на каждую зону, т.е. всего 6-9 мин. на
один сеанс. 11ри этом использовали лазерный аппарат «Рикта-04 (М2В)».
Четвертую серию проводили аналогично, что и в третьей, но
дополнительно проводили лазерную обработку молочной железы.
65
2,9
60
f2,7
55
"I
50
45
2,3 1
+ 2,1 о
40
о
Ч
о
с
с
- В 1.9 \ 1,9 ч
35
30
1,7
•+*-
1,5
25
lll-IV-V
VI-VII-VI1I
1X-X-XI
XII-I-II
- Плодотворность осеменений, % - -Ш - Индекс осеменения
Рис 7. Результативность осеменений по годам
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
35
Кроме того, в четвертой серии опытов
профилактировалн
эмбриональную смертность введением на 8-10-й день после осеменения
сурфагона, ХГЧ, прогестагена или лютеостабила.
Результативность осеменения коров анализировали на основании
данных ректальных исследований на стельность, проводимых дважды, через
два и три месяца после осеменений.
Анализ данных показал, что в целом стельность коров от первого
осеменения составила весной 51,4, летом - 36,6, осенью — 60,7, зимой 56,0%. Динамика показателей плодотворности осеменений соответствует
динамике значений индексов осеменений, которые весной, летом, осенью и
зимой составили 2,3; 2,7; 1,8; 1,9, соответственно (рис 7).
Анализ данных, полученных в опытах второй части исследовании не
выявил достоверной разницы между показателями четырех серий
экспериментов. Тем не менее, коровы всех серий имели более низкие
показатели оплодотворяемосги в пастбищный период, чем в стойловый.
Детальный учет динамики показателей плодотворности осеменений,
проведенный но месяцам года прослеживал устойчивую склонность к
снижению показателей до минимальных значений в периоды стрессовых
повышений температуры летних месяцев. В противоположность этой
тенденции и при характерной вариабельности, начиная с первых осенних
месяцев и до середины весны, показатели осеменений возрастали, достигая
наибольших значений в осенне-зимний и зимне-весенний периоды (рис. 8).
Рис. 8. Результаты осеменений коров в индуцированную охоту
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
36
Таким
образом,
нами
подтверждена
зависимость
между
репродуктивной функцией коров и сезоном года. В летний период
наблюдается снижение уровня плодотворности осеменений- В большей
степени это снижение происходит из-за эмбриональных потерь. В зимнестойловый период результативность осеменений повышается. Основным
фактором, влияющим на понижение плодотворности осеменений в
пастбищный сезон, являются стрессовые повышения температуры
окружающей среды. Эффективность использования биорегуляторов при
анэструсе у коров также зависит от климатических условий. Максимального
эффекта от применения гормональных препаратов с целью нормализации
половой функции коров следует ожидать в осенне-зимние и зимне-весенние
периоды года. Воздействие лазером на эндометрий и молочную железу в
комплексе с гормональными препаратами, в т.ч. и профилактируюшими
эмбриональную смертность, дает последовательное улучшение показателей в
неблагоприятный период года.
5. З а к л ю ч е н и е
Использование различных антимикробных препаратов с лечебнопрофилактической целью при проведении биотехнических мероприятий не
всегда оказываются достаточно эффективными из-за быстрого привыкания
микроорганизмов к лекарственным препаратам, стимулирующего действия
некоторых из них на развитие патогенных грибов, а также из-за угнетения
ими естественных нейро-гуморальных механизмов локальной и общей
зашиты организма. Кроме того, применение лекарственных препаратов на
лактирующих коровах влечет за собой дополнительную экологическую
нагрузку: снижаются потребительские качества молочной продукции или
предполагается ее полная браковка. Это еще раз аргументирует
целесообразность все более широкого применения биофизических методов
воздействия, как экологически безопасных.
Лазерное облучение является наиболее экономичным, простым и
эффективным методом. Выпускаемые отечественной промышленностью
портативные лазерные аппараты позволяют проводить мероприятия без
ущерба для производственно-технологических
процессов получения
продукции.
В большой степени это относится и к практике проведения
биотехнических мероприятий, в которой лазерное облучение начинают
использовать достаточно широко для нормализации воспроизводительного
статуса на достаточно больших группах коров. На местах зоотехнические и
ветеринарные специалисты с повышенным интересом относятся к лазерному
методу. Однако достаточное внедрение его в практику сдерживается, в ряде
случаев, из-за отсутствия возможности приобретения лазерной техники
вследствие низкой платежеспособности хозяйств, хотя по экономическим
подсчетам полная окупаемость лазерного аппарата происходит в течение
одной недели.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
37
Собственные исследования и данные литературы указывают, что все
формы репродуктивных нарушений, как правило, протекают сочетано с
нарушениями органов репродуктивной системы воспалительного характера.
В связи с тем, что хронические деструктивные процессы в эндометрии и
молочной железе протекают без клинически выраженных признаков и трудно
диагностируемы,
необходимость
профилактических
обработок
при
проведении
биотехнических
мероприятий
по
коррекции
воспроизводительной активности, бесспорна.
В наших исследованиях эффективность лазерного облучения при
эндометритах оказалась ниже, чем в некоторых исследованиях других
авторов. Это можно объяснить тем, что лазерное воздействие мы
осуществляли в ряде случаев путем воздействия на БАТ, т.е. через кожный
покров, а авторы, получившие более высокую эффективность, лазерное
облучение при эндометрите проводили ректальным методом.
Кроме того, эффективность мы определяли не столько по клиническим
признакам морфо-функционального состояния репродуктивных органов,
сколько по наличию стельности через 2-3 месяца после осеменения. Эти
обстоятельства могут быть субъективной причиной несколько заниженной
оценки эффективности проведённых нами мероприятий.
Нами установлено отсутствие негативного влияния лазерного
воздействия в рекомендуемых параметрах на иммунную систему организма и
гемопоэз. Наоборот, квантовое воздействие потенцирует неспецифические
формы иммунитета, что обеспечивает эффективное восстановление
плодовитости у коров даже с послеродовым
гнойно-катаральным
эндометритом.
Таким образом, применение биофизических методов, как элемента
биоехнологии воспроизводства предполагает для специалистов новые
перспективы в борьбе с бесплодием в молочном скотоводстве.
ВЫВОДЫ
1. В условиях сельхозпредприятий Российской Федерации нарушения
функции органов репродуктивной системы регистрируют у 20,2-22,7% коров.
В структуре нарушений преобладают гипофункциональное состояние
яичников и послеродовые эндометриты, которые регистрируют в различных
хозяйствах у 20,8-90,1% отелившихся коров. Частота гинекологической
патологии определяется уровнем количественного и качественного
кормления
животных,
продолжительностью
стойлового
периода,
концентрацией поголовья и молочной продуктивностью, влияющей на
состояние
обмена
веществ.
Коэффициент
корреляции
между
заболеваемостью и обеспеченностью кормами составляет - 0,39.
2. Болезни молочной железы воспалительного характера в
сельхозпредприятиях России регистрирует в среднем у 8,3 - 9,8%
лактирующих животных. При этом в 65,5% случаев регистрируется скрыто
протекающий (субклинический) и в 34,4% клинически выраженный мастит,
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
38
которые протекают, как правило, сопряжено с нарушениями других органов
репродуктивной системы.
3. Взаимонаправленность патогенетического процесса молочная железа
- матка - яичники требуют комплексного метода лечения и профилактики
воспалительных явлений при гормональной регуляции репродуктивной
функцией.
4. Стимуляция репродуктивной функции у коров при послеродовой
функциональной ациклии биорегуляторами в комплексе с квантовыми
методами воздействия при вероятных эндометральных нарушениях
обусловливает сокращение продолжительности среднестатистического
сервис-периода числа дней бесплодия до показателей, не превьниающих
экономически обоснованных.
5. Воздействие
на биологические
активные точки
(БАТ)
репродуктивных органов коров низкоинтенсивным лазерным излучением
повышает на 10-15% эффективность биотехнических мероприятий по
коррекции воспроизводительной функции высокопродуктивных коров,
благодаря оптимизации иммунобиологического статуса животных.
6. Низкоэнергетическое квантовое излучение в рекомендуемых
режимах повышает иммунобиологическую реактивность и общую
неспецифическую резистентность организма животных, и нормализует
гемопоэз.
7. Начало положительной иммунной реакции организма на квантовое
воздействие происходит сразу и достигает оптимальной величины к пятому
дню. К десятому дню показатели неспеиифического иммунитета
нормализуются полностью, что свидетельствует о коррегируюшем действии
лазерного излучения на иммунологический статус организма.
8. При трансректальном методе нормализации функциональных и
морфологических нарушений органов репродуктивной системы лазерным
излучением оптимальным режимом является мощность от 0,1 до 16 Вт, длина
волны от 0,83 до 0,97 мкм, частота модуляции от 4 до 5000 Гц, экспозиция от
1 до 2 мин.
9. Купирование воспалительных процессов в молочной железе
проводят контактно-сканирующим методом, в режимах работы лазерного
аппарата, рекомендованных для облучения матки, но при непосредственном
облучении вымени диапазон экспозиции должен составлять от 1 до 5 мин, а
при воздействии на биологически активные точки - от 30 до 60 секунд.
10. Воздействие на репродуктивные органы коров низкоинтенсивным
лазерным излучением в комплексе с введением биорегуляторов
репродуктивной функции повышает содержание в крови а-глобулинов на
45,9%, р-глобулинов на 11,9%, у-глобулинов на 10,8%, гемоглобина на 7,7%,
общих липидов на 8,2%, эозинофилов на 23,9%, юных на 33,3%,
палочкоядерных на 27,1%, количества эритроцитов на 7,3%, снижает
содержание холестерина на 6,7, гематокрита на 11,1%, сегментоядерных
нейтрофилов на 11,1, лимфоцитов на 4,5% и бакактивность сыворотки крови
на 30,6%. Аналогичные позитивные изменения биохимических и
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
39
морфологических показателей крови происходят у коров при одновременном
лазерном облучении молочной железы.
11. Характерная особенность эмбриогенеза у проблемных и здоровых
высокопродуктивных коров заключается в снижении скорости развития
эмбрионов, с четко прослеживаемой тенденцией отставания в равной
степени, как для ранних и поздних морул, так и бластоцист.
12. Замедленное развитие эмбрионов коров с
генетически
запрофаммированной
высокой
продуктивностью
сопровождается
нарушениями на ультраструктурном уровне, косвенно определяемыми
методом культивирования.
13. Морфологические изменения эмбрионов на ультраструктурном
уровне и скрытые морфо-функниональные нарушения в эндометрии,
способствующие нецелесообразному выбросу маточного простагландина,
приводят к эмбриональной гибели.
14. Для снижения эмбриональных потерь с равной долей успеха можно
применять сурфагон, ХГЧ, лютеостабил и прогестагенные препараты.
15. Одним из основных факторов, снижающих репродуктивную
активность коров, является их высокая молочная продуктивность, а в
пастбищный период - термальный стресс, приводящий к нарушению
гормонального
статуса
организма.
Применением
биотехнических
мероприятий, активизирующих репродуктивную функцию с включением в
схемы отработок средств, потенцирующих функцию желтого тела, а также
метафилактическое воздействие на матку и молочную железу возможно
нивелировать сезонное снижение показателей плодовитости, в т.ч. и за счет
снижения эмбриональных потерь.
16. Разработанные биофизические методы воздействия на матку и
молочную железу при гормональной регуляции репродуктивной функции с
использованием
низкоинтенсивною
лазерного
излучения
являются
экологически безопасными и не снижают потребительских и санитарных
качеств животноводческой продукции.
ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА
1. Биотехнические мероприятия по повышению
показателей
воспроизводительной активности высокопродуктивных лактирующих коров
следует проводить в комплексе с низкоинтенсивным лазерным воздействием
на матку, что обеспечит максимальную эффективность, не оказывая при этом
негативного влияния на экологическую чистоту получаемой продукции.
2. Для снижения эмбриональных потерь и выравнивания сезонных
показателей плодовитости рекомендуем в пастбищный период на 8-11 день
после искусственного осеменения как в спонтанную, так и индуцированную
охоту вводить антипростагландины, гонадолиберины, ХГЧ на фоне
предварительной гестагенизации при одновременном лазерном воздействии
на органы репродуктивной системы.
3. Воздействие на молочные железы коров в комплексе
биотехнических мероприятий по корректировке репродуктивной функции
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
40
следует проводить контактным методом в режиме: мощность от 0,1 до 16 Вт,
длина волны от 830 до 970 нм, частота модуляции в диапазоне от 4 до 5000
Га, экспозиция от 1 до 5 мин, курс - 7-10 сеансов. Указанные режимы не
снижают молочной продуктивности и не снижают санитарных качеств
молока.
4. В практике биотехнологии воспроизводства поголовья молочных
коров рекомендуем использовать следующие портативные лазерные
аппараты: СТП-3, М и л т а - MB, В е г а - MB, Мустанг, АЛ - 0 Ю В , учитывая,
что их технические возможности позволяют использовать опыт и
отечественных и зарубежных специалистов, применяющих различные
методики лазерного облучения, а также последовательно совершенствовать
технику.
Список основных работ, опубликованных по теме диссертации:
1.
Анзоров В.Л. Сравнительная оценка лютеолитической активности
препаратов простагланлина/УЖивотноводство. -1986. -№Ю.-С.47-48;
2.
Анзоров В.А.. Чомаев A.M. Влияние эсгрофана и клонростенола на
воспроизводительную функцию телок //Зоотехния. -1989. -№4.-С.62-63:
3.
Артюх В.М.. Чомаев A.M., Вареников М.В.. Анзоров В.А. Сроки
осеменения высокопродуктивных коров после отела //Зоотехния. -2004. -№6 —
Зс;
4.
Чомаев A.M., Анзоров В.А., Гончарова Е.А. Связь факторов внешней
среды с воспроизводительной функцией коров //Молочное и мясное
скотоводство. -2004. -№8.-С27;
5.
Анзоров В.А., Чомаев A.M., Зсйналов О.А., Хилькевич С.Н. О
причинах и методах снижения эмбриональной смертности у крупного рогатого
скота // Сельскохозяйственная биология. -2003. -№4.-С.57-61;
6.
Тянугин Е.А., Власов В.В., Михайлов Д.В., Анзоров В.А., Иноземцев
В.П. Применение лазерного излучения для профилактики послеродовых
заболеваний у коров // Ветеринария. -2005. -№5.-С.39-41;
7.
Шириева Р.Б., Шириев В.М., Хилькевич С.Н., Анзоров В.А.,
Губайдуллин Г.Х. О регуляторных механизмах развития фолликулов и
овуляции у крупного рогатого скота // Сельскохозяйственная биология. -2001. №2.-С.56-59:
в методических рекомендациях:
8.
Жанхотов И.А., Анзоров В.А., Чомаев A.M., Хилькевич С.Н.
Методические рекомендации по организации воспроизводства в молочном
скотоводстве хозяйств Астраханской области /ЛОП Ч1"У. -Грозный. - 2003. 38с;
В сборниках научных работ:
9.
Анзоров В.А., Чомаев A.M., Хилькевич С.Н., Зейналов О.А., Шириев
В.М. Синхронность проявления индуцированной охоты в зависимости от
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
41
сочетаний биорегуляторов и лазерной санации матки //Квантовая терапия в
ветеринарии: Сб. трудов по ветеринарии /Под ред. академика Г'рабовшинера
В.Я., к.в.н. Б&ткового И.И., к.т.н. Христофорова В.Н. -М.:ЗЛО «МИЛТЛ ГИТ».
-2003. -244с.;
10. Анзоров В.Л., Зейналов О.А., Хилькевич с.Н., Шириев В.М., Казеев
Г.В., Тяпугин Е.Л. Лазер в комплексной стимуляции репродуктивной функции у
коров-иервотелок //Квантовая терапия в ветеринарии: Сб. трудов по
ветеринарии /Под ред. академика Г'рабовшинера В.Я., к.в.н. Валкового И.И.,
к.т.н.Христофорова В.Н. -М.:ЗАО «МИЛТЛ ГИТ». -2003. -244с. -С. 109-110;
11. Анзоров В.А., Зейналов О.А., Хилькевич С.П., Шириев В.М., Казеев
Г.В.. Тяпугин Е.Л. Эффективность лазера в комплексном индуцировании охоты
и суперовуляции у коров //Квантовая терапия в ветеринарии: Сб. трудов но
ветеринарии /Под ред. академика Грабовшинера В.Я.. к.в.н. Банкового И.И..
к.т.н.ХристофороваВ.11. -М.-.ЗЛО «МИЛТЛ ГИТ». -2003. -244с.-С.Ш-ИЗ;
12. Анзоров В.Л., Катюков В.А., Балковой И.И.. Зейналов О.А., Чомасв
Л.М. Значение лазера в восстановлении нормофункциональной деятельности
яичников у коров //Квантовая терапия в ветеринарии: Сб. трудов по
ветеринарии Я1од ред. академика Грабовшинера В.Я., к.в.н. Валкового И.И.,
к.т.н.ХристофороваВ.Н.-М.:ЗАО«МИЛТЛ ГИТ». -2003. -244с.-С. 114-115;
13. Анзоров В.Л., Балковой ИИ.. Казеев Г.В., Христофоров В.Н.
Коррекция иммунологического статуса коров, больных эндометритом
//Квантовая терапия в ветеринарии: Сб. трудов по ветеринарии /Под ред.
академика Грабовшинера В.Я., к.в.н. Банкового И.И., к.т.н.Христофорова В.Н. М. :ЗЛО «МИЛТЛ ГИТ». -2003. -244с. -С. 116-121;
14. Анзоров В.А., Шириев В.М.. Зейналов О.А., Ситдиков И.Х.,
Хилькевич ОН., Хисметов И.Х. Квантовая терапия в акушерской и
гинекологической практике скотоводства //Научно-технический прогресс в
животноводстве России - ресурсосберегающие технологии производства
экологически безопасной продукции животноводства /Материалы II
международной научно-практ. конф. Часть И. -Дубровицы. -2003. -212c.-C.1315;
15. Анзоров В.А., Шириев В.М., Ситдиков И.Х., Хилькевич С.Н.,
Зейналов О.А. Применение лазерных аппаратов как экологически чистого
метода для профилактики эндометритов //Научно-технический прогресс в
животноводстве России - ресурсосберегающие технологии производства
экологически безопасной продукции животноводства /Материалы II
международной научно-практ. конф. Часть II. -Дубровицы. -2003. - 212с. - С.4042;
16. Анзоров В.А., Зейналов О.А., Шириев В.М., Хилькевич С.Н.,
Хисметов И.Х. Сроки начата охоты при проведении биотехнических
мероприятий //Научно-технический npoi"pecc в животноводстве России ресурсосберегающие технологии производства экологически безопасной
продукции животноводства /Материалы II международной научно-практ. конф.
Часть П. -Дубровицы. -2003.-212с.- С.52-55;
17. Анзоров В.А., Шириев В.М., Балковой И.И. Эффективность квантовой
терапии коров при эндометритах /Резервы повышения эффективности
агропромышленного
производства: Материалы региональной научнопрактической конференции, проходившей в рамках Международной
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
42
специализированной выставки «Лгрокомплекс-2004». -Уфа:БНИИСХ. 2004. 384с. -С.372-373;
18. Анзоров В.Л., Шириев В.М., Ситдиков И.Х., Балковой И.И., Хисметов
И.Х. Иммунологические показатели крови у животных после проведения
пизкоэнергетической лазерной терапии /Резервы повышения эффективности
агропромышленного производства: Материалы региональной научнопрактической конференции, проходившей в рамках Международной
специализированной выставки «Агрокомплекс-2004». -Уфа.БНИИСХ, 2004. 384с. -С. 373-376;
19. Анзоров В.А., Шириев В.М.. Ситдиков И.Х.. Бачковой ИИ. Квантовая
терапия в акушерской и гинекологической практике скотоводства /Резервы
повышения эффективности агропромышленного производства: Материапы
региональной научно-практической конференции, проходившей в рамках
Международной специализированной выставки «Агрокомплекс-2004». Уфа:БНИИСХ, 2004. -384с. -С.376-377;
в других тданьах:
20.
Хилькевич СИ., Анзоров В.А., Лгаева Т.Н. Особенности
искусственного осеменения коров на комплексах. Факторы и методы, влияющие
на оплодотворяемость //Вестник ветеринарии. -2004. -№30. -С46-53:
21. Анзоров В.Л., Хилькевич С.Н., Балковой И.И., Ситдиков И.Х.
Иммуногенетический статус коров, больных эндометритом //Вестник
ветеринарии. -2004. -№31.-С61-68;
22.
Анзоров В.Л., Титова В., Хилькевич СИ.. Никулин Д. Лазер
повышает иммунитет. //Животноводство России. — 2005. -№6. -С.4-6;
23.
Хилькевич Н.М.. Анзоров В.А., Лгаева Т.Н. Методы интенсификации
воспроизводства овец //Вестник ветеринарии. -2004. -№30. -С.68-78:
24. Анзоров В.Л., Хилькевич СИ., Балковой И.И., Ситдиков И.Х.
Лазерная терапия коров при заболевании эндометритов //Вестник ветеринарии. 2004. -№31.-С71-75;
25.
Христофоров В.Л., Самохвалов Г.И., Клинский Ю.Д., Авакумов В.М.,
Брьшков В.Е.. Анзоров В.А., Огулов Али Огулович. Способ регуляции
репродуктивных
функций
сельскохозяйственных
животных
/Госкомизобретений. Авторское свидетельство №1586649, 1990.-СЫ0.
stes
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Издательство РУЦ ЭБТЖ
142132, Московская обл., Подольский р-н, п. Дубровицы
Тел. (8 - 27) 65-14-24. (8-27) 65-14-07
Сдано в набор 12.09.2005. Подписано в печать 13.09.2005
Заказ № 2 1 . Печ. л. 1,8 Тираж 100 экз.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа