close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

7506

код для вставкиСкачать
издается с 1952 года
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ISSN 0367-3014
н а у ч н о - п р а к т и ч е с к и й
ж у р н а л
w w w. r u s v r a c h . r u
в номере:
● НАНОТЕХНОЛОГИЯ И ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ФОРМЫ
● ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИОННОГО АССОЦИАТА ДИМЕДРОЛА
● РЕКТАЛЬНЫЕ КАПСУЛЫ С МЕТФОРМИНОМ
● ХРОНОТЕРАПИЯ БОЛЬНЫХ С ИШЕМИЕЙ СЕРДЦА
4
2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
О ДД ЕЕ РР Ж
Ж АА НН И
И ЕЕ
СС О
АКТУАЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ
МИНИСТЕРСТВО
ЗДРАВООХРАНЕНИЯ
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
МОСКОВСКАЯ
МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ
имени И.М. СЕЧЕНОВА
РОССИЙСКИЙ ЦЕНТР
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ
И МЕДИКО-ТЕХНИЧЕСКОЙ
ИНФОРМАЦИИ
ИЗДАТЕЛЬ —
ИЗДАТЕЛЬСКИЙ ДОМ
«РУССКИЙ ВРАЧ»
ГЛАВНЫЙ РЕДАКТОР
член-корреспондент РАМН
И.А. САМЫЛИНА
РЕДАКЦИОННАЯ
КОЛЛEГИЯ:
профессор
Р.Н. АЛЯУТДИН
академик РАМТН
А.Д. АПАЗОВ
профессор
В.Л. БАГИРОВА
член-корреспондент РАМН
В.В. БЕРЕГОВЫХ
академик РАМН и РАСХН
В.А. БЫКОВ
профессор
Н.Н. ДЕМЕНТЬЕВА
профессор
И.И. КРАСНЮК
профессор
Р.С. СКУЛКОВА
профессор
А.А. СОРОКИНА
доктор фарм. наук
Е.А. ТЕЛЬНОВА
профессор
Н.А. ТЮКАВКИНА
канд . фарм. наук
Г.В. ШАШКОВА
РЕДАКЦИОННЫЙ
СОВЕТ:
профессор
В.Г. БЕЛИКОВ
(Пятигорск)
профессор
П.В. ЛОПАТИН
(Москва)
профессор
Р.С. САФИУЛЛИН
(Казань)
профессор
А.В. СОЛОНИНИНА
(Пермь)
профессор
Г.П. ЯКОВЛЕВ
(Санкт-Петербург)
И.А. Самылина, А.А. Сорокина,
Н.В. Молчан, И.П. Рудакова
Коэффициенты водопоглощения
и набухания лекарственного
растительного сырья . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ХИМИЯ
И ФАРМАКОГНОЗИЯ
Д.А. Маркелов,
И.Е. Смехова, Ю.М. Перова
Аппроксимационный анализ профилей
растворения лекарственных веществ . . . . . . 6
М.М. Губин,
Г.В. Азметова, С.В. Пивоварова
Определение содержания
консерванта в спрее назальном.
Валидационные исследования . . . . . . . . . . . . 9
Е.Ю. Шабалкина, О.Г. Черкасова,
Ю.Я. Харитонов, В.Л. Дорофеев
Химическая совместимость
мелкодисперсных магнитных
наполнителей с компонентами мазей. . . . . 13
С.Е. Орлова, И.Н. Зилфикаров
Стандартизация экстракта
плодов пальмы Сабаля. . . . . . . . . . . . . . . . . . 16
Х.А. Мирзаева, У.Г. Бюрниева,
А.Ш. Рамазанов, М.М. Кимпаева
Спектрофотометрическое определение
димедрола с использованием
его ионного ассоциата . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18
Д.М. Попов, А.В. Наумов
Определение витаминов
в траве звездчатки средней . . . . . . . . . . . . . . 21
Н.А. Постоюк, А.А. Маркарян,
Т.Д. Даргаева, Т.А. Сокольская
Изучение стадии экстрагирования
при получении сухого
экстракта каштана конского. . . . . . . . . . . . . 32
ФАРМАКОЛОГИЯ:
ЭКСПЕРИМЕНТ И КЛИНИКА
И.Н. Тюренков, А.В. Воронков,
А.А. Слиецанс, Э.Т. Оганесян
Влияние флавоноидов на основные
параметры гемостаза крови
и антитромботическую функцию
эндотелия при сахарном диабете . . . . . . . . . 34
А.А. Карлицкая, Л.М. Красных,
Н.Д. Бунятян, Г.Ф. Василенко
Кинетика мемантина в плазме крови . . . . . 37
А.П. Бельков, В. Муругин, С.С. Григорян,
А.В. Ильичев, Г.Д. Чубарова, Д.Г. Мальдов
Активность веществ стимфорте
и их физико-химическая характеристика . . 39
КОМПЕТЕНТНОЕ МНЕНИЕ
А.А. Сорокина, А.И. Марахова,
Н.Н. Федоровский, Т.И. Белоус
Использование спектрофотометрии
при анализе промышленных образцов
лекарственного растительного сырья . . . . . 43
ОБРАЗОВАНИЕ
И.И. Краснюк,
Н.Б. Демина, С.А. Скатков
Биофармацевтические
аспекты преподавания
фармацевтической технологии . . . . . . . . . . 45
ОРГАНИЗАЦИЯ И ЭКОНОМИКА
ОБЗОР
Н.Д. Суюнов
Проблемы потребления
лекарственных средств в Узбекистане
и методы их решения . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
Ю.Р. Болсуновская,
Л.Б. Васькова, Р.М. Заславская
Результаты применения метода
хронотерапии у больных с ишемической
болезнью сердца в условиях стационара . . 27
Н.Б. Демина, С.А. Скатков, А.И. Тенцова
Нанотехнологические аспекты
современной лекарственной формы . . . . . . 47
К.В. Алексеев, Н.В. Тихонова,
Е.В. Блынская, В.К. Алексеев,
Н.А. Уваров, Е.Ю. Карбушева
Лекарственные формы
с модифицированным
высвобождением на основе пеллет . . . . . . . 51
ТЕХНОЛОГИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
ИЗУЧАЕМ БАД
С.И. Провоторова, Э.Ф. Степанова,
М.А. Веретенникова, М.В. Кирякина
Разработка желатиновых
ректальных капсул с метформином . . . . . . 30
А.И. Марахова, Н.Н. Федоровский
Исследования по стандартизации
настоев сырья сосны кедровой
сибирской и БАД на его основе . . . . . . . . . . 54
Журнал входит в Российский индекс научного цитирования
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ON
N TT EE N
N TT SS
CC O
TOPICAL INFORMATION
Генеральный директор
Издательского дома
«Русский врач»
Г.С. Зольникова
I.A. Samylina, A.A. Sorokina,
N.V. Molchan, I.P. Rudakova
Water absorption and swelling coefficients
Директор по рекламе
и маркетингу
В.С. Моисеева
in raw medicinal plant material . . . . . . . . . . 3
PHARMACEUTICAL CHEMISTRY
AND PHARMACOGNOSY
Зав. редакцией
Т.Л. Григорьева
Редактор
Т.C. Аверкина
Компьютерный набор
Т.Н. Пониткова
D.A. Markelov,
I.E. Smekhova, Yu.M. Perova
Approximate analysis
of drug solution profiles . . . . . . . . . . . . . . . . 6
Журнал зарегистрирован
Министерством РФ по делам
печати, телерадиовещания
и средств массовых коммуникаций
Регистрационный номер
77-11255 от 26 ноября 2001 г.
M.M. Gubin, G.V. Azmetova, S.V. Pivovarova
Determination of the level of a preservative
in nasal spray: Validation trials . . . . . . . . . . . 9
E.Yu. Shabalkina, O.G. Cherkasova,
Yu.Ya. Kharitonov, V.L. Dorofeyev
Выходит 8 номеров в год
Chemical compatibility
Полное или частичное
воспроизведение
или размножение материалов,
опубликованных в журнале,
допускается только с письменного
разрешения Издательского дома
«Русский врач»
Редакция рукописи
не возвращает. За содержание
рекламных материалов редакция
ответственности не несет.
Набор, верстка
и дизайн выполнены
в Издательском доме
«Русский врач»
of fine-dispersed magnetic fillers
with ointment components. . . . . . . . . . . . . 13
N.A. Postoyuk, A.A. Markaryan,
T.D. Dargayeva, T.A. Sokolskaya
Study of an extraction stage
in the preparation of dry horse chestnut
(Aesculus hippocastanum L.) extract . . . . . . 32
EXPERIMENTAL
AND CLINICAL PHARMACOLOGY
I.N. Tyurenkov, A.V. Voronkov,
A.A. Slietsans, E.T. Oganesyan
Effect of flavonoids on major hemostatic
parameters and endothelial antiplatelet
function in diabetes mellitus. . . . . . . . . . . . 34
A.A. Karlitskaya, L.M. Krasnykh,
N.D. Bunyatyan, G.F. Vasilenko
Plasma memantine kinetics . . . . . . . . . . . . 37
A.P. Belkov, V. Murugin, S.S. Grigoryan,
A.V. Ilyichev, G.D. Chubarova, D.G. Maldov
Activity of substances
in Stimforte and their
physicochemical characteristics . . . . . . . . . 39
S.E. Orlova, I.N. Zilfikarov
AUTHORITATIVE OPINION
Standardization of Sabal palm
Spectrophotometric determination
A.A. Sorokina, A.I. Marakhova,
N.N. Fedorovsky, T.I. Belous
Use of spectrophotometry in the analysis
of the production prototypes
of raw medicinal plant material . . . . . . . . . 43
of dimedrol using its ionic associate. . . . . . 18
EDUCATION
D.M. Popov, A.V. Naumov
(Sarenoa serrulata) fruit extract . . . . . . . . . 16
Kh.A. Mirzayeva, U.G. Byurniyeva ,
A.Sh. Ramazanov, M.M. Kimpayeva
Подписано в печать 08.06.12
Формат 60×90/8
Бумага мелованная 90 г/м
Печ. л. 7.00
Заказ 16
Тираж 3000 экз.
in chickweed (Stellaria media) herb. . . . . . 21
I.I. Krasnyuk, N.B. Demina, S.A. Skatkov
Pharmaceutical technology teaching:
Biopharmaceutical aspects . . . . . . . . . . . . . 45
ORGANIZATION AND ECONOMY
REVIEW
N.D. Suyunov
Адрес редакции:
Москва, Усачева, 11
(1-й этаж)
and the methods of their solution . . . . . . . 24
N.B. Demina, S.A. Skatkov, A.I. Tentsova
Current dosage form:
Nanotechnological aspects . . . . . . . . . . . . . 47
K.V. Alekseyev, N.V. Tikhonova,
E.V. Blynskaya, V. K. Alekseyev,
N.A. Uvarov, E.Yu. Karbusheva
Modified release
pellet-based dosage forms. . . . . . . . . . . . . . 51
Determination of vitamins
2
Для корреспонденции:
119048, Москва, Усачева 11
(1-й этаж)
Телефоны:
редакция: (495) 789-92-72
секретариат: (499) 246-81-90
отдел рекламы: (499) 246-84-02
E-mail:
[email protected]
Web-site: www. rusvrach.ru
© «Фармация», 2012
Подписной индекс
по каталогу Агентства
«Роспечать»: 71477
The problems of drug use in Uzbekistan
Yu.R. Bolsunovskay,
L.B. Vaskova, R.M. Zaslavskaya
Chronotherapy results
in patients with coronary
heart disease in a hospital setting . . . . . . . . 27
DRUG TECHNOLOGY
S.I. Provotorova, E.F. Stepanova,
M.A. Veretennikova, M.V. Kiryakina
Design of gelatin rectal
capsules containing metformin . . . . . . . . . 30
WE STUDY DIETARY SUPPLEMENTS
A.I. Marakhova, N.N. Fedorovsky
Investigations of the standardization
of infusions of raw
Siberian stone pine (Pinus sibirica)
and its dietary supplements. . . . . . . . . . . . . 54
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Актуальная информация
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.322:615.451.16].014
КОЭФФИЦИЕНТЫ ВОДОПОГЛОЩЕНИЯ
И НАБУХАНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО
РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ
И.А. Самылина1, член-корр. РАМН, докт. фарм. наук,
А.А. Сорокина1, докт. фарм. наук, профессор,
Н.В. Молчан2, канд. фарм. наук, И.П. Рудакова2, докт. хим. наук
1
Первый Московский государственный медицинский университет им И.М. Сеченова
2
НИИ фармации Первого Московского государственного
медицинского университета им И.М. Сеченова
E-mail: [email protected]
Приведены результаты информационно-аналитического исследования и экспериментальные данные, на основании которых впервые подготовлен проект ОФС «Определение коэффициентов водопоглощения и набухания лекарственного растительного сырья».
Описаны методики проведения анализа.
Ключевые слова: лекарственное растительное сырье, настои,
слизи, коэффициент водопоглощения, коэффициент набухания,
определение.
екарственное растительное сырье (ЛРС) используется для получения настоев и отваров
для внутреннего и наружного применения. Согласно Государственной фармакопеи XI издания (ГФ XI),
настои и отвары – это жидкие лекарственные формы,
представляющие собой водные извлечения из ЛРС
[1]. С биофармацевтической точки зрения водные извлечения обеспечивают хорошую доступность лекарственных веществ (ЛВ), оказывая более мягкое действие на организм, чем индивидуальные ЛВ. Данный
факт объясняет то, что жидкие лекарственные формы сохранили свое значение со времен Галена до наших дней.
Приготовление настоев и отваров осуществляется экстрагированием ЛРС водой при определенном режиме настаивания и регламентируется общей фармакопейной статьей ГФ XI и Инструкцией
по изготовлению в аптеках жидких лекарственных
Л
форм [1, 2]. При производстве водных извлечений
необходимо помнить, что часть воды за счет капиллярных сил удерживается ЛРС, так как полностью
отжать сырье невозможно. Потери действующих
веществ за счет поглощения воды сырьем прямо
пропорциональны количеству воды, остающейся в
ЛРС. Уменьшить эти потери можно путем увеличения (в пределах допустимого) количества используемой воды [5]. Увеличение количества воды улучшает условия извлечения действующих веществ
и снижает потери за счет адсорбции сырьем менее концентрированной вытяжки (табл. 1). Поэтому при приготовлении настоев и отваров, согласно
действующей нормативной документации (НД), рекомендуется брать воды больше, чем требуется получить готового извлечения; причем для этих целей
при расчете следует использовать коэффициент водопоглощения [1, 2].
Коэффициент водопоглощения (Квп) соответствует количеству воды (в мл), удерживаемому 1,0 г
ЛРС после его отжатия в перфорированном стакане
инфундирного аппарата. Значения Квп для некоторых
видов сырья представлены в соответствующих таблицах НД.
Величина
Квп
зависит
от
морфологоанатомических особенностей сырья [4]. Форма выпуска ЛРС (размер частиц сырья) не оказывает существенного влияния (табл. 2).
Таблица 1
ВЛИЯНИЕ КОЭФФИЦИЕНТА ВОДОПОГЛОЩЕНИЯ НА СОДЕРЖАНИЕ
ДЕЙСТВУЮЩИХ ВЕЩЕСТВ В НАСТОЯХ (НА ПРИМЕРЕ ТРАВЫ СУШЕНИЦЫ)
Методика изготовления настоя
Масса сырья, г
Объем взятой воды, мл
Содержание окисляемых веществ в настое, %
Без учета Квп
10,0
100
0,06 ± 0,01
С учетом Квп
10,0
122
0,11 ± 0,01
Фармация №4, 2012
3
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Актуальная информация
С целью совершенствования существующих методов анализа лекарственных средств, гармонизации
их с требованиями ведущих зарубежных фармакопей
был разработан проект общей фармакопейной статьи
(ОФС) «Определение коэффициентов водопоглощения и набухания лекарственного растительного сырья» для ГФ ХII.
В проект ОФС включена методика определения
Квп, которой не было в ГФ XI: из 10 г (с точностью
0,01 г) цельного или измельченного ЛРС (размер частиц измельченного сырья указан в частных фармакопейных статьях) готовят настой (1:10) в соответствии
с ОФС «Настои». После изготовления полученный
настой процеживают, оставшееся сырье отжимают и
измеряют объем полученного воТаблица 2
дного извлечения. Коэффициент
ВЛИЯНИЕ ФОРМЫ ВЫПУСКА СЫРЬЯ
водопоглощения вычисляют как
НА ВЕЛИЧИНУ КОЭФФИЦИЕНТА ВОДОПОГЛОЩЕНИЯ
разницу между заданным и ре(НА ПРИМЕРЕ ЦВЕТКОВ РОМАШКИ АПТЕЧНОЙ)
ально полученным объемом извлечения по отношению к массе
Форма выпуска ЛРС
Размер частиц сырья
Значение Квп
сырья, взятого для приготовлеФасованное в пачки
Цельное сырье
6,0
ния настоя.
На основании эксперименБрикеты
Проходящее сквозь сито 3 мм
6,0
тально обоснованных данных
Фильтр-пакеты
Проходящее сквозь сито 2 мм
6,25*
[4] в предлагаемом проекте ОФС
Примечание. Звездочка – некоторое увеличение значения Квп для фильтр-пакетов
приведена расширенная таблица
связано с удержанием воды бумагой, используемой для изготовления фильтрКвп (табл. 3).
пакетов.
Большинство ведущих заруТаблица 3
бежных фармакопей (Европейская, Британская и др.) для ЛРС,
КОЭФФИЦИЕНТЫ ВОДОПОГЛОЩЕНИЯ
содержащего слизи, рекомендуНЕКОТОРЫХ ВИДОВ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ
ет проводить определение коЛРС
Квп
ЛРС
Квп
эффициента набухания [8, 9]. В
отечественных частных фармаАира корневища
2,4 Мать-и-мачехи листья
3,0
копейных статьях на ЛРС этот
Алтея корни
1,3 Мяты перечной листья
2,4
показатель качества не испольПодорожника большого
Брусники листья
1,5
2,5
зуется, но, принимая во внилистья
мание вопросы гармонизации
Валерианы корневища с корнями
2,9 Полыни горькой трава
2,1
фармакопейных требований и
Горицвета трава
2,8 Пустырника трава
2,0
расширяющиеся связи на фармацевтическом рынке ЛРС, в
Горца змеиного (змеевика) корневища 2,0 Ромашки аптечной цветки
6,0
проект ОФС включена методиДуба кора
2,0 Рябины обыкновенной плоды 1,5
ка определения данного коэфДушицы трава
2,0 Сены листья
1,8
фициента.
Зверобоя трава
1,6 Солодки корни
1,7
Коэффициент
набухания
(К нб) – это показатель, опредеКалины кора
2,0 Сушеницы трава
2,2
ляющий объем жидкости в мл,
Крапивы листья
1,8 Толокнянки листья
1,4
удерживаемый 1,0 г ЛРС поКровохлебки корневища и корни
1,7 Хвоща полевого трава
3,0
сле набухания в водном раствоКрушины кора
1,6 Череды трехраздельной трава
2,0
ре в течение 4 ч. Кнб нормируется по нижней границе («не
Лапчатки корневища
1,4 Шалфея листья
3,3
менее…»).
Липы цветки
3,4 Шиповника плоды
1,1
Определение рекомендуется
проводить
следующим образом:
Таблица 4
1 г (с точностью 0,01 г) цельВЛИЯНИЕ ИЗМЕЛЬЧЕННОСТИ СЫРЬЯ
ного или измельченного ЛРС
НА КОЭФФИЦИЕНТ НАБУХАНИЯ
(размер частиц измельченного сырья указан в частных фарЛРС
Размер частиц сырья
Кнб
макопейных статьях) помещают
Цельное сырье
Не менее 4,0
Семена льна
в цилиндр из матового стекла с
Измельченное сырье (сито 710)
Не менее 4,5
притертой пробкой вместимоКорни алтея
Измельченное сырье (сито 710)
Не менее 10,0
стью 25 мл, градуированный по
Листья алтея
Измельченное сырье (сито 355)
Не менее 13,0
высоте 125±5 мм с делениями
4
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Актуальная информация
0,5 мл. Навеску сырья увлажняют 1,0 мл 96% этилового спирта, добавляют 25 мл воды очищенной и закрывают цилиндр пробкой. Энергично встряхивают
каждые 10 мин в течение 1 ч и оставляют настаиваться еще на 3 ч. Через 90 мин (1,5 ч) от начала испытания цилиндр время от времени аккуратно вращают вокруг своей вертикальной оси для того, чтобы
добиться полного оседания частиц сырья на дно и
отделения свободной надосадочной жидкости. Измеряют объем, занятый слоем сырья, включая прилипающую к частицам сырья слизь.
Коэффициент набухания в отличие от коэффициента водопоглощения зависит как от морфологоанатомических особенностей сырья, так и от его измельченности (табл. 4). Кнб косвенно свидетельствует
о соблюдении необходимого температурного режима
при сушке и хранении ЛРС [3, 6, 7].
Вывод
На основании результатов информационноаналитического исследования и экспериментальных
данных для включения в ГФ РФ ХII издания впервые
подготовлен проект ОФС «Определение коэффициентов водопоглощения и набухания лекарственного
растительного сырья».
Фармация №4, 2012
ЛИТЕРАТУРА
1. Государственная фармакопея СССР ХI издания, вып. 2. – М.:
Медицина, 1990. – 336 с.
2. Об утверждении инструкции по изготовлению в аптеках жидких
лекарственных форм. Приказ МЗ РФ № 308 от 21.10.1997г.
3. Практикум по фармакогнозии / Под ред. В.Н. Ковалева. –
Харьков, Золотые страницы, 2004. – С. 38–46.
4. Сорокина А.А. Теоретическое и экспериментальное
обоснование стандартизации настоев, отваров и сухих экстрактов
из лекарственного растительного сырья: Дисс. докт. фарм. Наук. –
М., 2002. – 255 с.
5. Технология лекарственных форм / Под ред. Т.С. Кондратьевой. Т.
1. – М.: Медицина, 1991. – С. 260–261.
6. Фармакогнозия. Лекарственное сырье растительного и
животного происхождения / Под ред. Г.П. Яковлева. – СПб.: СпецЛит,
2006 – С. 122–131.
7. Ханина М.А., Батурина Н.О. Лекарственные растения и сырье,
содержащие полисахариды. – Новосибирск, 2003. – 44 с.
8. British Pharmacopoeia 2007, Vol. IV, Appendix XI C. Swelling Index.
9. European Pharmacopoeia 01/2008:20804. Swelling Index.
SUMMARY
WATER ABSORPTION AND SWELLING COEFFICIENTS IN RAW MEDICINAL
PLANT MATERIAL
I.A. Samylina, PhD, Correspondent Member of the Russian Academy
of Medical Sciences1; Professor A.A. Sorokina, PhD1; N.V. Molchan, PhD2;
I.P. Rudakova, PhD2
1
I.M. Sechenov First Moscow State Medical University
2
Research Institute of Pharmacy, I.M. Sechenov First Moscow State
Medical University
The paper gives the information analysis results and experimental
data, which have been used to first prepare the draft General
Pharmacopoeia Article “Determination of water absorption and swelling coefficients in raw medicinal plant material”. Procedures for the
analysis are described.
Key words: raw medicinal plant material, infusions, mucus, water
absorption coefficient, swelling coefficient, determination.
5
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.453.6.015.14
АППРОКСИМАЦИОННЫЙ АНАЛИЗ
ПРОФИЛЕЙ РАСТВОРЕНИЯ
ЛЕКАРСТВЕННЫХ ВЕЩЕСТВ
Д.А. Маркелов1, канд. физ.-мат. наук,
И.Е. Смехова2, канд. фарм. наук, Ю.М. Перова2, канд. фарм. наук
1
Санкт-Петербургский государственный университет
2
Санкт-Петербургская химико-фармацевтическая академия
E-mail: [email protected]
Анализируется зависимость профилей растворения таблеток
индапамида от времени и влияния числа экспериментальных точек
на значение коэффициента подобия f2. Установлено, что уже при
5–6 точках и более данный критерий практически не меняется.
Предложен новый метод прямого расчета f2 из параметров аппроксимации профилей растворения.
Ключевые слова: профили растворения, аппроксимационный
анализ, коэффициент подобия, индапамид, таблетки.
квивалентность дженериков оригинальным
препаратам определяют различными методами, в частности путем исследования высвобождения лекарственных веществ (ЛВ) из лекарственных
препаратов (ЛП) в растворах, имитирующих различные среды желудочно-кишечного тракта человека [2]. Для сравнения профилей растворения оригинального препарата и его дженериков Агентством
по лекарственным средствам и пищевым продуктам
США (FDA), Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) и Европейским медицинским агентством (EMА) предложен коэффициент подобия (f2)
как универсальный критерий, который может быть
представлен в виде формулы [3,4,5]:
Э
f2 = 50 × log
{√ [
}
1 n
1 + –– ∑(Ri – Ti)2 × 100 ,
n i=1
]
где n – число точек времени; R и T – значения растворения препарата сравнения и дженерика (в %) за
время t.
Однако значение f2 может зависеть от числа и
расположения во временной шкале экспериментальных точек для каждого конкретного ЛП. Чтобы решить данный вопрос для рассматриваемых ЛП
необходимо провести интерполяцию экспериментальных точек профиля растворения феноменологическими уравнениями, описывающими процесс
растворения.
6
Для аналитического описания процесса растворения ЛП существуют различные теоретические подходы [1]. Аналитическое описание позволяет получить
непрерывную временную зависимость профиля растворения вещества из имеющихся экспериментальных точек и, следовательно, варьировать число точек
для вычисления критерия f2.
Цель настоящей работы – получить аналитическое описание профилей растворения и зависимость параметра f2 от количества экспериментальных точек.
Экспериментальная часть
Объекты исследования: зарегистрированные в
РФ препарат «Индапамид», таблетки, покрытые оболочкой, 2,5 мг (далее – таблетки индапамида) российского (производители И2, И6, И7) и зарубежного
(производители И3, И4; И1 – оригинальный препарат) производства и препарат «Индапамид», капсулы, 2,5 мг зарубежного производства (производитель
И5). Все ЛП соответствовали требованиям действующих нормативных документов и фармакопейных статей предприятий-изготовителей.
Профили растворения получали при исследовании таблеток в средах 0,1М раствора кислоты хлористоводородной (НС1), фосфатном (ФБ) и ацетатном
(АБ) буферных растворах на приборе «Erweka» DT6,
аппарат «лопастная мешалка».
Для аппроксимации временной зависимости
высвобождения вещества были опробованы основные подходы [1]. Экспериментальные точки приближались по методу наименьших квадратов с заданными уравнениями и соответствующим им
набором варьируемых параметров с использованием математического пакета «Origin». Наиболее близко к экспериментальным точкам (т.е. с наименьшей погрешностью) происходила аппроксимация
на основе модели Hisson-Crowell, в которой предпо-
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
лагалось, что высвобождаемое вещество в процессе растворения пропорционально кубу времени, т.е.
R(t) ~ t3 [1]. Учитывая граничные условия: R(t=0) =
0 и R(t=∞) = A≤100%, была предложена следующая
формула:
1
R(t) = A – A ––––––––
,
1 + (Bt)3
где А и B – варьируемые параметры. Параметр A характеризует растворение ЛВ (в %) при достижении
раствором состояния динамического равновесия,
т.е. t = ∞. В идеальном случае параметр A должен
равняться строго 100%. Однако в эксперименте параметр A может быть меньше, так как, во-первых, не
все вещество, содержащееся в таблетке, может растворяться в используемой среде растворения. Вовторых, этот факт может соответствовать более длительному процессу растворения, чем заложенному
в уравнении кубическому закону, например, развивающемуся по логарифмическому закону. Различие
параметра А для испытуемого дженерика и оригинального препарата может также характеризовать
различие в доле растворяющегося вещества в исследуемых препаратах.
Параметр B фактически является константой скорости растворения вещества и имеет размерность, обратную времени. Как и исходный параметр Кs модели
Hisson-Crowell, параметр B зависит от соотношения
поверхность/объем, но в нашем случае он нормирован на корень кубический начального объема растворяемой таблетки. Это вызвано тем, что значения R(t)
берутся в процентах, т.е. в безразмерных величинах,
как и в случае расчета критерия f2.
Полученные профили растворения таблеток индапамида в средах 0,1 М НС1 и ФБ были аппроксимированы выражением R(t) (рис. 1). Для профилей
растворения в среде АБ аппроксимация не проводилась, так как в ней зависимость R(t) имеет более
б 100
Концентрация, %
а 100
Концентрация, %
сложный профиль с 2 различными процессами растворения. Необходимо отметить, что такой профиль
растворения имел только препарат производителя
И4, что отражалось в наибольшем значении критерия f2 при стандартном расчете (см. таблицу). Для
остальных сред профили растворения были аппроксимированы выражением f2, что следует из данных
таблицы.
Полученные интерполяционные профили позволяют варьировать число точек n при расчете
критерия f2 и изучить влияние n на значение f2. Для
исследования данного вопроса было использовано
равномерное распределение точек на отрезке времени от 0 до 60 мин, т.е. если взять n точек, то i-я
точка равна ti = 60 (i/n) мин. Равномерное распределение точек и промежуток времени 0 – 60 мин
обусловлены условиями проводимых экспериментов. Было установлено, что значение f2 уже при
n = 5 – 6 и больше практически не меняется для
всех исследованных препаратов. В качестве примера приведена зависимость f2(n) для некоторых дженериков индапамида (см. рис. 1). Таким образом,
можно утверждать, что 5 – 6 экспериментальных
точек достаточно для расчета f2 исследуемых препаратов. Необходимо отметить, что финальные значения f2, полученные с помощью интерполяционных
профилей, превосходят значения f2 при стандартном расчете (рис.2). Возможно, это вызвано сглаживанием профилей растворения при аппроксимации и усреднении случайных экспериментальных
ошибок.
Так как при увеличении n критерий f2 выходит на
постоянное значение, была поставлена задача получить прямую связь между варьируемыми параметрами А и B и значением f2. Для этого в расчетной
формуле f2 следовало перейти от суммы к интегрированию (при времени проведения эксперимента T
= 60 мин).
70
И1
И2
И3
И4
И5
40
70
40
И1
И2
И3
И4
И5
10
10
0
10
20
30
40
Время, мин
50
60
0
10
20
30
40
Время, мин
50
60
Рис.1. Профили растворения (с аппроксимацией) индапамида из таблеток в средах НС1 (а) и ФБ (б)
Фармация №4, 2012
7
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
РАССЧИТАННЫЕ И АППРОКСИМИРОВАННЫЕ ПАРАМЕТРЫ
ПРОФИЛЕЙ РАСТВОРЕНИЯ В РАЗНЫХ СРЕДАХ ИНДАПАМИДА ИЗ ТАБЛЕТОК
АБ
Среда
производителя
НС1
ФБ
параметры
параметры
f2
f2
f2
FDA
A, %
B, мин
FDA
сум.*
инт.**
A, %
B, мин
FDA
сум.*
инт.**
И1
–
86
0,05
–
–
–
66
0,034
–
–
–
И2
17,36
87
0,26
16,28
22
22
51,5
0,14
29,73
34
37
И3
13,89
77,5
0,18
22,6
29
30
53
0,20
28,34
30,5
32
И4
35,04
87
0,09
28,12
36
36
66
0,043
53,88
56,5
56
И5
13,81
97
0,41
9,99
16
16
79
0,20
14,99
17,5
17
И6
14,47
75,5
0,20
21,71
29
29
77
0,41
11,64
16
16
И7
13,09
88
0,37
12,8
20
20
72
0,37
14,78
19
18
Примечание: * – параметр f2; сум. – суммарный, рассчитан при числе точек n = 20; ** – параметр f2, инт. – интегральный, рассчитан по предложенной формуле.
а
80
б
И6
И7
И4
60
f2
80
И6
И7
И4
60
40
f2 40
20
20
0
0
0
10
15
20
0
5
10
15
20
n
n
Примечание. Для расчетов использовали интерполяционные профили формулы R(t) и значения варьируемых параметров из
таблицы. Прямыми горизонтальными линиями обозначены значения f2, рассчитанные непосредственно из экспериментальных точек по общепринятой формуле.
5
Рис. 2. Зависимость критерия f2 от числа выбираемых точек n
для профилей растворения индапамида из таблеток в средах НС1 (а) и ФБ (б)
Подставляя в формулу f2 используемый вид профилей растворения и интегрируя его, получили следующее выражение:
[
A02
A2
f2 = 100 – 25 × log 1 + (A – A0)2 – 1,64 ––– + ––––
+
TB
TB0
(
)
)]
1 – B3/(B3 – B03) 1 – B03/(B3 – B03)
+ 2,4AA0 –––––––––––––––
+ ––––––––––––––– ,
TB
TB0
(
где индексом «0» обозначены параметры оригинального препарата, а без индекса – дженерика. На основе
полученного уравнения и значений A и B рассчитали
критерий f2 с помощью непрерывного (или интегрального) способа (см. таблицу). Как следует из полученных данных, критерий f2, рассчитанный с помощью
суммы и интеграла, совпадает для большинства дже-
8
нериков. Небольшие различия вызваны, скорее всего, используемыми приближениями при переходе в
формуле к интегралу.
Аналитическое описание полученных профилей
растворения – важная задача для решения подхода к
оценке подобия оригинальных препаратов и их дженериков, так как позволяет количественно оценить
высвобождение ЛВ.
Выводы
1. Проведенный анализ профилей растворения
индапамида из таблеток показал, что для расчета
фактора подобия f2 достаточно 5 – 6 экспериментальных точек.
2. Предложен новый метод прямого расчета f2 из
параметров аппроксимации профилей растворения.
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
ЛИТЕРАТУРА
SUMMARY
1. Арзамасцев, А.П., Садчикова Н.П., Лутцева Т.Ю. Оценка высвобождения лекарственных веществ из твердых дозированных лекарственных форм в испытаниях in vitro // Фармация. – 2004, – № 4. – С. 6–9.
2. Давыдова К.С., Раменская Г.В., Кукес В.Г. и др. Установление
взаимозаменяемости воспроизведенных лекарственных средств //
Ремедиум. – 2010, № 7. – С. 16–38.
3. Guidance for Industry: Dissolution Testing of Immediate Release Solid
Oral Dosage Forms. — Rockville, MD: U.S. Department of Health and
Human Services, FDA, Center for Drug Evaluation and Research. – 1997.
4. Guidelines on the investigation of bioequivalence. CPMP/EWP/
QWP/1401/98 Rev. 1/ Corr * // EMEA. – 2010 –27 p.
5. Multisource (Generic) Pharmaceutical Products: Guidelines on
Registration Requirements to Establish Interchangeability. // Annex 7 //
WHO Technical Report Series. – 2006, № 937.
APPROXIMATE ANALYSIS OF DRUG SOLUTION PROFILES
D.A. Markelov, PhD1; I.E. Smekhova, PhD2; Yu.M. Perova, PhD2
1
Saint Petersburg State University
2
Saint Petersbueg Chemicopharmaceutical Academy
The relationship of indapamide tablet solution profiles to the time of
impact of the number of experimental points on the similarity factor f2
was analyzed. This parameter was found to remain virtually unchanged
just at 5–6 points or more. A new method was proposed to directly calculate f2 from of the approximations of solution profiles.
Key words: solution profiles, approximate analysis, similarity factor,
indapamide, tablets.
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.451.35.03:616.21].07
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ
КОНСЕРВАНТА В СПРЕЕ НАЗАЛЬНОМ.
ВАЛИДАЦИОННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
М.М. Губин, канд. техн. наук, Г.В. Азметова, С.В. Пивоварова
ВИПС-МЕД
E-mail: [email protected]
Проведенные валидационные исследования разработанной
ВЭЖХ-методики определения консерванта бензалкония хлорида
в Аква-Риносоле спрее назальном подтвердили ее соответствие
установленным критериям и позволяют использовать данную методику для контроля содержания консерванта при серийном производстве препарата.
Ключевые слова: Аква-Риносоль, бензалкония хлорид,
количественное определение, метод ВЭЖХ, валидация.
ребования к качеству лекарственных средств
(ЛС) постоянно повышаются, особенно это
касается испытаний по показателям, связанным с
терапевтической эффективностью препарата и его
безопасностью. Возрастает также роль контроля содержания в готовых лекарственных формах не только активных веществ, но и консервантов. Одним из
современных требований к аналитической методике является доказательство валидности, т.е. гарантии,
что разработанная методика обеспечивает воспроизводимые и достоверные результаты [1].
Цель настоящего исследования – разработка методики количественного определения бензалкония
хлорида в препарате «Аква-Риносоль» методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ)
и ее валидация.
Т
Экспериментальная часть
Объект исследования – препарат «Аква-Риносоль,
спрей назальный 0,65%». Препарат помещен в про-
Фармация №4, 2012
зрачный стеклянный флакон емкостью 20 мл с диаметром горла 20 мм, укупоренный обжимным микроспреером с распыляющей назальной насадкой и
защитным колпачком.
В эксперименте применяли стандартные образцы бензалкония хлорида, субстанцию натрия хлорида, отвечающую требованиям, предъявляемым к субстанциям для изготовления лекарственных форм для
инъекций. Субстанции бензалкония хлорида, калия
дигидрофосфата, натрия гидрофосфата додекагидрата соответствовали требованиям монографий Европейской фармакопеи. Воду очищенную получали с
помощью двухступенчатой установки обратноосмотической фильтрации.
Анализ проводили на хроматографе «Gilson» со
следующей комплектацией: насос 305 «Gilson», инжектор 7125 с петлей 10 мкл «Реодайн», детектор
Waters 481. В ходе разработки методики были выбраны условия хроматографирования, позволяющие добиться хорошего разрешения между пиками
гомологов бензалкония хлорида (не менее 8). Четкое разделение пиков позволяло надежно определять
консервант в препарате «Аква-Риносоль, спрей назальный».
Для количественного определения бензалкония
хлорида в Аква-Риносоле последовательно хроматографировали по 10 мкл препарата и раствора СО
бензалкония хлорида (не менее трех повторностей).
Условия хроматографирования: жидкостной хроматограф с изократическим режимом подачи под-
9
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
вижной фазы (ПФ); колонка размером 4,6 × 250 мм,
заполненная сорбентом Luna С18(2) с размером частиц 5 мкм или аналогичная; ПФ: фосфатный буферный раствор (6,8 г калия фосфорно-кислого однозамещенного и 0,961 г пентансульфокислоты
натриевой соли моногидрата в 1000 мл воды) – ацетонитрил (35 : 65); температура колонки – от 20 до
24°С; объем пробы – 10 мкл, скорость потока – 1,2
мл/мин. Детектирование проводили при длине волны 210 нм.
Содержание бензалкония хлорида в 1 мл препарата вычисляли по формуле:
10
Гомолог
бензалкония
хлорида
Гомолог бензалкония хлорида
Гомолог
бензалкония
хлорида
Гомолог бензалкония хлорида
где S0 – сумма площадей 2 основных пиков на хроматограмме раствора СО бензалкония хлорида; S1 –
сумма площадей 2 основных пиков бензалкония на
хроматограмме препарата; а0 – навеска СО бензалкония хлорида, г; А – содержание бензалкония хлорида
в СО бензалкония хлорида на безводное вещество, %;
W – содержание воды в СО бензалкония хлорида, %.
Содержание
бензалкония
хлорида
{С6Н5СН2N(СН3)2RСl (R = от С8Н17 до С18Н37)} в 1 мл
препарата должно быть от 0,0001275 до 0,0001725 г.
Хроматографическая система считается пригодной, если при хроматографировании раствора СО
бензалкония хлорида разрешение между двумя основS1 • a0 • A • (100 – W) • 5
S1 • a0 • A • (100 – W)
Х = –––––––––––––––––––––
= ––––––––––––––––––
,
ными пиками бензалкония составляет не менее 8; отS0 • 100 • 100 • 50 • 25
S0 • 2500000
носительные стандартные отклонения результатов
отдельных измерений времен
удерживания и площадей пиков
200 мВ
бензалкония не превышают 2,0%.
Для обеспечения пригодности
хроматографической системы допускается изменение содержания
-7,49
200 мВ
ацетонитрила в ПФ. Время удерживания двух основных пиков
200 мВ
бензалкония – около 6 и 11мин.
Валидацию ВЭЖХ-методики
количественного
определения
-7,45
бензалкония хлорида осуществляли в соответствии с установленными требованиями на образцах препарата и модельных
смесях, полученных в лабора-14,78
торных условиях из компоненв
тов препарата, согласно требованиям нормативных документов
-14,76
для входного контроля качества.
Изучение разработанной метоб
дики проводилось по таким валидационным характеристикам,
как специфичность, линейность
а
и диапазон применения, правильность, прецизионность (схоРис. 1. Хроматограммы растворов плацебо (а), стандартного образца
димость и внутрилабораторная
бензалкония хлорида (б), испытуемого раствора препарата (в)
прецизионность) [1–4]. ПротоТаблица 1
кол валидации с установленными критериями приемлемости
СОБЛЮДЕНИЕ ЛИНЕЙНОСТИ В ДИАПАЗОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ МЕТОДИКИ
был разработан в соответствии с
Показатели
Объем выборки, n=5
утвержденными правилами и рекомендациями [1, 4].
Концентрация испытуемого раствора, %
80
90
100
110
120
Хроматограммы, подтвержКонцентрация испытуемого раствора, С, мг/мл 0,126 0,138 0,154 0,167 0,182
дающие специфичность, предСумма площадей пиков гомологов, S
2352 2670 2950 3354 3617
ставлены на рис. 1. Время удерКоэффициент корреляции
0,996
живания
пиков
гомологов
бензалкония хлорида совпадает
Тангенс угла наклона прямой (наклон), б
22733,9
со временем удерживания пиков
Точка пересечения с осью ординат, а
-498,78
на хроматограмме раствора станОстаточная сумма квадратов отклонений
2514,75
дартного образца, раствор плаце-
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
Сумма площади пиков
гомологов
бо не имел пиков в момент выхода пиков бензалко- (3 концентрации с 3-кратным определением для кажния хлорида. В ходе эксперимента доказано, что ни дой концентрации) подтвердили правильность изуиспользуемый растворитель, ни подвижная фаза, ни чаемой методики (табл. 4).
компоненты плацебо, ни примеси не искажают реТаким образом, проведенные валидационные исзультат количественного определения.
пытания подтвердили соответствие методики колиОпределение линейности проводили на 5 уров- чественного определения бензалкония хлорида в пренях концентраций от номинального содержания бен- парате «Аква-Риносоль» установленным критериям и
залкония хлорида в препарате (в диапазоне от 80 до позволяют использовать ее для контроля содержания
120%) путем хроматографирования растворов, полу- консерванта при серийном производстве препарата.
ченных разведением раствора стандартного образца.
Критерий приемлемости – коэффициент корреляВыводы
ции – должен быть не менее 0,99 [1].
1. Разработана методика количественного опреПри статистической обработке линейной зависи- деления консерванта бензалкония хлорида в препамости полученных значений сумм площадей пиков рате «Аква-Риносоль спрей назальный».
гомологов бензалкония хлорида от концентрации по
2. Проведенные исследования подтверждают вауравнению типа y = bx+a коэффициент корреляции лидность разработанной методики и позволяют вклюлинейного регрессионного графика – 0,996. Полу- чить ее в фармакопейную статью предприятия.
ченные результаты (табл. 1) позволяют утверждать, что в диа4000
пазоне применения методики
3500
(80–120%) соблюдается линей3000
ность. Регрессионная прямая в
2500
нормализованных координатах
представлена на рис. 2.
2000
Для подтверждения сходи1500
мости и внутрилабораторной
1000
прецизионности были проана500
лизированы последовательно 6
0
образцов одной серии препара0,05
0,10
0,15
та (одним химиком – в один день
-500
0,20
и двумя аналитиками – в разКонцентрация, мг/мл
ные дни) в соответствии со следующим критерием приемлемоРис. 2. Регрессионная прямая в нормализованных координатах
сти – коэффициент вариации не
Таблица 2
должен превышать 4,5% [5]. Результаты определений и метролоРЕЗУЛЬТАТЫ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ
гические характеристики (табл.
БЕНЗАЛКОНИЯ ХЛОРИДА (ПОДТВЕРЖДЕНИЕ СХОДИМОСТИ)
2, 3) подтверждают прецизионСумма площадей пиков
ность методики.
Найдено, мг/мл
Номер измерения
гомологов бензалкония хлорида
Правильность
аналитиче2965
0,151
1
ской методики количественного определения доказывалась
2783
0,142
2
на всем диапазоне применения.
3002
0,153
3
Определение проводили методом
2914
0,148
4
стандартных добавок на модель3052
0,150
5
ных смесях, содержащих 80, 100
и 120% бензалкония хлорида от
2957
0,150
6
номинального значения. ОценОбъем выборки, n
6
ка осуществлялась путем расчета
–
Среднее значение X; мг/мл
0,149
процента нахождения известноСтандартное отклонение S
0,0038
го добавленного количества бензалкония хлорида, стандартного
Коэффициент вариации CV, %
2,5
отклонения, коэффициента ваПолуширина доверительного интервала ΔX, мг/мл
0,004
риации и доверительного интерКоэффициент Стьюдента (0,05; n –1)
2,5706
вала среднего значения (р=95%)
Критерий приемлемости
CV ≤ 4,5
[1, 4, 5]. Результаты 9 испытаний
Фармация №4, 2012
11
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
Таблица 3
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕНЗАЛКОНИЯ ХЛОРИДА,
ВЫПОЛНЕННОЕ ДВУМЯ ХИМИКАМИ (ПОДТВЕРЖДЕНИЕ ВНУТРИЛАБОРАТОРНОЙ ПРЕЦИЗИОННОСТИ)
Химик 1
Химик 2
Найдено, мг/мл
Номер
определения
Найдено, мг/мл
Номер
определения
0,152
1
0,162
1
0,148
2
0,159
2
0,153
3
0,151
3
0,145
4
0,161
4
0,155
5
0,155
5
0,150
6
0,157
6
Объем выборки, n
–
Среднее значение X; мг/мл
Стандартное отклонение S
6
0,151
Объем выборки, n
–
Среднее значение X; мг/мл
0,158
0,0036
Стандартное отклонение S
0,0041
Коэффициент вариации CV, %
2,4
6
Коэффициент вариации CV, %
2,6
Полуширина доверительного интервала ΔX, %
0,004
Полуширина доверительного интервала ΔX, %
0,004
Коэффициент Стьюдента (0,05; n-1)
2,5706
Кэффициент Стьюдента (0,05; n-1)
2,5706
CV ≤ 4,5
Критерий приемлемости
Таблица 4
РЕЗУЛЬТАТЫ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ
БЕНЗАЛКОНИЯ ХЛОРИДА В МОДЕЛЬНЫХ СМЕСЯХ
(ПОДТВЕРЖДЕНИЕ ПРАВИЛЬНОСТИ)
Количество
бензалкония
хлорида
от номинального
содержания, %
80
100
120
Номер
определения
Сумма
площадей
пиков
гомологов
бензалкония
хлорида
Содержание
бензалкония
хлорида
в модельной смеси
Средний
процент
восстановления,
%
взято,
мг/мл
найдено,
мг/мл
0,123
0,127
103,3
1
2444
2
2523
0,127
0,129
101,6
3
2463
0,124
0,119
95,7
1
2907
0,152
0,152
100,0
2
3003
0,156
0,156
100,0
3
2912
0,151
0,156
103,3
ЛИТЕРАТУРА
1. Валидация аналитических методик
для производителей лекарств / Под ред.
В.В. Береговых). – М.: Литтерра, 2008.
2. ГОСТ Р ИСО 5725–1–2002. Точность
(правильность и прецизионность) методов
и результатов измерений. Часть 1.
Основные положения и определения. –
Введен 23.04.02. – М.: ИПК Издательство
стандартов, 2002. – 32с.
3. ГОСТ Р ИСО 5725–4–2002. Точность
(правильность и прецизионность) методов
и результатов измерений. Часть 4.
Основные методы определения
правильности стандартного метода
измерений. – Введен 23.04.02. – /М.: ИПК
Издательство стандартов. – 2002. – 32с.
4. Руководство по валидации методик
анализа лекарственных средств / Под
ред. Н.В. Юргеля и др. – М., 2007.
5. АОАС, Peer-Verified Methods Program.
Manual on policies and procedures. //
Arlington, Va., USA, 1993. (16
1
3586
0,183
0,181
98,9
SUMMARY
2
3547
0,182
0,184
101,1
3
3591
0,186
0,181
97,3
DETERMINATION OF THE LEVEL
OF A PRESERVATIVE IN NASAL SPRAY:
VALIDATION TRIALS
M.M. Gubin, G.V. Azmetova,
S.V. Pivovarova
VIPS-MED Firm
The performed validation trials of a
developed high performance liquid chromatography procedure to determine the
preservative benzalkonium chloride in
Aqua-Rinosol have confirmed its compliance with the established criteria and allow
this procedure to be used for controlling the
content of the preservative during its batch
production.
Key words: Aqua-Rinosol, benzalkonium
chloride, assay, high performance liquid
chromatography, validation.
Объем выборки n
9
–
Среднее значение X; мг/мл
100,1
Стандартное отклонение S
2,559
Коэффициент вариации CV, %
2,6
Полуширина доверительного интервала ΔX, %
2,0
Коэффициент Стьюдента (0,05; n -1)
Критерий приемлемости
12
CV ≤ 4,5
Критерий приемлемости
2,306
Средний %
восстановления
не менее 94
и не более 106
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.454.1.015.2:615.832.9
ХИМИЧЕСКАЯ СОВМЕСТИМОСТЬ
МЕЛКОДИСПЕРСНЫХ МАГНИТНЫХ
НАПОЛНИТЕЛЕЙ С КОМПОНЕНТАМИ МАЗЕЙ
Е.Ю. Шабалкина, канд. фарм. наук, О.Г. Черкасова, докт. фарм. наук,
Ю.Я. Харитонов, докт. хим. наук, В.Л. Дорофеев, докт. фарм. наук
Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова
E-mail: [email protected]
Методами ИК-спектроскопии и прямой потенциометрии доказана химическая совместимость мелкодисперсных магнитных теплопроводящих наполнителей (плазмохимических порошков железа
металлического и железо-углеродного композита) и компонентов
ряда мазей заводского производства.
Ключевые слова: магнитные наполнители, химическая
совместимость, мази заводского производства
ффективность магнитокриодеструкции патологической ткани в значительной степени зависит от скорости замораживания и оттаивания,
сохранения ультранизкой температуры в замораживаемом очаге в течение заданного хирургом временного интервала, наличия мягкой магнитной теплопроводящей прокладки между криоаппликатором и
сложной, часто бугристой поверхностью патологиче-
Э
ского очага, магнито-механического взаимодействия
мягкой теплопроводящей композиции с наружным
источником магнитного поля, наличием в составе теплопроводящей композиции соответствующих данной патологии лекарственных веществ [3].
Цель настоящей работы состояла в исследовании
химической совместимости ингредиентов магнитных
теплопроводящих композиций (МТК) – мелкодисперсных магнитных теплопроводящих наполнителей – плазмохимических порошков железа металлического и железо-углеродного композита (массовая
доля железа ~ 50%) с компонентами мазей.
Экспериментальная часть
Объекты исследования: 7 мазей заводского изготовления (табл. 1). Выбор мазей был обусловлен рекомендациями криологов и доступностью отечественТаблица 1
МАЗИ ЗАВОДСКОГО ПРОИЗВОДСТВА, ВЫБРАННЫЕ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ МТК
№ объекта
исследования
Наименование
Фармакологическое
действие [1,2]
Производитель [1,2]
Предполагаемая
область использования
1
Левомиколь
Противовоспалительное (дегидратирующее). Антибактериальное,
регенерирующее
Акрихин, Нижфарм
Магнитокриодеструкция
гнойных очагов
2
Метилурацил
Противовоспалительное,
стимуляция эпителизации
Акрихин, Нижфарм,
Алтайвитамины
Магнитокриохирургическое
лечение тонзиллитов
3
Диоксидин
Антибактериальное
Акрихин, Нижфарм
Магнитокриодеструкция
вросшего ногтя и атером
различной локализации
4
Гентамицин
Антибактериальное, бактериостатическое действие на грамположительные и грамотрицательные
микроорганизмы
Акрихин, Нижфарм
Магнитокриохирургическое
лечение воспалительных
процессов шейки матки
5
Гепарин
Антикоагулянтное, противовоспалительное, местноанестезирующее
Акрихин, Нижфарм
Магнитокриодеструкция
геморроидальных узлов
6
Гидрокортизон
Противовоспалительное,
противоаллергическое
Акрихин, Нижфарм
Магнитокриотерапевтическое
лечение долго незаживающих
трофических язв
7
Синафлан
Противовоспалительное,
антиаллергическое, противозудное
Акрихин, Нижфарм
Магнитокриотерапевтическое
лечение нейродермита
и псориаза
Фармация №4, 2012
13
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
ванием спектрофотометра ИНФРАЛЮМ ФТ-02 в диапазоне 4000–400 см-1 были получены ИК-спектры
поглощения порошков железа металлического,
железо-углеродного композита, выбранных для изучения образцов заводских мазей и соответствующих
МТК. ИК-спектры МТК регистрировались в 2 режимах: сразу после приготовления МТК и через сутки.
ИК-спектры МТК представляют собой суперпозицию спектров составляющих их компонентов. Полученные спектральные данные позволяют говорить
об отсутствии взаимодействия между рассматриваемыми магнитными наполнителями и компонентами
заводских мазей, по крайней мере, в течение суток,
поскольку сдвига или возникновения новых полос
в спектрах МТК не обнаружено. Ниже представлены ИК-спектры поглощения (в вазелиновом масле)
заводской мази «Гепарин» (рис. 1) и МТК с железоуглеродным композитом на базе заводской мази «Гепарин» через сутки с момента приготовления (рис. 2).
Проведено потенциометрическое изучение химической совместимости, которое заключалось в сравнительном исследовании рН водных извлечений из
заводских мазей и соответствующих МТК с порошками железа металлического и железо-углеродного
композита.
При приготовлении водных
100
извлечений навеску мази или
МТК с порошком железа металли80
ческого или железо-углеродного
композита смешивали с дистил60
лированной водой в массовом
соотношении 1:20 и тщательно
40
перемешивали. Полученную вы20
тяжку фильтровали через бумажный фильтр, затем проводили по0
тенциометрическое определение
4000
3000
2000
1000
рН фильтрата на «Иономере униВолн, число
версальном ЭВ-74» при комнатРис. 1. ИК-спектр поглощения (в вазелиновом масле) заводской мази «Гепарин»
ной температуре. В качестве стандартного электрода (электрода
сравнения) применяли хлорсере100
бряный электрод марки ЭВЛ-IM.
Индикаторным электродом слу80
жил стеклянный электрод марки
ЭСЛ-43-07, пригодный для рабо60
ты в интервале рН от 0 до 14. Измерения значений рН водных из40
влечений проводили в течение 2 ч
с интервалом около 30 мин.
20
Согласно полученным данным (табл. 2), введение в завод0
ские мази порошков магнитных
4000
3000
2000
1000
наполнителей
сопровождается
Волн, число
небольшим сдвигом рН водного
Рис. 2. ИК-спектр поглощения (в вазелиновом масле) МТК («Гепарин» + Fe-Сизвлечения в щелочную область.
композит) через сутки с момента приготовления
Существенного изменения рН соПропускание
Пропускание
ных лекарственных форм. Для изучения отобраны 2
мази («Левомиколь» и «Диоксидин») – на основе ПЭГ,
остальные – на вазелин-ланолиновой основе [1, 2].
Согласно ранее полученным данным, при введении порошка железо-углеродного композита в гидрофильные и гидрофобные мазевые основы, не содержащие лекарственных веществ, образуются пригодные
для криохирургии МТК, однако срок их годности
(установленный по методике «ускоренного старения»),
невелик и составляет всего 5 мес с момента приготовления [4]. С учетом этого МТК на базе заводских мазей готовили экстемпорально, путем введения в заводские мази мелкодисперсных магнитных наполнителей
по типу суспензии. Массовая доля магнитного наполнителя в МТК на базе мазей заводского производства
составляла 5%. Химическую совместимость плазмохимических порошков железа металлического и железоуглеродного композита с компонентами заводских мазей исследовали 2 независимыми методами: методом
прямой потенциометрии и ИК-спектроскопии.
При ИК-спектроскопическом исследовании химической совместимости магнитных наполнителей
(железа металлического и железо-углеродного композита) с компонентами заводских мазей с использо-
14
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
Таблица 2
ЗНАЧЕНИЯ РН ВОДНЫХ ИЗВЛЕЧЕНИЙ ИЗ ЗАВОДСКИХ МАЗЕЙ
И МАГНИТНЫХ ТЕПЛОПРОВОДЯЩИХ КОМПОЗИЦИЙ НА ИХ ОСНОВЕ
Время, ч
№
Объект исследования
0,5
1,0
1,5
2,0
рН водных извлечений
1
Левомиколь
5,35
6,00
6,05
6,15
2
Левомиколь + Fe-металлическое
5,95
6,20
6,20
6,22
3
Левомиколь + Fe-С-композит
5,45
5,90
5,90
6,20
4
Метилурацил
5,08
5,75
5,95
6,10
5
Метилурацил + Fe-металлическое
6,05
6,25
6,20
6,35
6
Метилурацил + Fe-С-композит
5,95
6,19
6,19
6,27
7
Диоксидин
5,45
6,15
6,29
6,25
8
Диоксидин + Fe-металлическое
5,80
6,05
6,10
6,15
9
Диоксидин + Fe-С-композит
5,55
5,90
5,92
6,20
10
Гентамицин
5,20
6,25
6,21
6,20
11
Гентамицин + Fe-металлическое
6,15
6,05
6,10
6,15
12
Гентамицин + Fe-С-композит
5,85
5,97
6,00
6,05
13
Гепарин
5,20
6,30
6,65
6,50
14
Гепарин + Fe-металлическое
5,90
6,20
6,25
6,40
15
Гепарин + Fe-С-композит
6,35
6,45
6,45
6,50
16
Гидрокортизон
5,08
5,90
6,00
6,20
17
Гидрокортизон + Fe-металлическое
5,90
5,90
5,85
5,85
18
Гидрокортизон + Fe-С-композит
5,75
5,85
5,85
5,90
19
Синафлан
4,30
5,85
5,85
6,20
20
Синафлан + Fe-металлическое
5,75
5,70
5,85
6,00
21
Синафлан + Fe-С-композит
5,60
5,85
5,90
5,85
ответствующих водных извлечений при введении магнитных наполнителей в заводские мази не отмечено.
Таким образом, результаты исследования свидетельствуют в пользу химической совместимости
обоих рассматриваемых магнитных наполнителей с
компонентами испытуемых заводских мазей. Наблюдаемый небольшой разброс значений рН (см. табл. 2)
можно объяснить технологическими причинами.
Выводы
1. Методом ИК-спектроскопии показано отсутствие химического взаимодействия между магнитными наполнителями (плазмохимическими порошками
железа металлического и железо-углеродного композита) и компонентами заводских мазей «Левомиколь», «Метилурацил», «Диоксидин», «Гентамицин»,
«Гепарин», «Гидрокортизон», «Синафлан».
2. Химическая совместимость испытуемых магнитных наполнителей с компонентами заводских мазей подтверждена методом прямого потенциометрирования.
Фармация №4, 2012
ЛИТЕРАТУРА
1. Регистр лекарственных средств России. Издание 5. – М.:
РЕМАКО, 1997/1998. – 878 с.
2. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России.
Издание 14. – М.: Астра ФармСервис, 2008. – 1670 с.
3. Шабалкина Е.Ю., Черкасова О.Г., Коченов В.И. и др. Мазевые
композиции с магнетитом для магнитокриодеструкции
патологических очагов // Нижегородский медицинский журнал. –
2008, № 4. – С. 55– 60.
4. Шабалкина Е.Ю. Нанодисперсные магнитомягкие материалы
как компоненты теплопроводящих сред для
магнитокриовоздействий: Автореф. дис. … канд. фарм. наук. – М.,
2010 – 23 с.
SUMMARY
CHEMICAL COMPATIBILITY OF FINE-DISPERSED MAGNETIC FILLERS
WITH OINTMENT COMPONENTS
E.Yu. Shabalkina, PhD; O.G. Cherkasova, PhD; Yu.Ya. Kharitonov, PhD;
V.L. Dorofeyev, PhD
I.M. Sechenov First Moscow State Medical University
Infrared spectroscopy and direct potentiometry have proven the
chemical compatibility of fine-dispersed magnetic thermally conductive fillers (plasma chemical powders of a metallic iron and ironcarbon composite) and components of a number of factory-made
ointments.
Key words: magnetic fillers, chemical compatibility, factory-made
ointments.
15
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
© С.Е. Орлова, И.Н. Зилфикаров, 2012
УДК 615.322:634.613.4].07
СТАНДАРТИЗАЦИЯ ЭКСТРАКТА
ПЛОДОВ ПАЛЬМЫ САБАЛЯ
С.Е. Орлова, И.Н. Зилфикаров, докт. фарм. наук
ЗАО «Вифитех», Московская обл., п. Оболенск
E-mail: [email protected]
Разработана методика спектрофотометрического определения
суммы тритерпеноидов и фитостеринов в липофильном экстракте
плодов пальмы Сабаля, который входит в состав препаратов для
лечения и профилактики гиперплазии простаты.
Ключевые слова: пальма Сабаля, экстракт плодов, тритерпеноиды,
фитостерины, спектрофотометрия, β-амирин.
альма Сабаля (пальма ползучая или карликовая) – Serenoa repens (Bartr.) Small. (синонимы: Serenoa serrulata, Sabal serrulata и др.), семейства
пальмовых или арековых – Arecaceae. Пальма Сабаля
– популярный источник получения препаратов и биологически активных добавок (БАД), предназначенных для лечения и профилактики заболеваний предстательной железы [1–3]. В качестве лекарственного
растительного сырья применяют плоды, представляющие собой костянку удлиненно-яйцевидной формы длиной около 2–3 см, до созревания зеленого или
желтого цвета, в спелом состоянии синевато-черного
цвета, содержащую одно твердое семя. Зрелые высушенные плоды измельчают и экстрагируют 96% этиловым спиртом, получая при этом густой экстракт
– массу темно-коричневого цвета с характерным запахом, практически не растворимую в воде. Основными компонентами экстракта являются тритерпеноиды, фитостерины и высшие жирные кислоты [1].
Цель данной работы – разработка методики количественного определения суммы тритерпеноидов и
фитостеринов в экстракте плодов пальмы Сабаля.
П
Экспериментальная часть
Качественный анализ исследуемого экстракта
плодов пальмы Сабаля, проведенный методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) с использованием стандартных образцов β-амирина и β-ситостерина
(Sigma), выявил в его составе более 10 родственных
соединений терпеновой природы, среди которых доминирующий компонент – β-амирин (рис. 1).
В методике количественного определения суммы тритерпеноидов и фитостеринов использована их
способность селективно извлекаться хлороформом
из неомыляемой фракции и образовывать окрашенные продукты окисления с серной кислотой.
16
Для расчета суммы тритерпеноидов предложено использовать достоверный образец β-амирина.
В условиях анализа испытуемый и стандартный растворы имели общую полосу поглощения (рис. 2).
Учитывая ограниченную доступность достоверного
образца β-амирина, а также для снижения возможного относительного стандартного отклонения был
рассчитан его удельный показатель поглощения E1 см
1%
, равный в условиях анализа 340 (табл. 1).
Методика количественного определения. Около
0,1 г (точная навеска) экстракта плодов пальмы Сабаля помещают в коническую колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 20 мл 20% раствора натрия
карбоната и нагревают на водяной бане с обратным
холодильником в течение 1 ч. Колбу охлаждают, прибавляют 20 мл воды, затем смесь количественно, с помощью 40 мл хлороформа, переносят в делительную
воронку вместимостью 125 мл и взбалтывают. После
разделения фаз нижний хлороформный слой сливают, экстракцию повторяют 20 мл хлороформа. Объединенное хлороформное извлечение фильтруют через
II
I
1
2
3
Рис. 1. Схема ТСХ-хроматограммы тритерпеноидов
и фитостеринов экстракта плодов пальмы Сабаля:
1 – экстракт плодов пальмы Сабаля;
2 – достоверный образец β-ситостерина (I);
3 – достоверный образец β-амирина (II)
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
бумажный фильтр с 2 г натрия сульфата безводного и
фильтрат упаривают под вакуумом досуха. Сухой остаток растворяют в концентрированной серной кислоте
и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл. Объем раствора доводят до метки концентрированной серной кислотой, затем выливают в
сухой стакан и перемешивают (раствор А).
1,0 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем до метки концентрированной серной кислотой, выливают в сухой стакан
и перемешивают (раствор Б). Измеряют оптическую
плотность раствора Б на спектрофотометре при длине волны 311 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно концентрированной серной кислоты.
Содержание суммы тритерпеноидов и фитостеринов в экстракте Х рассчитывают (в %) по формуле:
D
1,0
0,9
0,8
0,7
0,6
0,5
0,4
1
0,3
0,2
D • 25 • 10
Х = ––––––––– ,
340 • a • 1
2
0,1
0,0
где D – оптическая плотность раствора Б; а – навеска экстракта, г.
Разработанная методика была апробирована на
экспериментальных образцах экстракта плодов пальмы Сабаля, полученных в производственных условиях ЗАО «Вифитех». Согласно полученным данным
(табл. 2), содержание суммы тритерпеноидов и фитостеринов в экстракте плодов пальмы Сабаля составляет около 1% в пересчете на β-амирин.
Преимущества разработанной методики: селективность и высокая точность. В сочетании с простотой исполнения это позволяет быстро и достоверно
оценивать содержание основных действующих компонентов в экстракте пальмы Сабаля и служит предпосылкой создания новых отечественных лекарственных препаратов для профилактики и лечения
заболеваний простаты.
250
300
λ, нм
350
400
Рис. 2. УФ-спектр поглощения продуктов
реакции тритерпеноидов и фитостеринов пальмы
Сабаля (1) и β-амирина (2) с серной кислотой
ЛИТЕРАТУРА
1. Куркин В.А. Основы фитотерапии. – Самара: ООО «Офорт»;
СамГМУ Росздрава, 2009. – 963 с.
2. Ефремов А.П. Маленькая пальма с большим будущим //
Лекарственные растения. – 2002. – №3 (4), С. 15–16.
3. Log T. Serenoa repens in benign prostatic hyperplasia. //Tidsskr Nor
Laegeforen. – 2008, №128 (Vol. 11). – Р. 1293–1294.
STANDARDIZATION OF SABAL PALM (Sarenoa serrulata)
FRUIT EXTRACT
S.E. Orlova, I.N. Zilfikarov, PhD
ZAO Vifitekh, Obolensk, Moscow Region
A procedure has been developed for the spectrophotometric determination of the sum of triterpenoids and phytosterols in the lipophilic
Sabal palm (Sarenoa serrulata) fruit extract that is part of preparations
for the treatment and prevention of prostatic hyperplasia.
Key words: Sabal palm (Sarenoa serrulata), fruit extract, triterpenoids,
phytosterols, spectrophotometry, β-amirin.
Вывод
Разработана спектрофотометрическая методика
количественного определения суммы тритерпеноидов
и фитостеринов в экстракте плодов пальмы Сабаля.
Таблица 1
ОПРЕДЕЛЕНИЕ УДЕЛЬНОГО ПОКАЗАТЕЛЯ ПОГЛОЩЕНИЯ ПРОДУКТОВ
РЕАКЦИИ β-АМИРИНА С КИСЛОТОЙ СЕРНОЙ ПРИ ДЛИНЕ ВОЛНЫ 311 нм
X
f
tαk
Р
S
∆x
ε, %
340
5
2,57
0,95
1,4001
3,6
1,1
Таблица 2
СОДЕРЖАНИЕ СУММЫ ТРИТЕРПЕНОИДОВ И ФИТОСТЕРИНОВ В ЭКСТРАКТЕ ПЛОДОВ ПАЛЬМЫ САБАЛЯ
Образец
1
2
3
X
0,94
1,09
1,12
Фармация №4, 2012
f
5
5
5
Р
S
0,95
116,7 × 10
0,95
155,6 × 10
0,95
140,1 × 10
-4
∆x
ε, %
0,030
3,19
-4
0,040
3,67
-4
0,036
3,21
17
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.218.2.074
СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
ДИМЕДРОЛА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ
ЕГО ИОННОГО АССОЦИАТА
Х.А. Мирзаева1, У.Г. Бюрниева2, канд. хим. наук,
А.Ш. Рамазанов1, докт. хим. наук, М.М. Кимпаева1
1
Дагестанский государственный университет, Махачкала
2
Дагестанская государственная медицинская академия, Махачкала
E-mail: [email protected]
Показана перспективность использования ОП-7 в качестве стабилизатора малорастворимого ассоциата {[MoO2(H2R)2]2–•2ДМ+}
и возможность применения четырехкомпонентной водорастворимой формы {[МоО2(Н2R)2]2–•2ДМ+.ОП-7} для безэкстракционного
спектрофотометрического определения димедрола в лекарственных препаратах. Разработана методика определения димедрола, отличающаяся чувствительностью, простотой техники
выполнения эксперимента и нетоксичностью используемых реагентов.
Ключевые слова: спектрофотометрия, четырехкомпонентные
системы, ионные ассоциаты, НПАВ ОП-7, димедрол, методика
определения.
имедрол применяется в качестве антигистаминного, седативного вещества и входит в состав многих лекарственных препаратов.
Для его определения используются малоспецифичные методы титрования, основанные на расчете
хлорид-ионов, или метод неводного титрования [1].
Недостаток указанных методов – их низкая чувствительность и субъективность восприятия окраски индикаторов.
В последние годы для определения лекарственных веществ, содержащих аминный азот, применяются ионные ассоциаты с кислотными красителями.
Перспективными аналитическими реакциями можно считать новые разновидности выполнения реакций в более сложных трех- и четырехкомпонентных
системах, одним из компонентов которых является поверхностно-активное вещество (ПАВ), способствующее улучшению чувствительности, избирательности и контрастности реакций, появлению
возможности осуществления реакций в мицеллярных средах [2, 4, 5]
Цель настоящего исследования – разработка
безэкстракционной спектрофотометрической методики определения димедрола (ДМ) в лекарственных
препаратах с использованием его ионного ассоциата с молибденом и бромпирогаллоловым красным
Д
18
(БПК) в присутствии неионогенного ПАВ – полиоксиэтилированного эфира алкилфенола (НПАВ) –
ОП-7.
Экспериментальная часть
Для исследований использовали 2,08•10-3М
раствор молибдена (VI), приготовленный растворением точной навески молибдата натрия
Na2MoO4•2H2O в горячей дистиллированной воде,
водные растворы 1•10-3 М бромпирогаллолового
красного, димедрола – 0,1% и ОП-7 – 2%. Растворы с меньшей концентрацией готовили разбавлением исходных. Оптическую плотность измеряли
на КФК-3. Значение рН контролировали с помощью иономера ЭВ-74.
Ранее было установлено, что введение димедрола в раствор двойного комплекса Мо с БПК способствует образованию малорастворимого трехкомпонентного комплекса интенсивно синего цвета
типа электронейтрального ионного ассоциата состава {[MoO2(H2R)2]2-•2ДМ+}, хорошо экстрагируемого бутиловым спиртом в области рН 2,5–5,5.
Максимальное светопоглощение экстракта батохромно смещено и наблюдается при длине волны 580–
600 нм [3].
Одним из эффективных факторов повышения диспергирующего, пептизирующего и стабилизирующего действия коллоидных систем является поверхностно-активная среда, которая создается
обработкой растворами гидрофильных ПАВ. Предварительно было исследовано стабилизирующее
действие НПАВ ОП-7 и выявлены оптимальные
условия получения водорастворимой формы ионного ассоциата {[MoO2(H2R)2]2-•2ДМ+}. Установлено, что действие ОП-7 зависит от порядка ввода
компонентов в систему. Наибольший эффект стабилизации достигался при введении 1–2 мл 0,1–
1% раствора ОП-7 до ДМ в диапазоне рН 1–13. При
увеличении концентрации более 1% наблюдалось
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
расслоение фаз (флотация). Максимальный выход
стабилизированного комплекса достигался при рН
4,5–5,4 (рис. 1) и 3-кратном избытке БПК. Светопоглощение комплекса в четырехкомпонентной
системе Мо–БПК–ОП-7–ДМ оставалось постоянным в течение 5–7 дней, затем наблюдалось постепенное уменьшение интенсивности окраски,
тогда как тройной комплекс выделялся сразу в виде
синего осадка.
Влияние температуры на свойства комплекса проявлялось по-разному, в зависимости от концентрации ОП-7. Светопоглощение было максимальным и постоянным до 60°С при концентрациях
ОП-7, близких к критической концентрации мицеллообразования, а в случае избытка ОП-7 (выше
2,0%) наблюдалась флотация в пенах НПАВ, что
согласуется с литературными данными [5]. Анализ
спектров поглощения (рис. 2) показал, что максимум светопоглощения БПК наблюдался при длине волны 560 нм. Водорастворимая форма комплекса характеризовалась интенсивным и контрастным
светопоглощением в длинноволновой области спектра с максимумом при длине волны 600–620 нм.
Следует отметить, что кривые светопоглощения бутанольного экстракта тройного и водорастворимого четвертного комплексов мало различались между
собой по форме, но заметно – по высоте максимумов, что свидетельствовало об однотипности состава обоих комплексов.
Введение мицеллярного раствора ОП-7 способствовало повышению устойчивости тройного комплекса в водных растворах вследствие его фиксации
на мицеллах ОП-7 за счет солюбилизации. Мицеллы
ОП-7, препятствуя агрегации частиц комплекса, способствовали накоплению в системе мелкодисперс-
ных частиц, что приводило к росту интенсивности
светопоглощения и увеличению чувствительности.
Предполагаемую схему образования водорастворимой формы комплекса можно представить следующим образом:
МоО22+ + 2Н3R– + ОП-7 + 2ДМ+ =
= {[МоО2(Н2R)2]2–•2ДМ+ОП-7} + 2Н+.
Образующийся ионный ассоциат высокочувствителен к димедролу; коэффициент молярного
поглощения ε = (6,2± 0,03) • 103. Растворы устойчивы во времени и подчиняются основному закону светопоглощения. Линейность градуировочной
кривой для димедрола наблюдается в диапазоне
концентраций 4–30 мкг/мл. Градуировочный график описывается уравнением: А=0,101с + 0,115
(R2=0,984). Реакция высококонтрастна – Δλ = 40 –
60 нм, (λmax
= 560 нм, λmax
= 600 – 620 нм) и
БПК–ОП-7–ДМ
компл.
в условиях образования комплекса реагент поглощает незначительно, что способствует повышению точности определения.
Исследования по изучению избирательности реакции показали, что четырехкомпонентный комплекс
может быть использован для определения димедрола
в присутствии таких ингредиентов, как дибазол, теобромин, глюкоза, аскорбиновая кислота и др., входящих в состав некоторых готовых лекарственных форм
(таблеток, порошков, растворов для инъекций). Содержание димедрола находили по градуировочному
графику.
Методика построения градуировочного графика.
В мерных колбах емкостью 25 мл готовят серию растворов четырехкомпонентного комплекса с постоянной концентрацией БПК (1 мл 1•10-3 М), ОП-7 (1 мл
0,1%), Мо (VI) (0,5 мл 2,08•10-3 М) и при постоянно
увеличивающихся концентрациях димедрола (от 0,2
А
0,7
А
1,4
0,6
1,2
0,5
1,0
0,4
0,8
0,3
0,6
0,2
0,4
0,1
0,2
0,0
0
1
2
3
4
5
рН
6
7
8
9
Рис. 1. Зависимость светопоглощения комплекса
Мо–БПК–ОП-7–ДМ от рН; СМо = 2,7•10-5 М,
СБПК=4,0•10-4 М, ω%ОП-7=0,1 (2 мл),
ω%ДМ=0,1% (2 мл)
Фармация №4, 2012
1
2
3
0,0
400
450
500
550
λ
600
650
700
Рис. 2. Спектры поглощения: 1 – БПК–ОП-7–ДМ;
2 – Мо–БПК–ОП-7–ДМ; 3 – дифференциальный
СМо=2,08•10-4 М, ω%ОП-7=0,1 (1 мл),
ω%ДМ=0,1% (2 мл), рН=5, l =1 см
19
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
РЕЗУЛЬТАТЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДИМЕДРОЛА
В ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМАХ (n=6, р=0,95)
Статистические характеристики
Состав
лекарственной формы
–
x
Sr
tP,f × S
–
x ±––
––––
√n
Pulv. dimedroli 0,005 г
Glucosi 0,005 г
5,04 мг
0,012
5,04±0,05
Sol. Dimedroli
Hydr, 2%
2,01%
0,024
2,01±0,05
Tab. Dimedroli 0,001 г
Glucosi 0,1 г
1,02 мг
0,031
1,02±0,02
до 1,6 мг). Устанавливают рН 5 0,1М раствором HCl и
доводят растворы до метки дистиллированной водой.
В качестве раствора сравнения используют раствор,
приготовленный при тех же условиях, но без добавления димедрола. Измеряют оптическую плотность при
длине волны 620 нм в кюветах с толщиной поглощающего слоя 1 см.
Методика определения димедрола в растворах для
инъекций. Содержимое ампул разбавляют в 50 раз дистиллированной водой, 5 мл разбавленного раствора
обрабатывают по методике построения градуировочного графика.
Методика определения димедрола в таблетках.
Навеску порошка растертых таблеток растворяют
в таком количестве дистиллированной воды, чтобы получить раствор с концентрацией димедрола
0,2–4,0 мг/мл. Для отделения от малорастворимых
включений раствор фильтруют через сухой фильтр и
разбавляют до метки дистиллированной водой. Из
полученного фильтрата отбирают 2 мл и далее обрабатывают по методике построения градуировочного
графика.
Содержание димедрола в пересчете на 1 таблетку
вычисляют по формуле:
q × V × mT
X = –––––––––
,
Va × mн
где mT – средняя масса таблетки, мг; mн – навеска
растертых таблеток, мг; q – количество димедрола,
найденное по градуировочному графику, мг; Va – объем раствора, взятый для определения, мл; V – общий
объем исследуемого раствора, мл; Х – содержание
димедрола в 1 таблетке, мг.
Преимущества предложенной методики заключаются в высокой чувствительности, использовании
нетоксичных реагентов, простоте техники выполне-
20
ния эксперимента. Результаты анализа и метрологические характеристики разработанной методики
представлены в таблице.
Выводы
1. Изучено влияние НПАВ ОП-7 на взаимодействие молибдена (VI) с БПК и димедролом. Показана перспективность использования НПАВ ОП-7 в
качестве стабилизатора малорастворимого ассоциата
{[MoO2(H2R)2]2–•2ДМ+}.
2. Разработана и апробирована безэкстракционная спектрофотометрическая методика определения
димедрола в лекарственных формах, основанная на
образовании водорастворимого ионного ассоциата
{[МоО2(Н2R)2]2–•2ДМ+.ОП-7}. Преимущества предложенной методики: высокая чувствительность, использование нетоксичных реагентов, а также простая
техника выполнения эксперимента.
Работа выполнена при финансовой поддержке
Минобрнауки РФ (госконтракт № 16.552.11.7018) с
использованием оборудования Аналитического центра коллективного пользования Дагестанского научного центра РАН.
ЛИТЕРАТУРА
1. Государственная фармакопея СССР, ХI издания, часть 1. – М.:
Медицина, 1987. – 239 с.
2. Мирзаева Х.А., Ахмедова М.С., Рамазанов А.Ш., Ахмедов С.А.
Экстракционно-фотометрическое определение димедрола и
папаверина с сульфоназо и их применение в анализе // Журнал
аналитической химии. – 2004. – Т.59, № 3. – С. 245–249.
3. Мирзаева Х.А. Татаев О.А., Магомедова В.Ш., Яковлева Л.Н.
Спектрофотометрическое изучение комплексообразования
молибдена с пирогаллоловым и бромпирогаллоловым красным и
папаверином // Журнал неорганической химии. – 1982. – Т.27, № 4. –
С. 929–933.
4. Саввин С.Б., Чернова Р.К., Штыков С.Н. Поверхностно-активные
вещества (аналитические реагенты). – М.: Наука, 1999. – 251 с.
5. Штыков С.Н. Химический анализ в нанореакторах: основные
понятия и применение // Журнал аналитической химии. – 2002. – Т.
57, № 10. – С. 1018–1028.
SUMMARY
SPECTROPHOTOMETRIC DETERMINATION OF DIMEDROL USING
ITS IONIC ASSOCIATE
Kh.A. Mirzayeva1, U.G. Byurniyeva, PhD2, A.Sh. Ramazanov, PhD1,
M.M. Kimpayeva1
1
Dagestan State University, Makhachkala
2
Dagestan State Medical Academy, Makhachkala
The paper shows that it is promising to use OP-7 as a low soluble associate stabilizer {[MoO2(H2R)2]2–.2DМ+} and it is possible to use its fourcomponent water-soluble form {[МоО2(Н2R)2]2–.2DМ+.ОP-7}for extraction-free spectrophotometric determination of dimedrol in drugs. A procedure has been developed to determine dimedrol, which is distinguished by its sensitivity, easy-to-use to make an experiment, and nontoxicity of the used reagents.
Key words: spectrophotometry, four-component systems, ionic associates, the nonionic surfactant OP-7, dimedrol, determination procedure.
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
© Д.М. Попов, А.В. Наумов, 2012
УДК 615.322:582.669.2].074
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИТАМИНОВ
В ТРАВЕ ЗВЕЗДЧАТКИ СРЕДНЕЙ
Д.М. Попов, докт. фарм. наук, А.В. Наумов
НИИ фармации Первого Московского государственного
медицинского университета им. И.М. Сеченова
E-mail: Popovdm – [email protected] ru
Разработана ВЭЖХ-методика количественного определения в
траве звездчатки средней аскорбиновой кислоты и тиамина гидрохлорида. Представлены данные по содержанию витаминов в сырье.
Ключевые слова: звездчатка средняя, аскорбиновая кислота,
тиамина гидрохлорид, содержание, метод ВЭЖХ.
могут использоваться физико-химические методы:
фотоколориметрический,
УФ-спектрофотометрический, ВЭЖХ и др. [3, 5]. В наших исследованиях
для разработки методики количественного определения аскорбиновой кислоты и тиамина гидрохлорида в
траве звездчатки был использован метод ВЭЖХ.
Экспериментальная часть
Объектом исследования служила трава звездвездчатка средняя или мокрица – Stellaria
media L. – однолетнее травянистое растение чатки средней (мокрицы), собранная в период цвесемейства гвоздичных (Caryophyllaceae), распростра- тения в Московской области. При подборе условий
нена почти повсеместно на территории СНГ (по сы- экстракции витаминов С и В1 из растительного сырым огородам, в садах, по пашням, оврагам, лесам и рья было установлено, что оптимальный выход виберегам рек). Трава звездчатки широко используется таминов С и В1, наблюдался при измельчении сырья
в народной медицине как диуретическое, слабитель- до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаменое, противовоспалительное, кровоостанавливаю- тром отверстий 2 мм, использовании в качестве эксщее средство. В Европе траву звездчатки применяют трагента 70% спирта этилового; соотношение сыпри опухолях различной локализации. Информации рья и экстрагента – 1:50; время экстракции – 1 ч 30
о химическом составе растения мало. Согласно дан- мин при комнатной температуре. В качестве рабоным литературы, в траве звездчатки средней содер- чих стандартов (РСО) были использованы аскорбижатся тритерпеновые сапонины, витамины (С, К, Е и новая кислота и тиамина гидрохлорид фирмы Sigma
др.), флавоноиды (витексин, сапонаритин и др.), ду- (см. рисунок).
бильные вещества, высшие ароматические спирты [2, 4].
Цель настоящего исследо650
вания – разработка методики
600
количественного
определения
аскорбиновой кислоты и тиами550
на гидрохлорида в траве звезд500
чатки средней.
Содержание аскорбиновой
450
кислоты в растительном сырье
400
(плодах шиповника) устанавливают титрометрически, исполь350
2
зуя в качестве титранта раствор
1
300
2,6-дихлорфенолиндофенолята
натрия, в соответствии с требо0,5
1,0
1,5
2,0
2,5
3,0
3,5
4,0
4,5
5,0
5,5
6,0
ваниями фармакопеи [1]. Однако
Время, мин
применение этого титранта приХроматограмма водно-спиртового извлечения звездчатки
водит к получению недостаточсредней и стандартных растворов аскорбиновой кислоты и витамина В1:
но воспроизводимых и точных
1– растворы РСО витаминов; 2 – извлечение из травы звездчатки средней
результатов анализа. Кроме того,
Фармация №4, 2012
Аскорбиновая кислота
Витамин В1
З
21
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
Таблица 1
РЕЖИМ ЭЛЛЮИРОВАНИЯ
№ этапа
Продолжительность этапа
Раствор А, %
Раствор В, %
Режим
0
10
4
95
Изократ.
1
40
64
15
К=1
2
5
85
15
Изократ.
По 10 мкл раствора Б, раствора РСО аскорбиновой кислоты и раствора РСО тиамина гидрохлорида
по отдельности вводят в хромотограф.
Содержание аскорбиновой кислоты или тиамина
гидрохлорида (в %) на абсолютно сухое сырье (Х) вычисляют по формуле:
При разработке методики использовали жидкостной хроматограф высокого давления, укомплектованный системой градиентной подачи элюента, УФдозиметрическим детектором с переменной длиной
волны, а также комплексной системой сборки и обработки данных.
Хроматографирование осуществляли при следующих условиях: колонка 250 • 4,6 мм, заполненная сорбентом Cromosil 100–5С+8 с размером частиц 5 мкм;
температура термостата – 38°С; длина волны детектирования – 255 нм; скорость элюирования – 1000 мкл/
мин; время регистрации – 6 мин; подвижная фаза –
ацетонитрил (А); 0,1% раствор фосфорной кислоты
(В). Режим элюирования представлен в табл. 1.
Методика количественного определения. Около
2,0 г (точная навеска) травы звездчатки, измельченной до размера частиц, проходящих сквозь сито с
диаметром отверстий 2 мм, помещают в круглодонную колбу вместимостью 250 мл, добавляют 60 мл
70% спирта этилового и взбалтывают на вибрационном аппарате в течение 1 ч. Затем извлечение фильтруют через бумажный фильтр в колбу вместимостью
100 мл, следя за тем, чтобы частицы сырья не попали
на фильтр. В колбу, в которой проводили извлечение,
добавляют 40 мл 70% спирта этилового и осуществляют повторную экстракцию в течение 30 мин. Извлечение фильтруют через тот же фильтр в ту же мерную
колбу. Шрот и фильтр промывают 10 мл 70% спирта
этилового и доводят им же объем раствора в колбе до
метки (раствор А).
5 мл испытуемого раствора А фильтруют через микропористый фильтр с диаметром пор 0,45 мкм, первые 2 мл фильтрата отбрасывают. Фильтрат (раствор
Б) хроматографируют с помощью высокоэффективного жидкостного хроматографа, проводя не менее 5
повторений.
Sобр × 100 × m × 2,5 × 100 × 100
X = –––––––––––––––––––––––––––
=
Sст. × a × 100 × 25 × (100 – W)
Sобр × m × 1000
= ––––––––––––––––
,
Sст. × a × (100 – W)
где Sобр – среднее значение площадей пиков на хроматограмме испытуемого раствора; Sст. – среднее
значение площадей пиков на хроматограмме РСО
аскорбиновой кислоты или тиамина гидрохлорида; а – навеска сырья, г; m – навеска стандартного
образца аскорбиновой кислоты или тиамина гидрохлорида; W – потеря в массе при высушивании сырья, %.
Методика была апробирована с целью проверки
воспроизводимости и точности (табл. 2, 3). Установлено, что ошибка единичного определения при доверительной вероятности 0,95 не превышала ±4,52%.
Опыты с добавлением аскорбиновой кислоты показали отсутствие систематической ошибки.
Анализ образцов травы звездчатки средней с использованием разработанной методики показал, что
содержание аскорбиновой кислоты в сырье колебалось от 0,0388 до 0,0522%, витамина В1 – от 0,0102 до
0,0129% (табл. 4).
Выводы
1. Разработана ВЭЖХ-методика количественного
определения в траве звездчатки средней аскорбиновой кислоты и тиамина гидрохлорида.
Таблица 2
МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ
АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ И ТИАМИНА ГИДРОХЛОРИДА В ТРАВЕ ЗВЕЗДЧАТКИ СРЕДНЕЙ
F
X-
Sx-
P,%
T(p,f)
∆x-
ε±%
2,26
1,731
3,98
2,26
0,497
4,52
Аскорбиновая кислота
9
43,5
0,766
95
Тиамина гидрохлорид
9
22
11,0
0,220
95
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармацевтическая химия и фармакогнозия
Таблица 3
РЕЗУЛЬТАТЫ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ
В ТРАВЕ ЗВЕЗДЧАТКИ СРЕДНЕЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МЕТОДА ДОБАВОК
Найдено
аскорбиновой кислоты,
мг/100 г сырья
Добавлено
аскорбиновой
кислоты, мг
Должна быть найдена сумма
аскорбиновой кислоты,
мг/100 г сырья
Найдена сумма
аскорбиновой кислоты,
мг/100 г сырья
Относительная
ошибка, %
1
52,2
13,1
65,3
67,1
+2,7
2
43,5
21,8
65,3
64,6
-1,1
3
38,8
29,1
67,9
65,9
-2,5
4
40,4
40,4
80,8
81,9
+1,4
№
образца
Таблица 4
СОДЕРЖАНИЕ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ И ТИАМИНА ГИДРОХЛОРИДА В ТРАВЕ ЗВЕЗДЧАТКИ СРЕДНЕЙ
№
образца
Площади пиков
аскорбиновой кислоты
Содержание
аскорбиновой кислоты, %
Площади пиков
витамина В1
Содержание
витамина В1, %
1
116915
0,0522
36471
0,0110
2
97425
0,0435
38999
0,0118
3
89902
0,0388
33902
0,0102
4
90485
0,0404
42940
0,0129
2. Установлено что в траве звездчатки средней содержится аскорбиновой кислоты от 0,0388 до 0,0522%,
тиамина гидрохлорида от 0,0102 до 0,0129%.
химический состав, использование. Семейства Magnoliaceae –
Limoniaceae. – Л.: Наука. – 1985. – С. 214–216.
5. Сергунова Е.В. Исследования по стандартизации плодов
шиповника и лекарственных форм на его основе: Автореф. канд.
дисс. – М., 2002. – 24 с.
ЛИТЕРАТУРА
1. Государственная фармакопея СССР ХI издания, часть 2. – М.:
Медицина, 1990. – С. 294–297.
2. Пастушенков Л.В., Пастушенков А.Л. Лекарственные растения:
использование в народной медицине и быту. – Л.: Лениздат, 1990 –
384 с.
3. Попов Д.М., Никуличев Д.Б., Новиков Д.Ю. и др. Сравнительная
оценка фотоколориметрического и ВЭЖХ-методов определения
аскорбиновой кислоты в плодах шиповника // «Фармацевтический
анализ – наука и практика», научные труды НИИ фармации, т. ХХХ –
М.: – 1992, – С. 53–59.
4. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их
Фармация №4, 2012
SUMMARY
DETERMINATION OF VITAMINS IN CHICKWEED (STELLARIA MEDIA) HERB
D.M. Popov, PhD; A.V. Naumov
Research Institute of Pharmacy, I.M. Sechenov First Moscow State
Medical University
A high performance liquid chromatography procedure has been
developed to determine ascorbic acid and thiamine hydrochloride in
chickweed (Stellaria media) herb. There are data on the content of the
vitamins in the raw material
Key words: chickweed (Stellaria media), ascorbic acid, thiamine
hydrochloride, content, high performance liquid chromatography
23
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Организация и экономика
© Н.Д. Суюнов, 2012
УДК 615.12(575.1)
ПРОБЛЕМЫ ПОТРЕБЛЕНИЯ
ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ В УЗБЕКИСТАНЕ
И МЕТОДЫ ИХ РЕШЕНИЯ
Н.Д. Суюнов
Ташкентский фармацевтический институт, Узбекистан
E-mail: [email protected]
Рассматриваются методы, совершенствующие потребление
лекарственных препаратов в Узбекистане. Научно обоснована
необходимость внесения изменений и дополнений в «Сводный
прайс-лист лекарственных средств и изделий медицинского назначения» и предложена новая форма «Прайс-листа».
Ключевые слова: потребление лекарственных средств, перечень
лекарственных препаратов, прайс-лист.
В
последние годы в Республике Узбекистан наблюдается устойчивый социальноэкономический рост всех отраслей народного хозяйства, в том числе фармацевтической. В 2001–2010 гг.
показатель роста ассортимента лекарственных препаратов и медицинских изделий на фармацевтическом рынке нашей Республики составил 220,5%.
Только в 2010 г. освоено производство 32 наименований новых лекарственных препаратов, что на 23%
больше, чем в 2009 г. [1]. Сегодня в Узбекистане работает 115 фармацевтических предприятий, а в «Государственном реестре лекарственных средств и медицинских изделий» зарегистрировано 873 позиции
отечественных препаратов.
Социальное значение лекарственных препаратов
как товара определяется местом фармацевтического
рынка в социально-экономических отношениях. Изза недостаточной осведомленности населения в вопросах лекарственного обеспечения и слабой взаимосвязи между врачами, фармацевтами и больными
последние нередко становятся заложниками экономических отношений, возникающих между врачами
и лицами, занимающимися реализацией лекарственной продукции [5].
Фармацевтический рынок Узбекистана регулярно обновляется более эффективными лекарственными препаратами, растет число новых торговых
наименований. Производители и организации, занимающиеся реализацией лекарственных средств
(ЛС), увеличивают расходы на рекламу, что накладывается на стоимость лекарственных препаратов,
т.е. ложится бременем на потребителя. Себестои-
24
мость повышается также за счет заработной платы
высококвалифицированных служащих и использования в фармацевтических фирмах высокотехнологических процессов.
Студенты медицинских вузов изучают все данные, связанные с фармакотерапевтической группой,
международным названием, формой, дозой и потреблением ЛС, однако полной информацией обо всех
торговых названиях лекарственных препаратов врачи
не владеют, поскольку ассортимент их постоянно пополняется.
Еще одна проблема состоит в том, что назначаемые врачами лекарственные препараты с одинаковым международным непатентованным наименованием, но выпускаемые разными фирмами,
отличаются по торговым названиям и могут различаться по составу вспомогательных веществ, а это
может оказать побочное действие на организм больного. Такие ситуации нередко встречаются и в других государствах СНГ при амбулаторном и стационарном лечении больных [8, 9]. Возникновение
побочного действия при приеме лекарственного
препарата связано также с передозировкой лекарства, неадекватным выбором лекарственной формы и метода применения. Зная причины возможных
побочных эффектов, можно предупредить их возникновение и выбрать наиболее эффективные лекарственные препараты [10].
Сравнительный анализ цен на бронхолитические, глюкокортикостероидные и антиаллергические
лекарственные препараты [6, 7] в Узбекистане с учетом международного непатентованного наименования, лекарственной формы и дозы показал, что на
фармацевтическом рынке реализуются одинаковые
лекарственные препараты под разными торговыми
названиями, цены на которые отличаются до 6,8 раз.
В основном широко реализуются дорогостоящие лекарственные препараты. В этой связи возникает необходимость решения вопросов оптимизации закупки ЛС, препаратов и медицинских изделий, имеющих
разные цены на основе тендера.
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Организация и экономика
В целях наилучшего обеспечения лечебнопрофилактических учреждений (ЛПУ) ЛС Министерство здравоохранения Республики Узбекистан
раз в 2 года издает «Список основных лекарственных средств» [4] с изменениями и дополнениями, который включает полную информацию о фармакологической группе международных наименований
ЛС, формах и дозах. На его основе ЛПУ составляют
свой формулярный список и приобретают ЛС. Затем его представляют в Министерство здравоохранения, утверждают и за счет средств, выделяемых государством, составляют «Конкурентный прайс-лист»
о стоимости обращающихся на фармацевтическом
рынке лекарственных препаратов [3].
Перечень лекарственных препаратов, лекарственных веществ, медицинских изделий, диагностических средств Республики Узбекистан, которые производятся отечественными и зарубежными
производителями, включает их международные непатентованные и торговые названия, дозы и формы
выпуска, наименования фирм-производителей, названия их государств (табл. 1). Однако такой подход
не удовлетворяет требованиям потребителей (как населения, так и ЛПУ). Так, например, лекарственный
препарат с международным названием «Амброксол» № 10, 30 мг (таблетки), широко применяемый
при болезнях дыхательной системы, имеет 16 торговых названий. Форма и доза этого лекарства одинаковые, разными являются фирмы-производители и
цены, которые в суммовом эквиваленте дают разницу в 6214 сум. Имеет место разница цен не только на
ЛС, но и системы для вливания инфузионных растворов одноразового использования, шприцы инъекционные однократного применения, аллергены
для диагностики и лечения, а также на медицинские
изделия.
Мы предлагаем внести изменения и дополнения в «Сводный прайс-лист лекарственных средств
и изделий медицинского назначения» о торговой
наценке, цене. При формировании списка следует расположить наименования ЛС в последовательности по международному непатентованному
наименованию (табл. 2). Следует отдельно указывать лекарства, не имеющие аналогов (например,
по форме выпуска), которые реализуются по монопольным ценам фирмами-производителями. Определив ЛС этой группы, следует создать возможности
для регистрации дженериков. Узбекским фармацевтическим предприятиям целесообразно наладить
производство дженериков лекарственных препаратов, наиболее широко используемых в клинической
практике.
Создание прозрачности при покупке ЛС на тендерной основе необходимо для максимального эффективного использования государственных ресурсов, выделяемых правительством для закупки
лекарственных препаратов Министерству здравоохранения Республики Узбекистан. Только на этой
основе появится возможность поддержки отечественных фармацевтических предприятий.
Следует также регулярно пополнять в электронном варианте информацию о ЛС и препаратах, их
фармакологических группах, международных и торговых названиях, оптовых ценах и разнице в них
как на сайте Министерства здравоохранения, так и
в таких документах, как «Сводный прайс-лист лекарственных средств и изделий медицинского назначения» и «Реестр цен лекарственных средств
отечественных производителей Республики Узбекистан».
Есть еще одна проблема: лекарственные препараты в аптеках отпускаются как по рецепту, так и без
Таблица 1
ФРАГМЕНТ ДЕЙСТВУЮЩЕГО «СВОДНОГО ПРАЙС-ЛИСТА
ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ И ИЗДЕЛИЙ МЕДИЦИНСКОГО НАЗНАЧЕНИЯ»
Международное Наценка, Цена,
название
%
сум.
№
Торговое название
1
Алюмаг таб. № 30
Magnezium
hydroxide,
algedrate
0
1300
2
Алюмаг таб. № 30
Magnezium
hydroxide,
algedrate
5
1365
То же.
3
Амадей таб. 10 мг № 20
Amlodipine
6
7994
«–»
Astera
Ajanta Pharma
Индия
4
Амадей таб. 10 мг № 20
Amlodipine
14
8610
«–»
Malxam servis
Ajanta Pharma
Индия
5
Амбро таб. 30 мг № 20
Ambroxol
15
1858
«–»
Yana
Химфарм
Казахстан
6
Амбролан таб. 30 мг № 20
Ambroxol
16
2444
«–»
Malxam servis
Lannacher
Австрия
7
Амбролан таб. 30 мг № 20
Ambroxol
16
2444
«–»
MFS-servis
Lannacher
Австрия
8
Амбролан таб. 30 мг № 20
Ambroxol
10
2798
«–»
ATM partners
Lannacher
Австрия
Фармация №4, 2012
Примеч.
Поставщик
Производитель Государство
Реализовано Узб. Дори там. Jurabek Labor.
Узбекистан
ND
Jurabek Labor.
Pharmaceutical
Узбекистан
25
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Организация и экономика
Таблица 2
ФРАГМЕНТ ПРЕДЛАГАЕМОГО ВАРИАНТА «СВОДНОГО ПРАЙС-ЛИСТА
ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ И ИЗДЕЛИЙ МЕДИЦИНСКОГО НАЗНАЧЕНИЯ»
№
Международное
название
Торговое
название
Лекарственная форма,
форма выпуска
Наценка,
%
Цена,
сум
Разница
цен, сум
Поставщик
Фирма и странапроизводитель
Фармакотерапевтическая группа. Отхаркивающие средства R05CB02
1
Амброксол
Мукоброн
Таблетки
30 мг № 10
–
2880
–
Asklepiy
СП, ООО Jurabek
Laboratories,
Узбекистан
2
Амброксол
Бронхосол
Таблетки
30 мг № 10
–
2300
-580
Remedy
СП, ООО Remedy,
Узбекистан
10
7700
–
NAF
Boehringer
Ingelheim, Австрия;
Boehringer Ingelheim
Ellas AE, Греция
3
Амброксол
Лазолван
Таблетки
30 мг № 20
4
Амброксол
Флавамед
Таблетки от кашля
по 30 мг № 20
5
3630
-4070
Узб.
Дори там.
Berlin Chemie AG
(Menarini Group),
Германия
5
Амброксол
Мукоброн
Таблетки
30 мг № 30
5
3024
-4676
Jurabek
СП, ООО Jurabek
Laboratories,
Узбекистан
6
Амброксол
Амбробене
Таблетки
30 мг № 20
10
3003
-4697
NAF
Ratiopharm,
Германия
7
Амброксол
Амбросан
Таблетки
30 мг № 20
13
2954
-4746
АК
Дори-дармон
Pro Med CS
Praha a.s., Чехия
8
Амброксол
Мукоброн
Таблетки
30 мг № 20
–
2880
-4820
Jurabek
СП, ООО Jurabek
Laboratories,
Узбекистан
Примечание. Цены на момент проведения исследования. Центральный банк Республики Узбекистан с 6 мая 2010 г. установил следующие курсы иностранных валют к суму для ведения бухгалтерского учета, статистической и иной отчетности по валютным операциям,
а также исчисления таможенных и других обязательных платежей: 1 доллар США –1569,23 сумов, 1 евро – 2083,78 сумов, 1 российский
рубль – 53,83 сумов [2].
рецепта. Фармацевты отпускают лекарственный препарат с одинаковым международным названием, формой и дозой, но под разными торговыми названиями
на основании рецептов врачей. Предлагаемые изменения, внесенные в нормативные документы, могут
помочь фармацевтам и больным правильно выбрать
лекарственные препараты с одинаковой формой, дозой и международным названием, но с разным торговым названием, а также предоставить потребителям
всю информацию о лекарстве, что позволит им покупать наиболее доступные для них лекарственные препараты.
Вывод
Предложен вариант оптимальной организации выбора лекарственных средств и изделий медицинского назначения для аптек и лечебнопрофилактических учреждений.
ЛИТЕРАТУРА
1. Государственный реестр лекарственных средств и изделий
медицинского назначения. Изд. 14. – Ташкент, 2010. – 354 с.
2. Курсы иностранных валют к суму // Налоговые и таможенные
вести. 6 мая, 2010 г. – № 19 (823). – С. 3.
3. Сводный прайс лекарственных средств и изделий медицинского назначения, № 18/10, 5 мая 2010 г. – Ташкент, 2010 – 178 с.
26
4. Список основных лекарственных средств. Приказ
Министерства здравоохранения Республики Узбекистан № 230 от
24 июля 2009 г // Здравоохранение Узбекистана. – 2009. – 7 август. –
8 с.
5. Суюнов Н. Д. Фармацевтика бозорида маркетинг
тадкикотларининг назарий хамда услубий муаммолари //
Farmatsevtika jurnali. – 2006. – № 4. – Б. 3–9.
6. Суюнов Н.Д., Икрамова Г.М., Зайнутдинов Х.С. Анализ цен
бронхолитических препаратов на фармацевтическом рынке
Узбекистана // Фармация. – 2010, № 2. – С. 26–31.
7. Суюнов Н.Д., Икрамова Г.М. Глюкокортикоидные средства:
анализ розничных цен на фармацевтическом рынке Узбекистана //
Фармацевтический вестник Узбекистана. – 2009, № 2. – С. 11–16.
8. Суюнов Н.Д., Икрамова Г.М. Потребительские цены на
антиаллергические лекарственные средства под международными
названиями кетотифен, лоратадин и кромогликат натрия //
Медицинский журнал Узбекистана. – 2009, № 2. – С. 5–8.
9. Юнусходжаев А.Н., Шаисламов Б.Ш. О вопросе
взаимодействия лекарственных препаратов // Медицинский
журнал Узбекистана. – 2007Ю № 1. – С. 82–83.
10. Яковлева Л.В., Бездетко Н.В., Герасимова О.А.и др. Побочное
действие лекарств. – Харьков, 2008. – С. 5.
SUMMARY
THE PROBLEMS OF DRUG USE IN UZBEKISTAN AND THE METHODS OF
THEIR SOLUTION
N.D. Suyunov
Tashkent Pharmaceutical Institute, Uzbekistan
The methods to improve drug consumption in Uzbekistan are considered. The need to make changes and additions in the complete price
list of medicines and medical products has been scientifically grounded and a new price list form proposed.
Key words: drug consumption; list of medicines; price list.
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Организация и экономика
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.224.03:616.127=005.4].003.13
РЕЗУЛЬТАТЫ ПРИМЕНЕНИЯ МЕТОДА
ХРОНОТЕРАПИИ У БОЛЬНЫХ
С ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА
В УСЛОВИЯХ СТАЦИОНАРА
Ю.Р. Болсуновская1, Л.Б. Васькова1, канд. фарм. наук,
Р.М. Заславская2, докт. мед. наук, профессор
1
Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова
2
Городская клиническая больница № 60, Москва
E-mail: [email protected]
Показана эффективность применения в стационаре метода хронотерапии при терапии изосорбида мононитратом. Экономия
затрат на фармакотерапию на 1 пациента с ИБС составила 365,6 руб.
Ключевые слова: ишемическая болезнь сердца, хронотерапия,
фармакотерапия, фармакоэкономика, качество жизни.
ердечно-сосудистые заболевания являются одной из основных причин смертности
во всем мире. В Российской Федерации заболеваемость данной группой нозологий, по данным Демографического ежегодника России (2009), занимает
лидирующие позиции (см. таблицу). Наблюдается неуклонный рост числа заболеваемости системы
кровообращения, значительный процент приходится на ишемическую болезнь сердца. Продолжительность жизни в РФ почти на 12,5 лет меньше, чем в
таких европейских странах, как Великобритания,
Германия, Франция, Италия, в том числе и вследствие кардиологических заболеваний [8]. Высокий уровень заболеваемости приводит к значительному росту инвалидизации и смертности. Помимо
этого, в последние годы отмечается тенденция к
более ранней смертности от заболеваний сердечнососудистой системы. Большую актуальность приобретают социальный, демографический, экономический аспекты данного заболевания [10]. Длительное
нахождение больных в стационаре, проведение различных диагностических и лечебных мероприятий
при постоянном росте распространенности кардиологических заболеваний, в том числе ишемической
болезни сердца (ИБС), приводят к значительному
увеличению затрат системы здравоохранения и трат
самих больных [10]. Исходя из этого, необходимо
больше внимания уделять вопросам профилактики
сердечно-сосудистой патологии [5].
С
Фармация №4, 2012
Однако увеличение затрат без четкой схемы оптимизации, основанной на анализе клинической эффективности и экономической целесообразности медицинских вмешательств, может оказаться абсолютно
неэффективным [5]. А появление новых методов лечения и технологий приводит к неуклонному удорожанию медицинских услуг при ограниченном финансировании [6]. Кроме того, проблема относительной
ограниченности средств, выделяемых на здравоохранение, остается актуальной в большинстве экономически развитых стран [2, 12].
Улучшить результаты лечения больных с заболеваниями сердечно-сосудистой системы и повысить
качество жизни пациентов можно с помощью метода
хронотерапии. Хронобиология как новый подход к
проведению диагностики, терапии с учетом фактора
времени перспективна при заболеваниях сердечнососудистой системы [3, 9]. Нормальная жизнедеятельность людей на всех уровнях ее организации
носит периодический характер [4]. Неблагоприятные факторы внешней среды приводят к различным
повреждениям биологических ритмов организма и
развитию хронопатологии – десинхронозу, рассогласованию в работе систем жизнеобеспечения по
признаку временной организации. Эти изменения
и нарушения сопровождают практически все патологические процессы, десинхронизация приводит
к повреждению регуляции, а также отражается на
функциональном состоянии сердечно-сосудистой
системы [7].
Нами проводилась фармакоэкономическая оценка [1, 11] результатов лечения пациентов с ИБС в стационаре с использованием метода хронотерапии. Исследование проходило в несколько этапов на базе
кардиологических и терапевтических отделений.
На 1-м этапе исследования была сформирована основная группа из 40 пациентов (мужчин 60–75
27
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Организация и экономика
РАСПРЕДЕЛЕНИЕ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ НАСЕЛЕНИЯ (ТЫС. ЧЕЛ.)
ПО ОСНОВНЫМ КЛАССАМ, ГРУППАМ И ОТДЕЛЬНЫМ БОЛЕЗНЯМ В 2000, 2007–2008 гг.
Сравниваемые нозологии
Всего зарегистрировано
заболеваний
В том числе с диагнозом,
установленным впервые в жизни
2000
2007
2008
2000
2007
2008
Все болезни
191304,4
219459,7
221665,0
106327,8
109571,1
109590,0
В том числе болезни системы кровообращения
20088,7
30590,0
31301,7
2482,8
3719,4
3780,8
Из них:
• болезни, характеризующиеся
повышенным кровяным давлением
5035,6
10794,9
11394,3
434,8
990,3
979,0
5436,7
7155,2
7155,2
472,0
620,3
630,4
2120,1
3167,3
3164,9
140,6
221,7
231,3
160,4
161,8
161,3
160,4
161,8
161,3
• ишемическая болезнь сердца
Включая:
• стенокардию
• острый инфаркт миокарда
лет), находившихся на лечении в стационаре и проходивших лечение по стандартной схеме терапии для
пациентов с ИБС. Все больные были разделены на
2 клинико-статистические группы (КСГ), пациенты 1-й КСГ получали в качестве основной терапии
изосорбида динитрат, пациенты 2-й КСГ получали в качестве основной терапии изосорбида мононитрат. У всех пациентов имелась ИБС, стабильная
стенокардия II и III функционального класса, а также сопутствующие заболевания (суставов различной
этиологии, органов системы пищеварения, мочеполовой системы). Практически все пациенты имели артериальную гипертонию. В 1-й КСГ преобладали пациенты со II группой инвалидности, во 2-й
КСГ – с III группой инвалидности. В ходе работы
анализировали данные ЭКГ в 12 измерениях, общепринятые клинико-лабораторные исследования. До
и после лечения было проведено анкетирование пациентов на основе Ноттингемского опросника качества жизни. Данный опросник был выбран в связи
с тем, что на последующих этапах исследования необходимо было оценить и сравнить показатели сна
у данных пациентов. Кроме того, данный опросник
уже применялся ранее в исследованиях, в том числе
и на больных с ИБС.
Анализ клинико-экономических параметров показал, что средняя длительность госпитализации составила 19 койко-дней для обеих КСГ. Во 2-й КСГ
максимальная длительность госпитализации была
25 койко-дней, а в 1-й КСГ – 22 койко-дня. Для 1-й
КСГ сумма затрат на фармакотерапию основного и
сопутствующего заболевания составила 18492 руб.,
т.е. 924,6 руб. на 1 пациента, для 2-й КСГ – 23412 руб.,
т.е. около 1170,6 руб. на 1 пациента.
Для сравнения пролечили группу из 30 больных по методу хронотерапии. У всех больных имелась ИБС, стабильная стенокардия II и III функционального класса, а также ряд сопутствующих
заболеваний, в том числе артериальная гипертензия, хроническая ишемия головного мозга, забо-
28
левания органов системы пищеварения, опорнодвигательной системы. Больные были разделены
на 2 группы (3-я и 4-я КСГ) по 15 человек каждая.
3-я КСГ получала изосорбида динитрат по методу
хронотерапии, 4-я КСГ – изосорбида мононитрат
по методу хронотерапии. В работе использовались
данные ЭКГ в 12 измерениях, результаты мониторирования по Холтеру, а также показатели общепринятых клинико-лабораторных исследований.
До и после лечения было проведено анкетирование
пациентов на основе опросника SF-36. Опросник
SF-36 – неспецифический опросник по оценке качества жизни, содержит ряд вопросов по оценке физического и психологического состояния пациента,
в основе которых – его физическое функционирование, ролевая деятельность, болевые ощущения,
общее состояние здоровья, жизнеспособность, социальное функционирование, эмоциональное состояние и психическое здоровье.
В 3-й КСГ основным контингентом были женщины (60%), а в 4-й КСГ – мужчины (86,67%). При анализе социально-демографической структуры было
выявлено, что большинство пациентов имели II группу инвалидности, причем в 3-й КСГ их было 73,33%,
а в 4-й КСГ – 86,66%. Диагноз «артериальная гипертония» имели 100% пациентов обеих групп.
Средняя длительность госпитализации в 3-й
КСГ составила 18 койко-дней, при этом максимальная длительность госпитализации равнялась
25 дням. Для 4-й КСГ средняя длительность госпитализации составила 17 койко-дней, а наиболее продолжительный период госпитализации –
21 койко-день. На фармакотерапию пациентов 3-й
КСГ затрачено 14239,73 руб., т.е. около 949,3 руб. на
1 пациента, а в 4-й КСГ – 12075,95 руб., т.е. 805 руб.
на 1 пациента.
Анализ данных опросника SF-36, который использовался до и после лечения, выявил следующие результаты: для 3-й КСГ основные изменения
коснулись показателей болевых ощущений (Bodily
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Организация и экономика
pain) – с 55,2 баллов – до лечения до 70,3 – после
лечения; для 4-й КСГ этот показатель изменился с
52,9 баллов – до лечения до 72,9 баллов – после лечения. Для группы изосорбида динитрата (3-я КСГ)
такой показатель, как социальное функционирование (Social Functioning), менялся с 67,5 баллов до
73,3 баллов после лечения; для группы изосорбида
мононитрата (4-я КСГ) соответственно с 78,3 балла
– до лечения и 80,0 баллов – после лечения. Показатель психического здоровья в 3-й КСГ изменился
с 65,6 до 69,1, а в 4-й КСГ – от 59,0 – до лечения и
68,0 – после лечения. Таким образом, по результатам оценки качества жизни были установлены изменения практически по всем показателям из 8 шкал
опроса, при этом для 4-й КСГ выявлены большие
изменения по показателям «болевые ощущения» и
«психическое здоровье».
Таким образом, сравнительный анализ метода хронотерапии и классической терапии в лечении
больных с ИБС показал большую эффективность
применения изосорбида мононитрата по методу хронотерапии, в том числе с учетом изменений показателей качества жизни больных; при этом экономия затрат на фармакотерапию составила 365,6 руб.
Выводы
1. Выявлено снижение продолжительности
средней госпитализации у пациентов, лечившихся по методу хронотерапии (средняя длительность
госпитализации составила 18 койко-дней), по сравнению с пациентами, которых лечили по классической схеме (средняя длительность госпитализации
– 19 койко-дней).
2. Для пациентов, принимавших изосорбида мононитрат по методу хронотерапии, длительность госпитализации была меньше на 1 день по сравнению с
больными, получавшими изосорбида динитрат.
3. Затраты на 1 пациента при лечении изосорбида мононитратом по методу хронотерапии (805 руб.)
были меньше затрат при классической схеме лечения
этим же препаратом (1170,6 руб.); для групп больных,
получавших изосорбида динитрат, размер затрат был
примерно одинаков.
4. Наблюдались положительные результаты при
оценке качества жизни пациентов. Большие измене-
Фармация №4, 2012
ния были выявлены для группы пациентов, получавших изосорбида мононитрат, в том числе по таким
ключевым показателям, как «болевые ощущения» и
«психическое здоровье».
ЛИТЕРАТУРА
1. Васькова Л.Б., Мусина Н.З. Методы и методики
фармакоэкономических исследований // М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007.–
112 с.
2. Гиляревский С.P., Орлов В.А., Сычева Е.Ю. Экономичные»
стратегии лечения в кардиологии // Российский кардиологический
журнал.– 2002, № 6 – С. 5–15.
3. Заславская P.M., Халберг Ф., Ахметов К.Ж. Хронотерапия
артериальной гипертонии. – М.: Квартет, 1996.– 256 с.
4. Заславская Р.М. Хронодиагностика и хронотерапия
заболеваний сердечно-сосудистой системы. – М.: Медицина,
1991.– 320 с.
5. Петров В.И., Сабанов А.В., Недогода С.В. Основные аспекты
фармакоэкономических исследований в России // Лекарственный
вестник. –2005, № 3. – С. 11–13.
6. Проект отраслевого стандарта «Фармакоэкономические
исследования. Общие положения» (Воробьев П.А. и др.) //
Проблемы стандартизации в здравоохранении. – 2000, № 4. –
С. 42–54.
7. Стресс, хрономедицинские аспекты / Под ред. Л.Г.
Хетагуровой. – Владикавказ: Проект-Пресс, 2010. – 192 с.
8. Улумбекова Г.Э. Здравоохранение России. Что надо делать.
Научное обоснование концепции «Стратегия развития
здравоохранения РФ до 2020 года». Краткая версия. – М.: ГЭОТАРМедиа, – 2010.– 96 с.
9. Хетагурова Л.Г., Беляев С.Д. Хронотерапия больных
гипертонической болезнью в амбулаторных поликлинических
условиях: Методические рекомендации. – Владикавказ,
2003. – 39 с.
10. Шумилин В.В. Социально-гигиенические аспекты
формирования заболеваемости и развитие специализированной
помощи больным ишемической болезнью сердца: Автореф. дис. …
канд. фарм. наук. – М., 2007.– 22 с.
11. Ягудина Р.И., Куликов А.Ю. Фармакоэкономика: общие
сведения, методы исследования // Новая аптека. Эффективное
управление. – 2007, № 9 – С. 73–78.
12. Junsson В. Measurement of health outcome and associated
costsincardiovasculardisease // Eur Heart.J. – 1996., № 17(Suppl.A) –
Р. 2–7.
SUMMARY
CHRONOTHERAPY RESULTS IN PATIENTS WITH CORONARY HEART
DISEASE IN A HOSPITAL SETTING
Yu.R. Bolsunovskay1; L.B. Vaskova, PhD1; Professor R.M. Zaslavskaya,
MD2
1
I.M. Sechenov First Moscow State Medical University
2
City Clinical Hospital Sixty, Moscow
Chronotherapy was shown to be effective during therapy with
Monocinque in a hospital setting. The cost savings associated with
the pharmacotherapy per patient with coronary heart disease were
365.6 rbl.
Key words: coronary heart disease, chronotherapy, pharmacotherapy, pharmacoeconomics, quality of life.
29
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Технология лекарственных средств
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.252.349.7:615.453.43].032.35.012
РАЗРАБОТКА ЖЕЛАТИНОВЫХ
РЕКТАЛЬНЫХ КАПСУЛ С МЕТФОРМИНОМ
С.И. Провоторова1, Э.Ф. Степанова2, докт. фарм. наук, профессор,
М.А. Веретенникова1, М.В. Кирякина1
1
Воронежский государственный университет
2
Пятигорская государственная фармацевтическая академия
E-mail: [email protected]
Представлена поэтапная разработка оригинальной лекарственной формы – желатиновых ректальных капсул с метформином,
с учетом выбора составов желатиновых и инкапсулируемых масс.
Полученная лекарственная форма отвечает требованиям
Государственной фармакопеи XI издания
Ключевые слова: метформин, желатиновые ректальные капсулы,
сахарный диабет типа 2.
Л
екарственным препаратом выбора для профилактики и лечения сахарного диабета (СД)
типа 2, согласно рекомендациям IDF и ADA, является метформин [4,5]. Его назначают перорально в виде
таблеток и капсул. Однако в некоторых случаях пероральное введение нежелательно из-за побочных
явлений со стороны желудочно-кишечного тракта
(ЖКТ) – тошноты и нарушения процесса глотания.
Тошнота при приеме конкретно метформина и большой размер таблетки (500, 850 и 1000 мг) не всегда
позволяют пациентам делать выбор в пользу данного
лекарственного средства.
В связи с этим назрела необходимость разработки
лекарственных форм, имеющих другой путь введения
метформина. Интерес представляет такая лекарственная форма, как «желатиновые ректальные капсулы»
(ЖРК). Их преимущество заключается в том, что лекарственное вещество поступает непосредственно в
большой круг кровообращения, отсутствуют проблемы запаха, вкуса, глотания, что особенно важно для
гериатрических больных. Кроме того, метформин характеризуется снижением уровня аллергических реакций в ответ на его введение и уменьшением побочных
явлений, удобством самостоятельного применения,
достаточной комфортностью применения.
Цель данного исследования – разработка оптимальных составов желатиновых и инкапсулируемых
масс для получения ЖРК с метформином.
Экспериментальная часть
Качество ЖРК зависит от свойств желатиновой
массы. Для определения оптимальных параметров на
30
1-м этапе были проведены экспериментальные исследования реологических свойств желатиновых масс
с различными модифицирующими добавками. Измерения проводились на вискозиметре «Реотест-2» по
показателям «динамическая вязкость» и «напряжение
сдвига при температуре 45°С». Результаты исследований [3] показали, что присутствие натрия альгината в
незначительных количествах способно образовывать
вязкие, стабильные гели, ускорять процесс гелеобразования и придавать желатиновой массе большую
прочность. Готовили ЖРК методом макания. Капсулы были прозрачными без пузырьков воздуха и механических включений.
2-й этап был связан с выбором оптимального
состава инкапсулируемой массы. В качестве дисперсионной среды использовали жирные масла
растительного происхождения (подсолнечное, персиковое и льняное), а выбор введения в лекарственную форму вспомогательных веществ осуществляли
на основе технологического приема пролонгации,
который заключался в суспендировании растворимых веществ с повышением вязкости дисперсионной среды за счет добавления натрия альгината, аэросила, поливинилового спирта. Высвобождение
метформина из инкапсулируемой массы изучали
методом равновесного диализа через лецитиновую
мембрану в водную среду [2]. Пробы отбирали через 30, 60, 90 и 120 мин. Количественное содержание метформина в диализате определяли спектрофотометрическим методом, измеряя оптическую
плотность в его максимуме при длине волны 233 нм.
Все указанные масла не препятствовали высвобождению метформина в диализат. Скорость и полнота
высвобождения достигали максимума при использовании льняного масла с введением натрия альгината (см. рисунок).
3-й этап связан с оценкой качества полученных
ЖРК с метформином в соответствии с требованиями
Государственной фармакопеи XI издания (ГФ X ) [1].
В связи с этим особенно важны механические характеристики (табл. 1).
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Технология лекарственных средств
Выводы
1. Разработана оригинальная
ректальная лекарственная форма
для метформина – желатиновые
ректальные капсулы, которая соответствует требованиям ГФ XI.
2. Исследован и обоснован
состав инкапсулируемой массы с
учетом высвобождения метформина в диализную среду через лецитиновую мембрану.
3. Разработана спектрофотометрическая методика количественного определения метформина в ЖРК. Результаты
УФ-спектрофотометрии: содержание метформина в лекарственной
форме составило 0,474 ±0,009.
120
100
Концентрация, %
Количественное
определение метформина в ЖРК проводили спектрофотометрическим
методом в УФ-области. Оптическую плотность исследуемого раствора, приготовленного из
точной навески 20 гомогенизированных капсул метформина, измеряли на СФ-2000-02 при максимуме поглощения 233±2 нм в
кювете с толщиной слоя 10 мм. В
качестве стандартного образца использовали субстанцию метформина, отвечающую требованиям
ФС. В качестве раствора сравнения применяли воду очищенную. Полученные результаты количественного определения были
обработаны статистически. Содержание метформина в лекарственной форме составило
0,474±0,009%, ошибка определения не превышала ±1,98% (табл. 2).
80
60
40
20
0
30
60
90
120
150
180
210
Время, мин
240
270
300
330
Профиль высвобождения метформина из инкапсулируемой
массы льняного масла с натрия альгинатом
Таблица 1
МЕХАНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
ЖЕЛАТИНОВЫХ РЕКТАЛЬНЫХ КАПСУЛ С МЕТФОРМИНОМ
Значение показателя
Показатель
фактическое
нормируемое по ГФ XI
Средняя масса капсул с содержимым, г
1,60±0,07
±10%
Средняя масса содержимого капсул, г
1,00±0,03
±10%
9±1
Не более 20
Распадаемость капсул, мин
Таблица 2
МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ МЕТОДИКИ
КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТФОРМИНА
В ЖЕЛАТИНОВЫХ РЕКТАЛЬНЫХ КАПСУЛАХ
Оптическая плотность
при 233 нм
Содержание метформина
в ЖРК, г
Метрологические
характеристики
0,9924
0,72
0,4650
0,9908
0,72
0,4658
0,9076
0,75
0,4848
1,0080
0,76
0,4648
0,9914
0,76
0,4914
X = 0,474
S2 = 0,00013
S = 0,011
Sx =0,0049
А = 0,474 ± 0,009
ε = 4,2%
εˉ =1,98%
Навеска, г
ЛИТЕРАТУРА
SUMMARY
1. Государственная фармакопея СССР, XI издание, вып. 2. – М.:
Медицина, 1990. – 400 с.
2. Кайшева Н.Ш., Москаленко С.В. Способ получения моделей
биологических мембран: Патент 2202835 РФ, МКИ 7G 09В23/28
В01D71/00. – №2001121388/14; заявл. 30.07.01; опубл. 20.04.03 //
Бюллетень. – 2003, № 11.– 12с.
3. Провоторова С.И., Степанова Э.Ф., Кирякина М.В. Возможности
использования метформина в виде современных лекарственных
форм: желатиновых ректальных капсул //Фундаментальные
исследования. – 2011, № 7. – С. 235–237.
4. Diabetes Prevention Program Research Group // N. Engl. J. Med. –
2002; 346: 393–403.
5. Global Guideline for tepe 2 Diabetes // International Diabetes
Federation, 2005. – Р. 35–36.
DESIGN OF GELATIN RECTAL CAPSULES CONTAINING METFORMIN
S.I. Provotorova1; Professor E.F. Stepanova, PhD2; M.A. Veretennikova1;
M.V. Kiryakina1
1
Voronezh State University
2
Pyatigorsk State Pharmaceutical Academy
The paper presents the stepwise design of the original formulation –
gelatin rectal capsules containing metformin with regard to the choice
of the compositions of gelatin and encapsulated masses. The resultant
dosage form complies with the requirements of the State
Pharmacopoeia, XI edition.
Key words: metformin, gelatin rectal capsules, type 2 diabetes mellitus.
Фармация №4, 2012
31
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Технология лекарственных средств
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.322:582.772.3].014.2
ИЗУЧЕНИЕ СТАДИИ ЭКСТРАГИРОВАНИЯ
ПРИ ПОЛУЧЕНИИ СУХОГО ЭКСТРАКТА
КАШТАНА КОНСКОГО
Н.А. Постоюк1, А.А. Маркарян1, докт. фарм. наук,
Т.Д. Даргаева2, докт. фарм. наук, Т.А. Сокольская2, докт. фарм. наук
1
Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова
2
Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных
и ароматических растений (ВИЛАР), Москва
E-mail: [email protected]
Экспериментально подобраны основные управляющие факторы
экстрагирования при получении сухого экстракта, влияющие на
выход биологически активных веществ: тип и концентрация экстрагента, соотношение экстрагент – сырье, степень измельчения
сырья, продолжительность и кратность экстракций.
Ключевые слова: каштан конский обыкновенный, сухой экстракт,
экстрагирование, факторы.
тельного сырья. Совершенствование и интенсификация производства с целью повышения выхода целевого продукта требуют детального рассмотрения
различных факторов, влияющих на процесс экстрагирования [2, 3].
Цель настоящей работы – изучение влияния различных фактoров на процесс экстрагирования при
получении сухого экстракта каштана конского обыкновенного.
дной из серьезных задач здравоохранения остается профилактика и лечение хроЭкспериментальная часть
нической венозной недостаточности. Несмотря на
Оценку влияния природы экстрагента, его соотто, что арсенал современных венотонизирующих ношения с сырьем, степени измельчения сырья, просредств достаточно широк, создание новых эффек- должительности и кратности экстракций на выход
тивных препаратов из растительного сырья весьма биологически активных веществ (БАВ) из листьев
актуально [1, 5].
каштана конского проводили по показателям «содерПри венозном застое и расширении вен нижних жание экстрактивных веществ» и «содержание сумконечностей в качестве венотонизирующего и ан- мы флавоноидов в пересчете на рутин». Выбор экстртитромбогенного средства применяются препара- агента осуществляли варьированием растворителей
ты, получаемые из семян и листьев каштана конско- (вода и спирт этиловый различной концентрации)
го обыкновенного (Aesculus hippocastsnum L). Сырье путем настаивания растительного сырья при комнатвключено в фармакопеи Франции, Германии, Испа- ной температуре на водяной бане с обратным холонии, Португалии. В России листья каштана конско- дильником в течение 2 ч.
го используются для извлечения
флавоноидов, которые вместе с
Таблица 1
эсцином входят в препарат «ЭсВЛИЯНИЕ ЭКСТРАГЕНТА НА ВЫХОД ЭКСТРАКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
флазид». Кроме того, известно,
И СУММЫ ФЛАВОНОИДОВ ИЗ ЛИСТЬЕВ КАШТАНА КОНСКОГО
что листья каштана богаты кумаринами и тритерпеновыми саСодержание в экстракте, %
Выход флавоноидов
понинами. Поэтому они могут
Экстрагент
от содержания
экстрактивных
суммы
служить источником получения
в сырье, %
веществ
флавоноидов
суммарных препаратов, наприВода
20,18
0,19
35,18
мер сухого экстракта [4].
При изготовлении сухо50% спирт этиловый
23,56
0,53
98,15
го экстракта из листьев каштана
60% спирт этиловый
22,89
0,49
90,74
конского обыкновенного основ70 % спирт этиловый
22,16
0,41
75,92
ной технологической операцией
80% спирт этиловый
21,19
0,32
59,25
является экстрагирование расти-
О
32
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Технология лекарственных средств
Таблица 2
ДАННЫЕ КИНЕТИКИ ЭКСТРАКЦИИ БАВ ИЗ ЛИСТЬЕВ КАШТАНА КОНСКОГО
Содержание экстрактивных веществ в экстракте, %
Выход флавоноидов от содержания в сырье, %
контакты
контакты
Время
экстракции
I
II
III
I
II
III
30 мин
15,48
5,12
1,99
19,89
4,14
0,01
1ч
15,98
5,02
2,00
37,0
8,95
0,06
1,5 ч
16,67
4,23
2,10
62,54
13,33
1,13
2ч
17,25
3,75
2,11
79,67
15,03
2,3
2,5 ч
17,14
3,59
2,27
78,98
15,82
2,18
3ч
17,15
3,58
2,28
79,62
15,21
2,17
Примечание. Соотношение масса сырья – экстрагент (50% спирт этиловый) 1:5, размер частиц сырья – 2 мм.
Технология получения сухого экстракта включала следующие стадии: экстрагирование сырья, фильтрация, упаривание спиртового извлечения, сушка и
измельчение.
Сырье экстрагировали в бункере универсальной
мельницы. Фильтровали под вакуумом через слой
гигроскопической ваты, находящийся между двумя листами фильтровальной бумаги, помещенной
на перфорированную пластинку воронки Бюхнера.
Полученный экстракт упаривали при температуре
реакционной массы 60±5°С и давлении 0,09МПа
(0,9 кгс/см2) приблизительно до 1/16 первоначального объема. Для снижения вспенивания после удаления этилового спирта в конце упаривания добавляли спирт бутиловый. Далее экстракт сушили
в вакуумном сушильном шкафу при температуре
60±5°С и oстаточном давлении 0,1кгс/см2. Удаление влаги происходило с помощью вакуума при нагревании водного экстракта в мягких условиях. Полученный твердый остаток высушенного экстракта
измельчали при помощи ступки и пестика и просеивали через капроновое сито. На всех стадиях технологического процесса осуществляли контроль
содержания суммы фенольных соединений в пересчете на рутин.
Согласно полученным данным, лучшим экстрагентом являлся 50% спирт этиловый (табл.1), обеспечивающий выход в экстракт 23,56% экстрактивных
веществ и переход 98% (от содержащейся в сырье)
суммы флавоноидов. По результатам изучения кинетики экстракции выявлены оптимальные условия:
время – 2 ч, кратность экстракции – 3 (табл. 2). При
1-м контакте в извлечение переходит 79±5% флавоноидов, при 2-м – 15% и при 3-м контакте – 2–3%.
Таким образом, трехкратная экстракция обеспечивала истощение сырья на 97%. Опытным путем установлено, что оптимальное соотношение фаз сырье
– экстрагент составляло 1:5. Частицы сырья целесообразно измельчать до 2 мм.
Фармация №4, 2012
Полученный сухой экстракт листьев каштана
конского представлял собой аморфный гигроскопичный, комкующийся порошок от светло-коричневого
до коричневого цвета со специфическим запахом.
Насыпная масса экстракта при свободном падении
– 0,48 г/см3, при уплотнении – 0,76 г/см3, сыпучесть
– 1,90 г/с, угол естественного откоса – 35–37°. Потеря в массе при высушивании, согласно требованиям Государственной фармакопеи XI издания, не превышала 5%.
Вывод
Установлены оптимальные параметры экстрагирования при получении сухого экстракта каштана конского обыкновенного, позволяющие извлечь максимальное количество биологически активных веществ.
ЛИТЕРАТУРА
1. Берган Дж.Дж. Хроническая венозная недостаточность //
Ангиология и сосудистая хирургия. – 1995, № 3. – С. 597.
2. Давыдова В.Н. Современные технологии получения сухих
экстрактов и их ассортимент // Новая аптека.Эффективное
управление. – 2002, № 4.– С. 67–71.
3. Жукова О.Л., Маркарян А.А., Дубинская В.А. и др.
Технологические и физические свойства сухого экстракта их
лекарственного растительного сырья // Химическая технология. –
2007, № 3. – С. 140–143.
4. Попова Н.В., Литвиненко В.И. Лекарственные растения мировой
флоры // Харьков: СПДФЛ, 2008. – С. 188–189.
5. Яблоков Е.Г., Кириенко А.И., Богачев В.Ю. Хроническая венозная
недостаточность // М.: Берег, 1999. – 128 c.
SUMMARY
STUDY OF AN EXTRACTION STAGE IN THE PREPARATION OF DRY HORSE
CHESTNUT (AESCULUS hippocastanum L.) EXTRACT
N.A. Postoyuk1; A.A. MarkaryanPhD1; T.D. Dargayeva, PhD2, T.A.
Sokolskaya, PhD2
1
I.M. Sechenov First Moscow State Medical University
2
All-Russian Research Institute of Medicinal and Aromatic Plants
(VILAR), Moscow
The major controlling factors for extraction, such as extractant type
and concentration, extractant-raw material weight ratio, the degree of
grinded raw material, and the duration and frequency of extractions,
have been experimentally chosen to prepare a dry extract.
Key words: common horse chestnut (Aesculus hippocastanum L.),
dry extract, extraction, factors.
33
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармакология: эксперимент и клиника
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.31:547.972.2].03:616.379=008.64=092.9].015.4
ВЛИЯНИЕ ФЛАВОНОИДОВ НА ОСНОВНЫЕ ПАРАМЕТРЫ
ГЕМОСТАЗА КРОВИ И АНТИТРОМБОТИЧЕСКУЮ
ФУНКЦИЮ ЭНДОТЕЛИЯ ПРИ САХАРНОМ ДИАБЕТЕ
И.Н. Тюренков1, докт. мед. наук, профессор, А.В. Воронков1, канд. мед. наук,
А.А. Слиецанс1, канд. фарм. наук, Э.Т. Оганесян2, докт. фарм. наук, профессор
1
Волгоградский государственный медицинский университет
2
Пятигорская государственная фармацевтическая академия
E-mail: [email protected]
Изучено влияние флавоноидов кверцетина, флавицина, диосмина
и гесперидина на основные показатели гемостаза и антитромботическую функцию эндотелия при экспериментальном сахарном
диабете. Указанные флавоноиды способствуют восстановлению
антитромбогенного потенциала эндотелия. Наиболее выраженное
положительное влияние на антитромботическую функцию эндотелия оказал флавицин.
Ключевые слова: эндотелиальная дисфункция, экспериментальный
сахарный диабет, флавоноиды.
о современным научным представлениям,
в основе сердечно-сосудистых осложнений
многих заболеваний, в том числе и ассоциированных
с сахарным диабетом, лежит развитие эндотелиальной
дисфункции. Поражение эндотелия при сахарном диабете в значительной степени обусловлено активацией
перекисного окисления липидов. При сахарном диабете наблюдаются такие изменения, как обнажение субэндотелиальных слоев, что способствует адгезии форменных элементов крови и тромбоцитов к интиме сосуда,
нарушения в системе синтеза оксида азота, который является ключевой молекулой, участвующей в работе всех
функций эндотелия, что, в свою очередь, запускает реакции повышенной агрегации, свертывания, увеличения вязкостных характеристик крови, вызывает спазм
сосуда. Таким образом, при продолжительном повреждении эндотелия на фоне сахарного диабета наблюдается переключение активности эндотелия на синтез агрегантов, тромбогенных факторов, вазоконстрикторов,
оксидантов, что приводит к развитию и прогрессированию сосудистых осложнений сахарного диабета [2, 3].
Известно, что флавоноидные соединения способны воздействовать на систему синтеза и выделения
оксида азота, нормализуя работу NO-синтаз. Кроме
того, было отмечено положительное влияние флавоноидов на реологические параметры крови [5].
Цель исследования – изучение влияния флавоноидов на антитромботическую функцию эндотелия и
основные показатели гемостаза крови.
П
34
Экспериментальная часть
Исследование было выполнено на 90 крысахсамцах линии Wistar, полученных из питомника лабораторных животных «Столбовая» РАМН (Московская
обл.). Изучали следующие соединения: кверцетин,
флавицин, гесперидин и диосмин (100 мг/кг, per os),
выделенные из растительного сырья на кафедре органической химии Пятигорской государственной фармацевтической академии под руководством проф.
Э.Т. Оганесяна.
Эндотелиальная дисфункция на всех этапах исследования моделировалась экспериментальным
сахарным диабетом (ЭСД), индуцированным внутримышечным однократным введением стрептозотоцина (в дозе 45 мг/кг) [4]. Показатели вязкости крови
изучали на анализаторе крови реологическом АКР-2,
показатели агрегации тромбоцитов – на двухканальном лазерном анализаторе агрегации тромбоцитов по
методу G. Born (1962) в модификации З.А. Габбасова
(1989). Тромбиновое время (ТВ), протромбиновое время
(ПВ), активированное частичное тромбопластиновое
время (АЧТВ) и содержание фибриногена определяли
хронометрически на анализаторе показателей гемостаза АПГ2-01 с использованием наборов НПО «Ренам». Определение фактора Виллебранда проводили
на двухканальном лазерном анализаторе агрегации
тромбоцитов.
Статистическую обработку результатов после проверки массива данных на нормальность распределения
осуществляли с использованием параметрического
t-критерия Стьюдента, критерия Крускалл–Уоллиса,
непараметрического U-критерия Манна–Уитни (для
независимых выборок), а обработку данных – с помощью пакетов программ Microsoft Excel XP, BioStat
2008 5.2.5.0.
У животных с ЭСД наблюдались нарушения как
со стороны коагуляционного (плазменного) гемостаза, так и со стороны сосудисто-тромбоцитарного.
Антикоагулянтный и антитромбогенный потенциал сосудистого эндотелия смещался в сторо-
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармакология: эксперимент и клиника
Индекс дезагрегации тромбоцитов
пе
р
ми
н
Э
С
Д+
Ге
с
Д+
Э
С
Ди
ос
ид
ин
ти
н
ве
р
К
С
Э
С
Э
Д+
Д+
С
Э
це
ви
ци
н
Д
Ф
ла
И
нт
а
кт
.
Усл. ед.
ми
н
Д+
Ге
с
*
Э
С
Д+
Д+
С
Э
Ди
ос
ид
ин
пе
р
це
ве
р
К
Ф
ла
Д+
С
Э
ти
н
ви
ци
н
Д
С
Э
нт
а
И
#
С
#
#
1
0,9
0,8
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
Э
**
кт
.
Усл. ед.
Индекс агрегации тромбоцитов
20
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0
Примечание. Здесь и на рис. 2, табл. 1,2: ЭСД – группа животных с экспериментальным сахарным диабетом без лечения;
контроль-интакт – интактная группа животных; ЭСД+ – группа животных, которым вводили флавицин; кверцетин; диосмин; гесперидин; * – достоверно по отношению к группе интактных животных (р≤0,05); ** – достоверно по отношению к
группе интактных животных (р≤0,01); ≠ – достоверно по отношению к группе животных с ЭСД (р≤0,05); ≠≠ – достоверно
по отношению к группе животных с ЭСД (р≤0,01).
Рис. 1. Влияние флавоноидов на показатели агрегатограммы у животных с ЭСД
ну повышения показателей агрегации тромбоцитов (повышение индекса агрегации тромбоцитов
на 107%, снижение индекса дезагрегации тромбоцитов на 45,9%), укорочения тромбинового и протромбинового (на 24,5 и 23,2% соответственно), а
также активированного частичного тромбопластинового времени (на 20,7%), повышения уровня фибриногена на 128%. Полученные результаты позволяют судить о выраженных изменениях в системе
гемостаза при экспериментальном сахарном диабете, свидетельствующих о развитии эндотелиальной
дисфункции, что согласуется с данными литературы [2, 3, 6].
У животных с ЭСД, получавших флавоноиды,
в большей степени флавицин и кверцетин, наблюдалось выраженное улучшение показателей АДФиндуцированной агрегации тромбоцитов (рис. 1). Так,
флавоноидные соединения снижали индекс агрегации тромбоцитов на 31,95% (флавицин) и на 22,92%
(кверцетин), а также повышали индекс дезагрегации
тромбоцитов на 61,7% (флавицин) и на 53,19% (кверцетин).
Под влиянием исследуемых флавоноидов наблюдалось удлинение АЧТВ, ТВ, ПВ, снижение уровня
фибриногена по сравнению с группой с ЭСД (табл.
1). Полученные данные свидетельствовали о частичном восстановлении функционирования системы
плазменного гемостаза (внутреннего и внешнего каскада свертывания плазмы, образования сгустка фибрина на последней стадии свертывания крови).
Один из специфических маркеров развития эндотелиальной дисфункции – увеличение уровня фактора Виллебранда. При ЭСД происходило повышение
уровня фактора Виллебранда в крови в 1,72 раза, что
свидетельствовало о нарушениях в системе гемостаза и реализации антитромботической функции эндотелия. После курса введения изучаемых флавоноидов
снижался данный показатель (рис. 2). По результатам
проведенных тестов наиболее выраженное эндотелиопротективное действие наблюдалось у флавицина,
снижавшего изучаемый параметр на 29,19% по сравнению с негативным контролем (ЭСД).
Внутрисосудистый компонент микроциркуляции
определяет такой важным фактор, как реологические
Таблица 1
ВЛИЯНИЕ ФЛАВОНОИДОВ НА ПРОТРОМБИНОВОЕ,
ТРОМБИНОВОЕ ВРЕМЯ, АЧТВ, УРОВЕНЬ ФИБРИНОГЕНА У ЖИВОТНЫХ С ЭСД
Группы
Фибриноген, г/л
Протромбиновое время (ПВ), с
Тромбиновое время (ТВ), с
АЧТВ, с
Интакт.
1,79±0,07
24,15±1,01
26,45±0,39
37,05±1,05
ЭСД
4,09±0,42**
18,54±0,64**
19,95±0,53*
26,03±2,12*
ЭСД+Флавицин
2,5±0,17≠≠
22,63±0,79≠
23,61±1,01≠
35,28±1,57≠
ЭСД+Кверцетин
3,00±0,13≠≠
22,05±1,01≠
24,01±1,27≠
30,77±2,15
ЭСД+Гесперидин
3,24±0,14≠≠
20,37±0,88
22,47±0,67
30,08±2,31
ЭСД+Диосмин
3,46±0,31≠
20,0±1,11
21,44±0,59
29,57±1,87
Фармация №4, 2012
35
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармакология: эксперимент и клиника
свойства крови, прежде всего ее вязкость. От количественного и качественного состава эритроцитов почти полностью зависит величина вязкости крови. На
сегодняшний день доказано, что оксид азота может
оказывать регуляторный эффект на дефорабельность
и агрегацию эритроцитов, причем чем больше угнетена NO, тем соответственно, выше вязкость крови,
особенно при низких скоростях, свидетельствующих
о патологических процессах, происходящих в микроциркуляторном русле [1]. Таким образом, повышение
вязкости крови у животных с ЭСД по сравнению с таковым показателем у интактных животных во всем
диапазоне скоростей сдвига (табл. 2) свидетельствовало не только о комплексных нарушениях со стороны системы гемостаза, повышении агрегации эритроцитов, но и о развитии эндотелиальной дисфункции,
что согласуется с данными других авторов [1].
На фоне введения исследуемых соединений вязкость крови, особенно при низких скоростях сдвига, а также индекс агрегации эритроцитов снижались.
Наиболее выраженно влияли на изучаемые показатели флавицин и кверцетин (см. табл. 2). Благоприятное влияние флавоноидов на антитромботическую
функцию эндотелия связано с нормализацией баланса тромбогенных и атромбогенных факторов, влиянием на маркеры эндотелиальной дисфункции, а также, по мнению ряда авторов, с повышением синтеза
оксида азота, обладающего антиагрегационной активностью [5].
Вывод
Установлено, что все флавоноиды повышают антитромботическую функцию эндотелия и нормализуют баланс гемостаза крови при сахарном диабете.
Необходимо отметить наиболее выраженное влияние на эти показатели при курсовом применении
флавицина.
ЛИТЕРАТУРА
1. Андронов Е.В., Киричук В.Ф., Иванова А.Н., Мамонтова Н.В. Роль
оксида азота в регуляции микроциркуляторного звена системы
гемостаза // Саратовский научно-медицинский журнал. – 2007, № 3
(17). – С. 39–44
2. Баркаган З.С., Момот А.П. Основы диагностики нарушений
гемостаза. – М.: Ньюдиамед, 2001. – С. 285.
3. Дисфункция эндотелия. Причины, механизмы,
фармакологическая коррекция / Под ред. Н.Н. Петрищева. – СПб.,
2003. – 184 с.
4. Писарев В.Б., Спасов А.А., Буланов А.Е. и др. Механизмы
токсического действия стрептозотоцина на бета-клетки островков
лангерганса // Бюллетень экспериментальной биологии и
медицины. – 2009, № 12. – С. 700–702.
5. Freedman J.E. Select flavonoids and whole juice from purple
grapes inhibit platelet function and enhance nitric oxide release //
Circulation. – 2002. – Vol. 103, № 23. – P. 2792–2798.
6. Maurin N. The role of platelets in atherosclerosis, diabetes mellitus,
and chronic kidney disease. An attempt at explaining the TREAT study
results // Med. Klin. – 2010. - Vol. 105, № 5. – Р. 339–344.
SUMMARY
Уровень фактора Виллебранда
Интакт.
ЭСД
**
ЭСД+Флавицин
##
ЭСД+Гесперидин
#
ЭСД+Диосмин
ЭСД+Кверцетин
#
0
20
40
60
80
%
100
120
140
160
Рис. 2. Влияние флавоноидов на уровень фактора Виллебранда у животных с ЭСД
EFFECT OF FLAVONOIDS ON MAJOR
HEMOSTATIC PARAMETERS AND ENDOTHELIAL
ANTIPLATELET FUNCTION IN DIABETES MELLITUS
Professor I.N. Tyurenkov, MD1; A.V.
Voronkov, MD1; A.A. Slietsans, PhD1; Professor
E.T. Oganesyan, PhD2
1
Volgograd State Medical University
2
Pyatigorsk State Pharmaceutical
Academy
The authors studied the effect of the flavonoids quercetin, flavicin, diosmin, and
hesperidin on major hemostatic parameters
and endothelial antiplatelet function in
experimental diabetes mellitus. Flavicin
proved to have the most marked effect on
endothelial antiplatelet function.
Key words: endothelial dysfunction,
experimental diabetes mellitus, flavonoids
Таблица 2
ВЛИЯНИЕ ФЛАВОНОИДОВ НА ВЯЗКОСТЬ КРОВИ И ИНДЕКС АГРЕГАЦИИ
ЭРИТРОЦИТОВ У ЖИВОТНЫХ С ЭСД ПРИ РАЗЛИЧНЫХ СКОРОСТЯХ СДВИГА
Скорость сдвига, сПз
100 с-1
50 с-1
10 с-1
Индекс агрегации
эритроцитов
3,42±0,17
4,60±0,31
5,84±0,13
7,61±0,15
2,23±0,11
4,20±0,13**
5,70±0,13*
8,52±0,17**
13,51±0,54**
3,22±0,08**
ЭСД+Флавицин
3,84±0,32
4,77±0,47
6,59±0,60≠
9,15±0,75≠
2,38±0,09≠
ЭСД+Кверцетин
3,93±0,20
5,19±0,37
6,85±0,62
11,14±1,04
2,83±0,12≠
Группы животных
Интакт.
ЭСД
300 с
-1
ЭСД+Гесперидин
4,14±0,23
5,34±0,13
7,19±0,36≠
12,01±0,43≠
2,90±0,17
ЭСД+Диосмин
3,82±0,44
4,95±0,37
7,65±0,50
11,38±0,50
2,98±0,12
36
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармакология: эксперимент и клиника
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.214.31.033.1
КИНЕТИКА МЕМАНТИНА В ПЛАЗМЕ КРОВИ
А.А. Карлицкая, Л.М. Красных, канд. биол. наук,
Н.Д. Бунятян, докт. фарм. наук, профессор, Г.Ф. Василенко, канд. биол. наук
Научный центр экспертизы средств медицинского
применения ЦКФ Минздравсоцразвития РФ, Москва
E-mail: [email protected]
Изучена фармакокинетика мемантина после однократного приема. Концентрация мемантина в крови определяется методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с массспектрометрическим детектированием. Установлено, что мемантин
медленно всасывается в желудочно-кишечном тракте.
Ключевые слова: меманейрин, мемантин, концентрация, плазма
крови, масс-спектрометрия.
настоящее время перспективными средствами лечения нарушений памяти, особенно
протекающих с нейродегенерацией, в том числе при
болезни Альцгеймера, являются вещества, реализующие свое действие через глутаматергическую систему,
которая, наряду с другими нейромедиаторными системами, вовлекается в медленно прогрессирующий
при этих заболеваниях нейродегенеративный процесс, характеризующийся дегенерацией нейронов
и межнейрональных синаптических связей [1, 7, 8].
Эти нейропатологические изменения сопровождаются ухудшением интегративной деятельности мозга и, прежде всего, процессов памяти, что сочетается со снижением способности выполнять жизненные
функции [2, 5].
Мемантин обладает нейропротекторной активностью и способностью улучшать процессы памяти. Мемантин – производное адамантана, который
применяется для лечения болезни Альцгеймера в
Европе с 2002 г., а в США – с 2004 г. Препарат – неконкурентный низкоаффинный антагонист, характеризуется низким сродством NMDA-рецепторов,
блокируя через эти рецепторы кальциевые токи.
Мемантин усиливает утилизацию глюкозы в мозге и
повышает уменьшенный при болезни Альцгеймера
метаболизм мозга. Он также усиливает выброс дофамина, обладает нейропротекторными свойствами и
ослабляет вызванную β-амилоидом нейродегенерацию нейронов [3].
Показано, что в сравнении с другими антагонистами NMDA (N-метил-D-аспартат)-рецептора, в
том числе и с теми, которые работают по сходному
механизму блокаторов канала (фенциклидин, кетамин, дизоциплин-МК-801), мемантин имеет значи-
В
Фармация №4, 2012
тельно лучшую переносимость и меньшую токсичность [4].
В настоящее время мемантин широко применяется для лечения нарушений памяти, прежде всего
при болезни Альцгеймера. На фоне приема мемантина у больных наблюдается значительное улучшение когнитивных функций, в том числе кратковременной и долговременной памяти, при этом по
сравнению с холинергическими препаратами мемантин имеет значительно меньше побочных эффектов [6].
Повышение эффективности и безопасности
лекарственной терапии возможно благодаря подробному изучению фармакокинетических и фармакологических показателей. Цель настоящего
исследования – определение концентраций мемантина в плазме крови и изучение фармакокинетики
препарата «Меманейрин» (действующее вещество –
мемантин) капли для приема внутрь (10 мг/мл).
Экспериментальная часть
Определение концентрации мемантина в
крови проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с массспектрометрическим детектированием. Анализировали пробы на жидкостном хроматографе «Agilent
1200». Разделение проводили на колонке Cosmosil
C18 (50×4,6 мм; 5 мкм) при температуре колонки 30°C. В качестве подвижной фазы использовали смесь ацетонитрила и 0,2% муравьиной кислоты
в соотношении 45:55. Скорость потока составляла
0,6 мл/мин. Объем вводимой пробы – 20 мкл. Детектор масс-спектрометрический (G 6140 A), квадруполь. Ионизация: MMES + APCI. Напряжение
на капилляре – 3000 В. Детектирование проводили
в SIM-режиме; m/z 180→107 и 236→163.
Для подготовки образцов крови использовали
жидкостную экстракцию с последующим концентрированием пробы. Для этого к 2 мл плазмы крови
добавляли 100 мкл 1M NaOH, встряхивали на Vortex
10 с, добавляли 4 мл диэтилового эфира и активно
встряхивали 10 мин. Центрифугировали 10 мин при
скорости 3000 об/мин, органический слой перено-
37
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармакология: эксперимент и клиника
14
Концентрация, нг/мл
12
10
8
6
4
2
0
0
20
40
60
Время, ч
80
100
Динамика усредненных концентраций мемантина в плазме
крови добровольцев после однократного приема в дозе 10 мг
сили в другие пробирки и упаривали под вакуумом,
сухой остаток растворяли в 100 мкл метанола и переносили в аналитические виалы. Далее пробы анализировали на хроматографе.
Основой для количественного определения (метод абсолютной калибровки) мемантина в плазме
крови служили калибровочные зависимости, для которых были проанализированы образцы плазмы крови с различной концентрацией определяемого вещества. Калибровочная зависимость в диапазоне
концентраций 1–25 нг/мл носила линейный характер.
В фармакокинетическом исследовании участвовали 18 здоровых добровольцев в возрасте 28–45 лет,
с массой тела 57–98 кг, ростом 158–186 см, без патологий желудочно-кишечного тракта, печени, почек, сердечно-сосудистой системы (предварительно
проведенные клинико-лабораторные и инструментальные исследования не выявили каких-либо заболеваний). В течение 14 дней до начала проведения
испытания добровольцы не принимали никаких лекарственных препаратов. Отбор проб крови осуществляли из кубитального катетера. Через 5–10 мин после установки катетера, натощак, до применения
препарата отбиралась исходная проба крови. Затем добровольцы принимали внутрь 10 мг препарата. Далее отбор крови проводился через 1, 1,5, 2, 3,
4, 5, 6, 8, 12, 24, 48, 72 и 96 ч после приема препарата. Пища предлагалась спустя 4 ч после приема препарата (стандартный обед). Кровь в количестве 5 мл
отбирали в стеклянные пробирки. Пробирки маркировали с указанием шифра испытуемого, номера пробы. Плазму отделяли центрифугированием и хранили
при температуре -35°C до проведения анализа. Промежуток времени между отбором крови и ее обработкой не превышал 5 мин.
Проведенные исследования показали, что
мемантин достаточно медленно всасывается в
38
120
желудочно-кишечном
тракте.
Максимальная
концентрация
достигается через 5 ч после приема препарата, после 6 ч происходит медленное экспоненциальное снижение концентрации
и через 96 ч еще обнаруживается 3,2 нг/мл препарата (см. рисунок). Средние значения концентрации мемантина статистически
достоверно не различались для
каждого момента времени (для
всех анализов результаты рассматривались как статистически
достоверные, если уровень значимости по критерию Фишера F
был ниже 0,05).
Выводы
1. Проведено фармакокинетическое изучение мемантина (капли для приема внутрь).
2. Установлено, что максимальная концентрация
мемантина в плазме крови после однократного приема препарата достигается через 5 ч.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бачурин С.О. Медико-химические подходы к направленному
поиску препаратов для лечения и предупреждения болезни
Альцгеймера//Вопросы медицинской химии. – 2001, № 2.
2. Воронина Т.А., Островская Р.У. Методические указания по
улучшению активности ноотропных веществ // Руководство по
экспериментальному (доклиническому) изучению
фармакологических веществ. – М., 2005. – С. 308–320.
3. Nabeshima T., Noda Y., Kamei H. Anti-dementia drugs for Alzheimer
disease in present and future // Yakurigaku Zasshi. – 2002. – Vol. 120, №
1. – p. 24–29.
4. Palmer G.C. Neuroprotection by NMDA receptor antagonist in a
variety of neuroppathologies // Cur. Drug Targets. – 2001. – Vol. 2. – P.
241–271.
5. Reisberg B., Doody R., Stoffler A. et al. Memantine in moderate-tosevere Alzheimer’s disease // N. Engl. J. Med. – 2003. – 348. – P. 1333–
1341.
6. Reisberg B., Doody R., Stoffler A. A 24-week open-label extension
study of memantine in moderate to severe Alzheimer disease // Arch.
Neuronal. – 2006. – Vol. 63. – Р. 49–54.
7. Scarpini E., Scheltens P., Feldman H., Treatment of Alzheimer’s disease: current status and new perspecrives//Lancet. Neurol. – 2003. –
Vol. 2, № 9. – P. 539–547.
8. Tariot P.N., Farlow M.R., Grossberg G.T. et al. Memantine Study
Group. Memantine treatment in patients with moderate to severe
Alzheimer disease already receiving dopenezil: a randomized controlled trial // JAMA. – 2004. – Vol. 291, № 3. – P. 317-324.
SUMMARY
PLASMA MEMANTINE KINETICS
A.A. Karlitskaya, L.M. Krasnykh, PhD,
Professor N.D. Bunyatyan, MD, G.F. Vasilenko, Phd
Research Center for Examination of Medical Products, Ministry of
Health and Social Development of the Russian Federation, Moscow
The pharmacokinetics of Memaneurin was studied after its single
administration. Its blood concentration is determined by high performance liquid chromatography and mass spectrometry.
Memantine was found to be slowly absorbed in the gastrointestinal
tract.
Key words: memaneurin, memantine, concentration, plasma, mass
spectrometry.
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармакология: эксперимент и клиника
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.275.4.03:[616.98:578.825.11].011
АКТИВНОСТЬ ВЕЩЕСТВ СТИМФОРТЕ
И ИХ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
А.П. Бельков1, В. Муругин3, С.С. Григорян2, А.В. Ильичев1,
Г.Д. Чубарова1, канд. фарм. наук, Д.Г. Мальдов1, канд. биол. наук
1
ЗАО «Скай ЛТД», Барнаул
2
Институт микробиологии, эпидемиологии и иммунологии им. Н.Ф. Гамалея, Москва
3
Институт иммунологии Федерального управления медико-биологических
и экстремальных проблем при Минздравсоцразвития РФ, Москва
E-mail: [email protected]
Приведены результаты изучения активности препарата
«Стимфорте» и его фракций в зависимости от физико-химических
свойств (молекулярной массы, кислотности и др.).
Ключевые слова: стимфорте, фракции стимфорте,
иммуностимуляторы, активность, цитокины, молекулярная масса,
кислотность.
тимфорте – иммуномодулирующий препарат для лечения хронической рецидивирующей герпесвирусной инфекции и гепатита В [2],
проявляющий высокую активность против гепатита С в экспериментах на животных [1, 4]. Основная
активность препарата связана с активацией толлподобного рецептора 4 (TLR4) [5]. Естественный экзогенный лиганд для TLR4 – это липополисахарид
(ЛПС), а эндогенный – низкомолекулярная гиалуроновая кислота, оба имеют гидрофобные домены
[7, 8].
Цель настоящей работы – изучение активности
стимфорте и его фракций в зависимости от физикохимических свойств.
С
Экспериментальная часть
Объектами исследования служили стимфорте и
фракции, полученные из него путем хроматографического разделения на колонках с DEAE-сефарозой
и С18-Discovery.
Для изучения наиболее активной части препарата была проанализирована фракция, связывающаяся с носителем на колонке С18-Discovery, так как
без гидрофобного домена достаточно прочное связывание с TLR4 невозможно. Испытания фракций
стимфорте проводились на выделенных веществах,
в количествах, эквивалентных соответствующему
количеству стимфорте. Активность препаратов как
продуцентов цитокинов ФНОα, ИЛ1β, ИЛ6 и ИЛ10
Фармация №4, 2012
определялась по описанной ранее методике [5]. Интерфероногенная активность устанавливалась также
традиционным методом [3].
В результате проведенных исследований (рис.1)
выявлено, что при длинах волн 220 и 240 нм вещества, которые при заданных условиях не садятся на
колонку С18-Discovery (водная фракция), составляют 80–85% от всех веществ, входящих в состав стимфорте. Разделительная черта указывает на время подачи ацетонитрила. Верхняя часть – экстинкция при
220 нм, нижняя – при 240 нм. Садящаяся на колонку и смываемая градиентом ацетонитрила фракция
составила 15–20% (фракция С18). При этом водная
фракция была более гетерогенна, чем сорбирующаяся на С18.
После разделения была проанализирована способность водной, не связывающейся с С18носителем, и С18-связывающейся фракций активировать экскрецию основных цитокинов, характерных для активации TLR4. Оценка продукции этих
цитокинов под действием разных фракций показала,
что обе анализируемые фракции сравнимы по активности с целым препаратом. Фракция, имеющая гидрофобный домен, была значительно активнее гидрофильной фракции и препарата стимфорте (табл.1).
При индукции посредством этого препарата и его гидрофобной и гидрофильной фракциями моноцитовдоноров продукция ФНОα возрастала по разным
концентрационным зависимостям, особенно – на
концентрациях 50 и 25 мкг/мл. Если в гидрофильной фракции продукция этого цитокина возрастала очень быстро, то С18-фракция характеризовалась
очень медленным подъемом продукции ФНОα. Выявлено, что если эффектор образовывал конгломераты или мицеллы, тогда, по мере разбавления, росла его эффективная концентрация. Амфифильный
характер веществ С18-фракции способствовал образованию таких надмолекулярных структур. При кон-
39
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармакология: эксперимент и клиника
2,00
Экстинкция
при 220 нм
Водная фракция
1,00
С18
ЛПС
0,00
Экстинкция
при 240 нм
0,60
Водная фракция
0,40
С18
0,20
ЛПС
0,00
0,00
20,00
40,00
60,00
Время, мин
80,00
100,00
120,00
Рис. 1. Профиль стимфорте на колонке С18-Discovery
Таблица 1
ПРОДУКЦИЯ ЦИТОКИНОВ ПОД ДЕЙСТВИЕМ РАЗНЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ
СТИМФОРТЕ И ФРАКЦИЙ, ПОЛУЧЕННЫХ НА КОЛОНКЕ С18-DISCOVERY
Цитокин
ИЛ10
ИЛ1β
ИЛ6
ФНОα
Эффектор, мкг/мл
С18-фракция
Водная фракция
Стимфорте
100
2546 ±773
636±447
1754±872
50
1231±582
582±411
1145±601
25
1030±447
433±273
903±440
100
1132±248
1486±785
467±225
50
633±219
116±25
429±234
25
269±127
40±24
299±186
100
11688±2806
4283±2710
7992±2715
50
7877±2683
2860±1606
6501±2111
25
4996±1508
1551±591
5124±1939
100
293±20
322±190
205±16
центрации эффекторов, эквивалентной 100 мкг/мл
стимфорте, индукция ФНОα, вызванная гидрофобной и гидрофильной фракциями, достоверно не различима. При концентрации 50 мкг/мл фракция С18
втрое эффективнее активировала продукцию цитокина, чем водная фракция, а при 25 мкг/мл – в десятки раз. Характеристики цельного препарата в
этом процессе носили промежуточный характер.
Аналогичный характер носит индукция ИЛ1β. Интересно, что продукция этих цитокинов происходит через одни и те же рецепторы TLR4 для ФНОα,
TLR4, NOD1 и NOD2 для ИЛ1β.
При индукции ИЛ6 и ИЛ10 различия фракции С18 с препаратом стимфорте достоверны лишь
40
ЛПС, 100 нг
Контроль
3597±984
20±12
1862±361
1±1
16074±2312
7±6
при концентрации 100 мкг/мл. При меньших объемах препарата количество исследованных цитокинов
либо не различается при индукции стимфорте и его
С18 фракцией, либо различия недостоверны. Водная
фракция стимфорте значительно менее активна в
случае ИЛ 6 и ИЛ10 при всех концентрациях, в случае
ФНОα и ИЛ1β – при концентрациях препарата 25 и
50 мкг/мл. Таким образом, установлено, что фракция
С18 более активна, чем водная фракция и сам препарат стимфорте. Особенно высока ее удельная активность, поскольку доля этой фракции в препарате не
более 20%, как уже упоминалось.
Противовирусная активность обеспечивается
интерферонами (ИНФ). Стимфорте является сла-
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармакология: эксперимент и клиника
Активное разведение (разы)
Продукция цитокинов, пг
бым непосредственным индуктором ИФНγ и досто5000
верно не индуцирует ИФНα и β на моноцитах крови
ФНО
человека. Однако in vivo на мышах он показывал до4000
статочно высокую интерфероногенную активность,
ИЛ1
3000
четко выраженную по времени. Пики подавления
вируса энцефаломиокардита в культуре фибробла2000
стов наблюдались через 24 и 72 ч (см. рис. 1), при
1000
этом активность через 6 ч практически не обнаруживалась. С18-фракция вызывала продукцию ИНФ по
0
другим кинетическим параметрам. Через 6 ч наблю1
2
3
ФНО
далась небольшая активность, затем очень медлен4
5
6
ный подъем до 48 ч, и далее – еще более медленное
Фракции ФНО
падение активности. Следовательно, С18-фракция
Рис. 2. Индукция цитокинов
обусловливает основную иммуностимулирующую
разными фракциями стимфорте
активность, которая определяет стимуляцию продукции препаратом стимфорте, как противовирусных, так и противоопухолевых цитокинов. При этом тивные вещества являются нейтральными. Наимемодулируются кинетические параметры продукции нее активны вещества в слабокислой области (фракции 2 и 3), в остальных фракциях активность росла
интерферона.
Таким образом, С18-фракция стимфорте со- по мере увеличения в их составе анионсодержащих
держит основные вещества, способные индуциро- групп (рис. 2). Фракция 1 не садится на DEAEвать интерфероны, провоспалительные цитокины и сефарозу; фракции 2, 3, 4 элюируются небольшими
количествами NaCl; фракции 5, 6 элюируются больИЛ10.
При непосредственном определении интерфе- шими количествами NaCl. Контроль – 72±66. Пороногенной активности фракций было установле- зитивный контроль ЛПС 100 нг: ФНОα =937±459,
но, что на 24–72 ч С18-фракция активнее гидро- ИЛ1β= 5235±2797.
Далее изучали последовательно выделенную
фильной. Сыворотка мышей, которым вводили
С18-фракцию в дозе 50 мкг на 1 мышь, взятая че- сначала на DEAE-сефарозе фракцию 1 (рис. 3), корез 24 ч, блокировала развитие вируса в разведении торую затем разделили на C18-Discovery и использо1/64–128, а водная фракция, взятая в то же время, вали адсорбирующуюся на этой колонке фракцию.
– в разведении 1/32. В концентрации 100 мкг на 1 мышь 24-чаа
совая сыворотка, индуцирован140
ная С18-фракцией, блокировала
развитие вируса при 1/128-256,
120
а водная фракция – в разведе100
нии 1/32-64. Через 72 ч сыво80
ротка мышей, которым вводиСтимфорте
60
ли С18-фракцию, блокировала
развитие ЕМС-вируса в разведе40
С18-фракция
нии 1/128, а водная фракция – в
Стимфорте
20
разведении 1/64, при введении
0
100 мкг соотношение было 1/256
0
150
100
150
и 1/32–64 соответственно. РазЧасы после инъекции
личия во всех случаях полноб
1
стью достоверны.
При разделении стимфор3
те на DEAE-сефарозе в гради6
4
2
5
енте NaCl от 0 до 1М выделено 6
фракций. Наиболее активно индуцировала продукцию ФНОα
Условные обозначения: черный цвет – поглощение при 220 нм; серый – градиент
и ИЛ1β фракция 1, которая не
NaCl от 0 до 1М; цифры – пики, из которых брали пробы на активность
связывалась с DEAE-сефарозой.
Рис. 3. Интерфероногенная активность стимфорте
Данные вещества не сорбирои
его С18-фракции: а – график продукции цитокинов;
вались и на катионообменник
б – пики экстинкции соответствуют графику (а)
СМ-сефарозу, т.е. наиболее ак-
Фармация №4, 2012
41
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Фармакология: эксперимент и клиника
Она сильно индуцировала ИЛ1β и ФНОα (табл. 2.),
что особенно заметно на ИЛ1β. Однако интерфероногенная активность этой фракции оказалась довольно низкой (рис. 4). Использована очищенная
фракция, эквивалентная 100 мкг стимфорте (на
1 мышь), после введения мышам: 1–24 ч, 2– 48 ч,
3 – 72 ч.
Таким образом, ИЛ1 и ФНОα индуцирующая активность по мере очистки действующего начала росла, а интерфероногенная – падала. Связано это,
по-видимому, с аддитивностью индукторов интерфе-
ронов и индивидуальным действием индукторов провоспалительных цитокинов.
При разделении данной фракции на колонке
Silica получили 4 пика (рис. 5). При этом интерфероногенная активность и индуцирующая ИЛ1β
и ФНОα разделились. Фракция 1 обладала значительной ИЛ1β индуцирующей активностью, но
интерфероногенная активность в ней не обнаруживалась. Фракция 2 индуцировала только ИФН;
фракция 3 оказалась не активна, фракция 4 была
способна вызывать индукцию ИФН и очень слабо
– ИЛ1β.
Таблица 2
ПРОДУКЦИЯ ЦИТОКИНОВ ПОД ДЕЙСТВИЕМ
ФРАКЦИИ СТИМФОРТЕ, ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНО
ОЧИЩЕННОЙ НА DEAE-СЕФАРОЗЕ И C18-DISCOVERY
Концентрация
стимфорте, мкг/мл
Продукция
ФНОα, пг
Продукция
ИЛ1β, пг
200
1011±687
6485±994
100
666±160
5938±1172
40
343±72
4364±209
Выводы
1. Наиболее активные (более половины активности по индукции ИЛ1β, ФНОα и ИФН) веществаиммуностимуляторы в стимфорте нейтральны и содержат гидрофобный домен.
2. Вещества в составе стимфорте, активирующие
продукцию ИЛ1β, ФНОα, отличаются по молекулярной массе от интерфероногенов этого препарата.
Разведение, при котором
сохраняется противовирусная активность
ЛИТЕРАТУРА
1. Дерябин П.Г., Е.И. Исаева, Д.Г.Мальдов и др. Действие
Стимфорте на устойчивый к интерферону генотип штамма вируса
гепатита С // Вопросы вирусологии. – 2009, № 2. С. 17–20.
2. Зуйкова И.Н., Шульженко А.Е., Мальдов Д.Г. и др. Применение
препарата «Стимфорте» в комплексной терапии рецидивирующей
герпес-вирусной инфекции // Герпес. – 2009, № 2. – С. 30–36.
3. Мальдов Д.Г., Григорян С.С., Галегов Г.А. и др. Действие
иммуномодулирующего препарата «Стимфорте» на
герпесвирусную инфекцию // Иммунология. – 2011, т. 5.
4. Мальдов Д.Г., П.Г. Дерябин, А.В. Ильичев, и др. Противовирусный
эффект препарата «Стимфорте» в комбинации с виразолом на
модели инфекции, вызванной вирусом гепатита С у мышей //
Вопросы вирусологии. – 2009, № 2. – С. 42–45.
5. Мальдов Д.Г., Чирвон Е.А., Ильичев А.В., Бабаян С.С. Активация
препаратом «Стимфорте» моноцитов и макрофагов //Иммунология.
– 2011, т. 5.
6. Krasinski R., H. Tchorzewski,- Hialuronian jako czynnik regulujacy
proces zapalenia // Postepy Hig. Med. Dosw. – 2007; 61: 683–689.
7. Miyake K. Innate immune sensing of
pathogens and danger signals by cell surface Toll-like receptors // Seminars in
Экстинкция
Immunology. – 2007; 19 (1): 3–10.
при 220 нм
30
25
20
24
15
10
5
12
8
0
1
2
3
Время отбора после инъекций стимфорте, ч
Рис. 4. ИФН-индуцирующая активность
фракции стимфорте после очистки
на DEAE-сефарозе и С18-Discovery
AU
1
2
3
0,020
SUMMARY
4
0,000
AU
0,040
Экстинкция
при 240 нм
0,020
0,000
0,00
10,00
20,00
Время, мин
30,00
40,00
Рис. 5. Профиль продукта, последовательно очищенного из стимфорте
на колонках DEAE-сефарозе и C18-Discovery и разделенного
на колонке Silica: цифры – пики, из которых брали пробы на активность
42
ACTIVITY OF SUBSTANCES IN STIMFORTE
AND THEIR PHYSICOCHEMICAL CHARACTERISTICS
A.P. Belkov1; V. Murugin3; S.S. Grigoryan2;
A.V. Ilyichev1;
G.D. Chubarova, PhD1; D.G. Maldov, PhD1
1
ZAO Sky Ltd, Barnaul
2
N.F. Gamaleya Institute of Microbiology,
Epidemiology, and Immunology, Moscow
3
Institute of Immunology, Federal Agency
of Biomedical and Extreme Problems,
Ministry of Health of the Russian Federation,
Moscow
The paper gives the results of a study of
the activity of Stimforte and its fractions in
relation to physiochemical properties
(molecular mass, acidity, etc.).
Key words: Stimforte, Stimforte fractions,
immunostimulators, activity, cytokines,
molecular mass, acidity.
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Компетентное мнение
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.322.074
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СПЕКТРОФОТОМЕТРИИ
ПРИ АНАЛИЗЕ ПРОМЫШЛЕННЫХ ОБРАЗЦОВ
ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ
А.А. Сорокина1, докт. фарм. наук, профессор, А.И. Марахова1, канд. фарм. наук,
Н.Н. Федоровский2, канд. хим. наук, Т.И. Белоус3
1
Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова
2
Московский государственный университет технологий и управления им. К.Г. Разумовского
3
ЗАО «Фирма Здоровье», Московская обл.
E-mail: [email protected]
На примере определения суммы флавоноидов в цветках ромашки аптечной анализируются проблемы применения спектрофотометрических методик для стандартизации промышленных образцов
лекарственного растительного сырья.
Ключевые слова: лекарственное растительное сырье,
спектрофотометрия, флавоноиды, цветки ромашки аптечной.
олее 120 видов лекарственного растительного сырья (ЛРС) разрешены к медицинскому
применению в виде настоев и отваров для внутреннего и наружного применения. Это сырье представлено различными морфологическими группами (листья, травы, цветки, кора и др.). Наиболее широко
для изготовления водных извлечений используется
ЛРС, содержащее эфирное масло, горечи, флавоноиды, витамины, полисахариды. Анализ действующей
нормативной документации показал, что около 35%
видов ЛРС, применяемых в форме водных извлечений, стандартизуется по соединениям не растворимым или плохо растворимым в воде [3].
При изучении ЛРС широко применяется метод
спектрофотометрии, в частности для количественного определения флавоноидов, антраценпроизводных,
сапонинов, алкалоидов и других групп биологически активных веществ (БАВ) [1]. Спектрофотометрический анализ монокомпонентных систем достаточно легок в исполнении. Однако экстракты из ЛРС
– многокомпонентные системы, поэтому работа с
ними имеет некоторые особенности. Рассмотрим
проблемы, возникающие при разработке методик количественного определения действующих веществ в
ЛРС, на примере стандартизации цветков ромашки
аптечной.
Реализуя принцип сквозной стандартизации для
ЛРС, при разработке ФСП на ромашки аптечной
Б
Фармация №4, 2012
цветки была использована распространенная методика количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на рутин, которая предполагала
спектрофотометрический анализ окрашенного комплекса флавоноидов с алюминия хлоридом. При этом
в реакционную смесь для подавления собственной
диссоциации флавоноидов добавлялась кислота уксусная, а оптическая плотность измерялась при длине волны 415 нм.
В ходе работы было установлено, что УФспектры образцов различных производственных
серий цветков ромашки имели максимумы поглощения при различных длинах волн (см. таблицу).
Выявленный факт может быть объяснен несколькими причинами. Так, ранее было показано, рН среды
влияет на эффективность экстракции флавоноидов
из ЛРС, и кроме того, для флавоноидов, различных по структуре, максимальный переход происходит при разных значениях рН [2]. Извлечения из
ЛРС имеют кислую реакцию среды, обусловленную
присутствием в сырье органических кислот. Содержание последних может меняться в зависимости от
разных факторов. Также необходимо учитывать, что
при производстве фасованной продукции используется, как правило, купажированное ЛРС. Место
и условия произрастания лекарственных растений
(особенно, если это импортное сырье) могут существенно влиять на качественный и количественный
состав БАВ сырья, а следовательно, и на особенности анализа (могут служить причиной сдвига максимума поглощения).
При выборе соединения – стандарта для количественного определения суммы веществ (в данном
случае – флавоноидов) учитывается, что если интервал между максимумами дифференциальной кривой
и длинноволновой полосой стандартного образца не
превышает полуширины полосы поглощения стан-
43
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Компетентное мнение
А
0,88
Выводы
1. Разработка спектрофотометрической методики количественного определения биологически активных веществ в лекарственном растительном сырье должна начинаться с изучения обзорного спектра
извлечения из сырья.
2. При проведении серийных анализов промышленных образцов сырья целесообразно применять
расчеты с использованием удельного показателя поглощения.
3. При наличии разницы между максимумом поглощения стандартного образца и анализируемой
пробы более чем на 2 нм, необходимо брать реальный
максимум. Использование реального максимума возможно, если интервал между максимумом дифференциальной кривой и длинноволновой полосой стандартного отклонения не превышает полуширины
полосы поглощения стандартного образца.
409
0,66
0,43
401
0,21
1
-0,02
2
502,69
462,15
421,61
НМ
381,08
ЛИТЕРАТУРА
УФ-спектры поглощения: 1 – комплекс ГСО рутина
с алюминия хлоридом; 2 – комплекс флавоноидов
цветков ромашки аптечной с алюминия хлоридом
дартного образца, то погрешность будет незначительной. Установлено, что паспортизированный ГСО
рутина в условиях методики количественного определения имеет максимум поглощения при длине волны 409 нм (см. рисунок).
Как показали экспериментальные данные (см.
таблицу), анализ с использованием длины волны
415 нм дает либо заниженные результаты по показателю «содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин», либо результаты на нижней границе
нормы. Таким образом, во избежание ошибок необходимо каждый раз снимать спектр поглощения
в определенном интервале длин волн и уточнять
аналитическую длину волны конкретного образца сырья, что значительно усложняет работу. Данную проблему можно решить путем использования
удельного показателя поглощения, численно равного оптической плотности 1% раствора при длине
кюветы 1 см.
1. Авдеева Е.В. Изучение некоторых фенольных и тритерпеновых
соединений, используемых в стандартизации лекарственных
растений: Автореф. дис. ... канд. фарм. наук. – Самара: СамГМУ,
1996. – 24 с.
2. Марахова А.И., Федоровский Н.Н. Изучение методов
управления экстракцией из лекарственного растительного сырья и
разработка методик стандартизации настоев //Приложение к
журналу «Вестник Российской академии медицинских наук», 2008. –
№6. – С. 267–268.
3. Сорокина А.А. Теоретическое и экспериментальное
обоснование стандартизации настоев, отваров и сухих экстрактов
из лекарственного растительного сырья: Дисс. докт. фарм. наук –
М.: 2002. – 255 с.
SUMMARY
USE OF SPECTROPHOTOMETRY IN THE ANALYSIS OF THE PRODUCTION
PROTOTYPES OF RAW MEDICINAL PLANT MATERIAL
Professor A.A. Sorokina, PhD1; A.I. Marakhova, PhD1;
N.N. Fedorovsky, PhD2; T.I. Belous3
1
I.M. Sechenov First Moscow State Medical University
2
K.G. Razumovsky Moscow State University of Technologies and
Management
3
ZAO Health Firm, Moscow Region
The problems associated with the use of spectrophotometric procedures to standardize the production prototypes of raw medicinal plant
material are analyzed by determining the sum of flavonoids in chamomile (Matricaria chamomilla) flowers.
Key words: raw medicinal plant material, spectrophotometry, flavonoids, chamomile (Matricaria chamomilla) flowers.
СОДЕРЖАНИЕ СУММЫ ФЛАВОНОИДОВ В ПЕРЕСЧЕТЕ НА РУТИН В ЦВЕТКАХ РОМАШКИ АПТЕЧНОЙ
Серия
Длина волны, соответствующая
реальному максимуму поглощения, нм
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин, %
при λmax
при λ=409 нм
при λ=415 нм
1
402
2,27±0,03
2,16±0,01
1,50±0,02
2
401
1,80±0,02
1,85±0,03
1,26±0,01
3
408
1,76±0,02
1,68±0,03
1,30±0,01
4
406
1,62±0,02
1,63±0,02
1,21±0,02
Примечание. Норма содержания суммы флавоноидов в пересчете на рутин в цветках ромашки по ФСП – не менее 1,5%.
44
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Образование
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.1:678
БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ
ПРЕПОДАВАНИЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ТЕХНОЛОГИИ
И.И. Краснюк, докт. фарм. наук, профессор,
Н.Б. Демина, докт. фарм. наук, профессор, С.А. Скатков, канд. фарм. наук
Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова
E-mail: [email protected]
Рассмотрены вопросы преподавания фармацевтической технологии с учетом биофармацевтических аспектов дисциплины и компетенций, включенных в государственный стандарт высшего профессионального образования по специальности «Фармация».
Ключевые слова: фармацевтическая технология, биофармация,
высшее профессиональное образование, компетенции,
программа обучения.
П
олвека назад, в связи с развитием фармацевтического производства, в рамках биофармации
было открыто биологическое значение таких фармацевтических факторов, как вид лекарственной формы, ее состав, технологические условия получения. Кроме того,
было показано влияние этих факторов на терапевтическую эффективность, а позднее – на биоэквивалентность
лекарств.
В настоящее время традиционно преподавание биофармацевтических основ студентам фармацевтических
факультетов осуществляется в рамках дисциплины «фармацевтическая технология». В Первом МГМУ им. И.М.
Сеченова в соответствии с Федеральным государственным
образовательным стандартом (ФГОС) высшего профессионального образования по специальности 060301 «Фармация» кафедра фармацевтической технологии преподает технологию изготовления лекарственных препаратов в
условиях аптеки и промышленную технологию серийного
производства готовых лекарственных препаратов. На фармацевтическом факультете готовят специалистов по квалификации «провизор», объектами профессиональной деятельности которых являются лекарственные препараты.
Поэтому преподавание направлено в первую очередь на
всестороннее изучение лекарственных форм. Принимая
во внимание специфику профессионального направления, следует признать высокую значимость формирования
у студента комплексных знаний о лекарственных формах,
включающих их биофармацевтическую характеристику,
принципы построения рецептур, технологию производства и стандартизацию.
На основе биофармацевтической концепции, сформулированной в середине ХХ века, очевидно, что целостное
представление о лекарственном препарате невозможно без
следующих знаний:
Фармация №4, 2012
• фармакологической направленности, физикохимических и технологических характеристик лекарственных веществ, связи этих характеристик с терапевтическим
эффектом;
• свойств лекарственных форм, вспомогательных веществ, их номенклатуры, функций и характеристик, их
физико-химических и технологических свойств, показателей безопасности;
• технологических схем производства лекарственных
форм;
• оборудования для производства готовых лекарственных средств и технологических процессов фармацевтической технологии (измельчение, сушка, грануляция, таблетирование, экстрагирование, смешивание, растворение,
эмульгирование и др.), влияния аппаратурного оформления на качественные характеристики и стандартность получаемых продуктов;
• параметров стандартизации лекарственных форм;
• условий транспортирования и хранения готовых лекарственных форм;
• организации, технологического контроля и валидации
производства/изготовления, в том числе получения, приемки, транспортирования и хранения исходных материалов
(лекарственных субстанций и вспомогательных веществ).
Особенность образовательного процесса – биофармацевтический подход к изложению материала. Биофармация включает все названные разделы фармацевтической
технологии, служит обоснованием выбора не только вида
лекарственной формы, рецептуры и производственных параметров, но и является фундаментальной основой разработки лекарственных препаратов.
В настоящее время инновационное развитие фармацевтического производства осуществляется не только в направлении разработки оригинальных лекарственных препаратов,
активным компонентом которых станет новая молекула, часто этот процесс идет по пути разработки улучшенных, научно обоснованных оптимизированных современных лекарственных форм (а также новых лекарственных препаратов),
позволяющих обеспечить высокий терапевтический эффект.
Этот путь по сути своей – биофармацевтический и не может
быть оставлен без внимания в учебном процессе.
Поэтому в программе обучения предусмотрены разделы, посвященные: использованию современных техноло-
45
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Образование
гий, что подразумевает знание современной аппаратуры для
их реализации, возможностей и условий технологической
переработки, влияющих на характеристики продукта; исходным материалам, в том числе упаковочным материалам и
вспомогательным веществам, ассортимент которых сегодня
огромен и требует умения ориентироваться в нем; разработке показателей качества и методик анализа (аналитических и
технологических) выпускаемых лекарственных препаратов,
отвечающих мировым стандартам; составлению фрагментов
нормативных документов на лекарственные формы и технологию (фрагментов фармакопейных статей предприятия,
технологических регламентов); организации производства в
соответствии с современными требованиями GMP.
Все названные разделы преподаются с учетом биофармацевтических аспектов, раскрывающих влияние таких
фармацевтических факторов, как вспомогательные вещества, вид лекарственной формы, технологические условия их производства (следовательно, и вид используемого
оборудования), на стандартность, фармацевтическую доступность (высвобождение лекарственного вещества из лекарственной формы в опытах in vitro) и терапевтическую
эффективность лекарственных препаратов.
Принимая во внимание большой объем и специфику
материала, новым учебным планом предусмотрен дополнительный курс биофармации и учебная практика на фармацевтических предприятиях. Первый МГМУ в течение уже
многих лет организует учебную практику студентов на таких
крупных производственных площадках, как ЗАО «Московская фармацевтическая фабрика», ОАО «Мосхимфармпрепараты им. Н.А. Семашко», Экспериментальное производство медико-биологических препаратов КНЦ НПК
(Кардиоцентр). Эти предприятия ежегодно принимают до
300 студентов очного отделения и до 120 человек, обучающихся на очно-заочном отделении. Даже не специалисту
понятно, какую нагрузку они несут! Однако практика имеет
огромное значение в образовательном процессе, повышая
элемент наглядности получаемого технологического образования, отказываться от нее в условиях GMP нельзя.
Для обучения современным инновационным фармацевтическим технологиям на кафедре фармацевтической
технологии работает постоянный научно-практический семинар, на котором в течение последних лет выступали с докладами специалисты ведущих зарубежных фирм: Glatt,
Fette compacting, INNOJET Herbert Huttlin, Capsugel и др.
На кафедре работают уникальные специалисты, владеющие методами разработки традиционных и креативных технологий получения любых лекарственных форм, а также опытом в подготовке, написании и государственной регистрации
нормативных документов на лекарственные средства. Создана научная школа из студентов – членов студенческого научного общества (дипломников), интернов и аспирантов,
которые под руководством профессоров и ведущих доцентов выполняют исследования по созданию, биофармацевтической оценке и обоснованию современных лекарственных
препаратов с оптимальными биофармацевтическими характеристиками, модифицированным высвобождением – гастрорезистентных, пролонгированных (от нескольких часов
46
до нескольких недель), быстрого высвобождения, предназначенных для перорального, парентерального, наружного применения. Важной ступенью в подготовке кадров, обладающих углубленными знаниями фармацевтической
технологии, станет создание вузовской лаборатории, которая
послужит производственной базой для проведения научноисследовательских работ и образовательного процесса.
Ежегодно по окончании курса обучения сотрудниками
кафедры проводится традиционная студенческая научнопрактическая конференция, на которой уже 4-й год подряд памятным знаком «Хрустальная таблетка» награждаются лучшие работы студентов и преподавателей, отмечается
активность партнерских предприятий.
Может ли провизор с качественным вузовским образованием по фармацевтической технологии реализовать свои
знания дисциплины в практическом плане? Да! А может ли
инженер, владеющий расчетами процессов и аппаратов, знаниями сопромата, предложить составы и технологические
схемы получения стабильных и эффективных лекарств, обоснованных с медицинской и биофармацевтической точек
зрения, с учетом фармакопейных требований? Как подсказывает жизнь, успех может быть достигнут во взаимном сотрудничестве, от которого должна выиграть Фармация.
При условии активного участия в процессе обучения
провизор, освоивший программу, вполне способен реализовать полученные технологические знания в сфере разработки
инновационных лекарственных препаратов и нормативных
документов на них, в сфере государственной регистрации, а
также в подразделениях фармацевтических производств, занимающихся вопросами обеспечения качества продукции,
лабораториях разного уровня. Фармацевтическое образование должно интегрировать знания фармакологии, медицинские аспекты применения лекарств, вопросы биофармации
с учетом значения лекарственной формы, ее ингредиентов и
технологии получения лекарств для достижения их терапевтической эффективности. Вооруженный такими знаниями
специалист будет востребован в профессиональной сфере на
всех этапах обращения лекарств.
Выпускник, получивший квалификацию «провизор»,
должен твердо знать фармакопейные стандарты, хорошо ориентироваться в многообразии лекарственных форм,
усвоить основные технологические принципы их производства. Профессиональные навыки провизора будут востребованы не только в фармацевтических организациях, но и в
сфере получения ветеринарных и гомеопатических лекарств,
а также косметических средств и биологически активных добавок, что несомненно будет способствовать широкому распространению фармацевтических стандартов качества.
SUMMARY
PHARMACEUTICAL TECHNOLOGY TEACHING: BIOPHARMACEUTICAL
ASPECTS
Professor I.I. Krasnyuk, PhD; Professor N.B. Demina, PhD; S.A. Skatkov, PhD
I.M. Sechenov First Moscow State Medical University
The issues concerning the teaching of pharmaceutical technology
are considered, by taking into account the biopharmaceutical aspects
of this subject and the competences involved in the state standard for
higher professional education, specializing in Pharmacy.
Key words: pharmaceutical technology, biopharmacy, higher professional education, competences, training program.
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Обзор
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.45.012
НАНОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ
СОВРЕМЕННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ
Н.Б. Демина, докт. фарм. наук, профессор, С.А. Скатков, канд. фарм. наук,
А.И. Тенцова, докт. фарм. наук, профессор, член-корр. РАМН
Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова
E-mail: [email protected]
Приводится анализ современных исследований, посвященных
разработке и изучению систем доставки лекарств на основе наноносителей различных типов. Указаны номенклатура лекарственных
препаратов, применяемых в практической медицине, а также новые
наноносители лекарств, их характеристики, особенности структуры.
Ключевые слова: биофармация, лекарственная форма,
нанотехнологии.
олвека назад биофармация раскрыла значение лекарственной формы (ЛФ), определив
ее как важнейший фармацевтический фактор, влияющий на терапевтическую эффективность лекарства. Практически сразу же, параллельно с исследовательскими работами в этом направлении, были
предприняты первые попытки создания ЛФ с заданными фармакокинетическими характеристиками.
Такие ЛФ, как правило, имели более сложную структуру и технологию по сравнению с традиционными,
их стали называть терапевтическими системами или
системами доставки лекарств (СДЛ). Основные цели
создания СДЛ – пролонгирование длительности пребывания лекарственного вещества в биожидкостях (в
первую очередь это касается легко растворимых лекарственных субстанций), направленность действия
(для особо токсичных), улучшение растворимости
для повышения биодоступности (мало и плохо растворимых), что актуально и в настоящее время.
Новые высокоэффективные ЛФ, включающие в
свой состав различные современные вспомогательные
вещества, потребовали не только разработки новых
технологий, но также тщательного изучения и решения таких специфических проблем, как безопасность
их для организма, необходимость строгого контроля и
разработка параметров стандартизации. К настоящему времени определенно установлено, что оптимизируя составы, технологии и аппаратурное оформление
процесса, можно существенно повлиять на успех медикаментозной терапии. Анализ публикаций позволяет также говорить о возрастающем влиянии микрои наноструктуры ЛФ на свойства препарата [1, 2].
Вследствие наличия большого ассортимента новых вспомогательных веществ и автоматизации про-
П
Фармация №4, 2012
изводства возросла значимость традиционных ЛФ.
Новые возможности в этом направлении дают нанотехнологии, затрагивающие все аспекты развития фармацевтической технологии: от традиционных
процессов (измельчение, гранулирование, таблетирование) и ЛФ до производства наноносителей лекарственных средств.
В настоящее время широко известны различные
типы наноносителей лекарственных средств. Хотя
первые упоминания о нано-СДЛ относятся к середине ХХ века, в первое десятилетие ХХI века интерес
исследователей к ним значительно вырос: они стали
активно разрабатываться и изучаться. В настоящее
время более 80% всех исследований относятся к созданию лекарственных препаратов на основе липосом
и полимерных наночастиц.
Липосомы, впервые обнаруженные в 1964 г., широко применяются в технологии создания лекарств.
Причина в их уникальных свойствах: способности
заключать в капсулу из биологически совместимого
материала липофильные и гидрофильные активные
компоненты, доставлять их в клетки с одновременной репарацией клеточных мембран. В настоящее
время целый ряд липосомальных препаратов (и не
только липосомальных), применяется в медицинской практике (табл. 1).
Высокая популярность полимерных наноносителей обусловлена широкими возможностями модификации их характеристик, что обеспечивается большим ассортиментом синтетических вспомогательных
ингредиентов. Время пролонгирования с помощью
этого класса наноносителей варьирует от нескольких
часов до нескольких месяцев и определяется природой и количеством полимера, его молекулярной массой, соотношениями компонентов и другими технологическими факторами. Использование различных
полимеров для создания наноносителей требует решения проблем токсичности, иммуногенности, неравномерного биораспределения. Поэтому особое
значение сейчас приобретают биодеградируемые материалы, в частности полимолочная, полиглутаминовая кислоты, их сополимеры, а также полисахариды и
сополимеры на основе аминокислот.
47
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Обзор
Таблица 1
НАНО-СДЛ, ПРЕДСТАВЛЕННЫЕ НА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОМ РЫНКЕ [10, 11, 15]
Торговое
название
Adagen
Активный
ингредиент
Аденозин деаминаза
Показание
Материалы,
к применению
структура
Полимерные наночастицы
Тяжелый
ПЭГ-аденозин
комбинированный
деаминаза
иммунодефицит
Острая
ПЭГ-L-аспарагиназа
лимфобластная лейкемия
Способ
применения
Компания
В/м
Enzon Pharmaceuticals
Inc., USA
В/в, в/м
Enzon Pharmaceuticals
Inc., USA
П/к
Teva Pharmaceuticals, Israel
Onscaspar
L-аспарагиназа
Copaxone
Глатирамер ацетат
Рассеянный склероз
Сополимер 4
Мacugen
Пегаптаниб натрия
Возрастная макулярная
дегенерация (дистрофия)
сетчатки
ПЭГ-анти
ЭФРС аптамер
Pegasys
Пег-интерферон
альфа-2а
Гепатит C и В
Пэгилированный
интерферон альфа-2а
П/к
Neulasta
Пег-филграстим
Нейтропения
ПЭГ-ГКСФ
П/к
Pegintron
Пег-интерферон
альфа-2b
Гепатит C
Пэгилированный
интерферон альфа-2b
П/к
Somavert
Пегвисомант
Акромегалия
ПЭГ-ФРГ
П/к
Грибковые инфекции
Липосомы
В/в
Амфотерицин В
Даунорубицин
Лимфоматозный
менингит
Грибковые инфекции
Саркома Капоши
Мультивезикулярные
большие липосомы
Липосомы
Липосомы
Интратекально
(через катетер)
В/в
В/в
Доксорубицин
Рак груди
Липосомы
В/в
Гепатит A
Липосомы
В/м
Грипп
Липосомы
В/м
Анальгезия
Мультивезикулярные
липосомы
Эпидурально
В стекловидное Nektar Therapeutics, USA;
тело
OSI Pharmaceuticals, USA
Nektar Therapeutics, USA
Nektar Therapeutics, USA;
Amgen Inc, USA
Nektar Therapeutics,
USA
Nektar Therapeutics,
USA Pfizer
Липосомы
Abelcet
Амфотерицин В
Depocyt
Цитарабин
AmBisome
Daunoxome
Myocet
Epaxal
Inflexal V
DepoDur
Инактивированный
вирус гепатита А
Инактивированный
антиген вируса гриппа
Морфина
сульфат
Visudyne
Вертепорфин
Doxil
Caelyx
Доксорубицин
Доксорубицин
Возрастная макулярная
дегенерация (дистрофия)
Липосомы
сетчатки
Противораковое средство
ПЭГ-липосомы
Противораковое средство
ПЭГ-липосомы
Нанокристаллы
В/в
QLT Inc., Canada;
Norvatis, Switzerland
В/м
В/м
OrthoBiotech, USA
Schering-Plough, USA
Rapamune
Сиролимус
Иммунодепрессант
Нанокристаллы
П/о
Emend
Апрепитант
Противорвотное
Нанокристаллы
П/о
Tricor
Фенофибрат
Гиперлипидемия
Нанокристаллы
П/о
Megace
Мегестрола
ацетат
Abraxane
Паклитаксел
Amphotec
Амфотерицин B
Противораковое,
при анорексии и кахексии
у онкологических
Нанокристаллы
больных и больных
СПИДом
Протеиновые наночастицы
Рак молочной
Наночастицы
железы
альбумина
Нанодисперсии липидов
Грибковые инфекции
Липидный комплекс
Enzon Pharmaceuticals
Inc.,USA
Enzon Pharmaceuticals
Inc., USA
Gilead SciencesInc., USA
Gilead Sciences Inc., USA
Zeneus/Cephalon,
Inc., USA
BernaBiotech,
Switzerland
BernaBiotech,
Switzerland
EKR Therapeutics,
USA
Elan Corporation, Ireland;
Wyeth Pharmaceutical,
USA
Elan Corporation, Ireland;
Merck and Co., Inc. USA
Elan Corporation, Ireland;
Abbott Labs, USA
П/о
Elan Corporation,Ireland;
Par Pharmaceuticals, USA
В/в
AbraxisBioScience, USA;
AstraZeneca, UK
В/в
InterMune, USA
Примечание. ПЭГ – полиэтиленгликоль, ЭФРС – эндотелиальный фактор роста сосудов; ГКСФ – гранулоцитарный колониестимулирующий
фактор; ФРГ – фактор роста гепатоцитов; п/о – пероральное применение; в/в – внутривенное применение; в/м – внутримышечное применение.
48
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Обзор
Помимо липосом и полимерных наночастиц,
разрабатываются СДЛ в форме конъюгатов, ДНКсистем, на основе альбумина, полисахаридов, металлов, вирусов, дендримеров, соединений – включения, липопротеиновые и др. Сегодня насчитывают
более 400 типов структур нано-СДЛ, характеристики
некоторых (аквасомы, этосомы, кубосомы, полимерсомы) приведены в табл. 2.
Каждый тип наноструктур имеет свои отличительные характеристики. Так, аквасомы (aquasomes) – это
наночастицы, имеющие ядро нанокристаллического кальция фосфата [14]. Они используются в качестве
средств доставки лекарств и антигенов. Этосомы – производные липосом, по сравнению с последними они
способствуют большей проницаемости и оказывают
резорбтивное действие при аппликационном процессе. Помимо лекарственных веществ и фосфолипидов,
этосомы содержат в своем составе спирты (этиловый
или изопропиловый), воду и гликоли [3]. Кубосомы
(cubic phase liquid crystals) являются самоорганизующимися жидкокристаллическими кубическими фазами с сотовой структурой, состоящей из двухслойных
замкнутых фрагментов, между которыми находится
вода [6]. Их преимущество заключается в способности
включать одновременно как гидрофильные, так и липофильные лекарственные вещества.
Структуры на основе металлов стабильны и высоко контрастны; они предназначены для диагностики
(например, для использования в компьютерной томографии). Так, наночастицы, покрытые металлом (золотом), содержат сферическое диэлектрическое ядро с
тончайшим слоем проводника – металла на поверхности; они используются в качестве контрастного агента в оптической микроскопии ближнего ИК-спектра,
а также для терапии раковых заболеваний [5].
С появлением новых материалов новое развитие
получили технологии включения лекарственных веществ в мицеллы. Так, высокий терапевтический потенциал показали полимерные биосовместимые и биодеградируемые мицеллы, организующиеся самосборкой.
Они способны включать 2 и более лекарственные субстанции с различной растворимостью, поверхность их
можно модифицировать лигандами, повысив специфичность и эффективность, загрузка лекарствами таких наноносителей может достигать 25% по массе.
Все большее применение в силу свойственных им
преимуществ находят дендримеры – полимеры, строение молекул которых строго регулируется и напоминает дерево с разветвлениями. Дендримеры имеют большое количество различных реакционно-способных
групп, их можно синтезировать из синтетических и
нативных компонентов, таких как белки, нуклеотиды,
сахара, аминокислоты. Размеры дендримеров в пределах 2,5–10 нм позволяют им проникать через барьеры
печени. Наиболее широко исследуются дендримеры
классов полиамидоаминов (РАМАМ) и полипропиле-
Фармация №4, 2012
ниминов (PPI). Лекарственные препараты на их основе доведены до стадии клинических испытаний [4].
Недостатки первого поколения СДЛ (невысокая
стабильность, короткое время циркулирования, неравномерное распределение в организме, малый процент
включения и др.) потребовали создания универсального дизайна. Тенденции современных исследований
заключаются не только в создании принципиально
новых структур СДЛ, но и в разработке принципов архитектуры, сохраняющей уникальные достоинства уже
известных наноносителей различных классов, в поиске
и синтезе новых высокоспецифичных адресных структур, в привлечении к их построению новых материалов и технологий. В научных публикациях представлеТаблица 2
РАЗМЕРЫ НЕКОТОРЫХ НАНООБЪЕКТОВ,
ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В МЕДИЦИНЕ
ИЛИ ПЕРСПЕКТИВНЫХ [3–9, 11–15]
Название
Размер, нм
Полимерные системы
Дендримеры
1–10
Полимерные мицеллы
10–100
Наночастицы
50–500
Нанокапсулы
100–300
Наноконъюгаты (полимер–ЛВ)
1–15
Полимерные наночастицы
(хитозан, метакрилат)
100–800
Полимеросомы
100–300
Липидные системы
Твердые липидные наночастицы
50–400
Этосомы
10–1000
Липидные наноструктуры
200–800
Ниосомы
10–150
Липосомы
10–1000
Наноэмульсии
Кубосомы
50–700
Металлические наноструктуры
Коллоиды металлов
1–50
Наночастицы золота
100–200
Магнитные коллоиды
100–600
Наночастицы, покрытые металлом
(золотом)
10–130
Наноструктуры на основе углерода
Углеродные нанотрубки
Фуллерены
1–10 (диаметр)
1–1000 (длина)
1–10
Нанокристаллы
Аквасомы
60–300
49
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Обзор
ны многочисленные схемы универсального строения
нано-СДЛ. На основании требуемых характеристик
(точность доставки, безопасность, длительность циркулирования в плазме) они практически единодушно
сходятся на дизайне, где лиганды прикреплены ковалентной связью к свободным концам линейной молекулы полиэтиленгликоля (ПЭГ) (см. рисунок).
Технология сборки композитных СДЛ должна учитывать необходимость компромисса между агентами,
иммобилизованными на их поверхности, например
сферическая стабилизация полимером может препятствовать выполнению функций адресного фрагмента.
Установлен оптимальный диапазон размеров наноносителей (>5 нм и <150 нм), обеспечивающий
длительность нахождения в кровяном русле при парентеральном введении. Размеры ограничиваются
физиологическими условиями применения: частицы
<5 нм быстро выводятся почками, частицы >150 нм
захватываются печенью. Поэтому наноносители,
предназначенные для нацеливания на органы ретикулоэндотелиальной системы, должны иметь большие размеры. То же самое относится и к частицам
для аппликационного применения. Одна из технологических проблем, связанных с размерами, заключается в том, что мелкие частицы, как правило, состоят
из большого количества носителя, но несут невысокий процент лекарственного вещества, в то время,
как для обеспечения терапевтической концентрации
эти маленькие частицы должны загружать значительное количество активной субстанции. Кроме того,
известно, что растворяются/деградируют мелкие частицы быстрее. Преодоление этих ограничений возможно с помощью оптимального выбора материала
носителя, его структуры и технологии получения.
В
рамках
одной статьи невозможно
дать
полную и многогранную картину современных
исследований.
Однако уже значительное количество препаратов на основе
нано-СДЛ
достигло практиче–1
–2
–3 –4
ского применения, что указы–5
–6
вает на широкие
Схема гибридного липидполимервозможности и
ного наноносители с лигандами,
многообещающую
обеспечивающими целевую
перспективу. Еще
доставку: 1 – моноклональное
антитело; 2 – аптамер; 3 – пептид;
50
лет
назад
4 – фрагмент антитела;
сформировалось
5 – фосфолипид, 6 – ПЭГ
принципиальное
50
отношение к лекарственной форме, ее медицинскому значению. Биофармация стала фундаментом развития современных направлений фармацевтической
технологии. Цель последних – создание «футуристических» мультифункциональных лекарств.
ЛИТЕРАТУРА
1. Демина Н.Б., Скатков С.А. Таблетирование: от Брокедона до
нанотехнологических «ноу–хау» // Фармацевтические технологии и
упаковка. Лекарства по GMP. – 2010, № 4. – С. 64–65.
2. Демина Н.Б., Скатков С.А. Фармацевтическая нанотехнология –
логическое развитие технологических дисциплин в высшем
фармацевтическом образовании нового тысячелетия // Фармация.
– 2009, № 2. – С. 60–65.
3. Ainbinder D., Paolino D., Fresta M., Touitou E. Drug delivery applications with ethosomes // J. Biomed. Nanotechnol. – 2010. – Vol. 6 (5). –
Р. 558–568. Review.
4. Dufes C., Uchegbu I.F., Schatzlein A.G. Dendrimers in gene delivery
// Adv. Drug Deliv. – 2005. – Rev. 5. – Р. 2177–2202.
5. Fekrazad R., Hakimiha N., Farokhi E., Rasaee M.J., Ardestani M.S.,
Kalhori K.A., Sheikholeslami F. Treatment of oral squamous cell carcinoma using anti-HER2 immunonanoshells //Int. J. Nanomedicine. – 2011. –
Vol. 6. – Р. 2749–2755.
6. Han S., Shen J.Q., Gan Y., Geng H.M., Zhang X.X., Zhu C.L., Gan L.
Novel vehicle based on cubosomes for ophthalmic delivery of flurbiprofen with low irritancy and high bioavailability // Acta Pharmacol. Sin. –
2010. – Vol. 31 (8), Р. 990–998.
7. Jain T.K., Richey J., Strand M., Leslie-Pelecky D.L., Flask C.A.,
Labhasetwar V. Magnetic nanoparticles with dual functional properties:
Drug delivery and magnetic resonance imaging // Biomaterials. – 2008.
– Vol. 29, Р. 4012–4021.
8. Merisko-Liversidge E., Liversidge G.G. Nanosizing for oral and
parenteral drug delivery: a perspective on formulating poorly-water soluble compounds using wet media milling technology // Adv. Drug.
Deliv. Rev. – 2011. – Vol. 63 (6). – Р. 427–440.
9. Muller R.H., Radtke M., Wissing S.A., Solid lipid nanoparticles (SLN)
and nanostructured lipid carriers (NLC) in cosmetic and dermatological
preparations // Advanced Drug Delivery Reviews. – 2002. – Vol. 54. –
Suppl. – Р. 131–135.
10. Ochekpe N.A., Olorunfemi P.O., Ngwuluka N.C. Nanotechnology
and Drug Delivery Part 2: Nanostructures for Drug Delivery // Tropical
Journal of Pharmaceutical Research. – 2009. – Vol. 8 (3). – Р. 275–287.
11. Rajera R., Nagpal K., Singh S.K., Mishra D.N. Niosomes: a controlled and novel drug delivery system // Biol. Pharm. Bull. – 2011. – Vol. 34
(7). – Р. 945–953. Review.
12. Rapoport N., Pitt W.G., Sun H., Nelson J.L. Drug delivery in polymeric micelles: from in vitro to in vivo // J. Control. Release. – 2003. – Vol.
91. – Р. 85–95.
13. Sonavane G., Tomoda K., Makino K. Biodistribution of colloidal
gold nanoparticles after intravenous administration: Effect of particle
size // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. – 2008. – Vol. 66. Issue 2. –
Р. 274–280.
14. Umashankar M.S., Sachdeva R.K., Gulati M. Aquasomes: a promising carrier for peptides and protein delivery // Nanomedicine. – 2010.
– Vol. 6 (3). – Р. 419–426.
15. Zhang L., Gu F.X., Chan J.M., Wang A.Z., Langer R.S., Farokhzad
O.C. Nanoparticles in Medicine //Therapeutic Applications and
Developments Clinical Pharmacology & Therapeutics. – 2008. – Vol. 83
(5). – Р. 761–769.
SUMMARY
CURRENT DOSAGE FORM: NANOTECHNOLOGICAL ASPECTS
Professor N.B. Demina, PhD; S.A. Skatkov, PhD; Corresponding
Member of the Russian Academy of Medical Sciences Professor A.I.
Tentsova, PhD;
I.M. Sechenov First Moscow State Medical University
The paper analyzes the present-day investigations of the development and studies of drug delivery systems based on different types of
nanocarriers. It shows the nomenclature of drugs used in practical
medicine, as well as new drug nanocarriers, their characteristics, and
structural features.
Key words: biopharmacy, dosage form, nanotechnologies.
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Обзор
© Коллекттив авторов , 2012
УДК 615.453.4.05.15.012
ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ФОРМЫ С МОДИФИЦИРОВАННЫМ
ВЫСВОБОЖДЕНИЕМ НА ОСНОВЕ ПЕЛЛЕТ
К.В. Алексеев, докт. фарм. наук, профессор, Н.В. Тихонова,
Е.В. Блынская, канд. фарм. наук, В.К. Алексеев, Н.А. Уваров, Е.Ю. Карбушева
НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН, Москва
E-mail: [email protected]
Приведена информация о фармацевтической технологии включения лекарственных веществ в пеллеты, их преимуществах при получении лекарственных форм с заданным профилем высвобождения
веществ.
Ключевые слова: пеллеты, модифицированное высвобождение,
полимерное покрытие.
высвобождения ЛВ при сочетании пеллет с разными
размерами.
Для оценки качества пеллет существуют технологические характеристики (наиболее важные из них –
сферическая форма и узкий разброс размера частиц),
обусловливающие улучшение сыпучести и однородность дозирования (табл. 1).
В зависимости от технологических особенностей
получения, а также структурной составляющей пеллеты подразделяются на гомогенные и гетерогенные. Гомогенные – однородные по составу пеллеты,
в которых ЛВ распределено по всему их объему. Гетерогенные пеллеты имеют ядро (может содержать
ЛВ), на которое наносятся один или несколько слоев, содержащих ЛВ, и вспомогательные вещества
(табл. 2).
Гомогенные и гетерогенные пеллеты, вследствие
структурно-технологических особенностей, характеризуются различными методиками введения ЛВ в их
состав в зависимости от гидрофильных/гидрофобных
есмотря на увеличивающийся поиск альтернативных способов введения и методов
доставки лекарственного вещества (ЛВ), пероральные лекарственные формы (ЛФ) остаются наиболее
популярными и удобными для пациента и составляют около 70% всех ЛФ. Для данного пути введения более всего подходят твердые ЛФ, что связано
прежде всего с отработанной технологией и высокой точностью дозирования. Однако в зависимости
от фармакокинетических и фармакодинамических
характеристик ЛВ часто возникает необходимость
модифицировать его высвобожТаблица 1
дение из ЛФ, что позволяет изменить скорость и продолжиСВОЙСТВА ПЕЛЛЕТ
тельность его высвобождения,
Характеристики
Требования
Аналитический метод
место высвобождения, а также выраженность терапевтичеФорма частиц, сферичность
Сферообразная
Визуальный
ского эффекта лекарственноХарактер поверхности
Гладкая
Визуальный
го средства (ЛС). По строению
Ситовой
различают 4 типа ЛФ с модифиСредний размер частиц
Между 0,2 и 2 мм
или визуальный
цированным высвобождением:
Ситовой
Распределение
монолитные (матриксные) сиУзкое
размера частиц
или визуальный
стемы, резервуарные (мембранПористость
Низкая
Ртутная интрузия
ные) системы, осмотические сиОпределение
стемы, пеллеты [1, 9].
Плотность
Высокая
насыпной плотности
В настоящее время в фарТест «Истираемость»,
мацевтической технологии все
Механическая прочность
Высокая
тест «Прочность на сжатие»
чаще используется включение
Угол естественного откоса,
ЛВ в пеллеты. Это обусловлено
Сыпучесть
Очень хорошая
оценка уровня сыпучести
их преимуществами – меньшей
Содержание
От очень низкого
В зависимости
зависимостью времени пребылекарственного вещества
до более 95%
от лекарственного вещества
вания пеллет в желудке от приеОт немедленного
ма пищи и возможностью полуПрофиль высвобождения
Тест «Растворение»
до контролируемого
чения ЛФ с заданным профилем
Н
Фармация №4, 2012
51
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Обзор
свойств ЛВ, а также целесообразности модификации
кинетики высвобождения ЛВ (табл. 3) [3, 4].
Пеллеты с гидрофильными ЛВ можно получить
по любой технологии: прямой пеллетизацией и наслаиванием. Вспомогательные вещества (ВВ) липидного характера, вводимые в такие пеллеты, препятствуют проникновению пищеварительных соков
внутрь, вызывая задержку высвобождения ЛВ [7].
В случае гидрофобных ЛВ технология получения
пеллет будет направлена прежде всего на увеличение
биологической и фармацевтической доступности.
С этой целью применяются подходы по созданию
твердых дисперсных систем (ТДС) с амфифильными полимерами [2]. В качестве технологии получения
ТДС можно предложить эктрузию расплава. Пеллеты получают при обработке экструдата на пеллетизирующем диске. В данном случае получаются гомогенные по составу пеллеты с модифицированным
высвобождением. Введение ЛВ в липидные пеллеты
позволяет увеличить проницаемость через биологические мембраны [8]. Также липидные частицы, обладающие очень малым углом смачиваемости и низкой
плотностью, могут обладать улучшенными гидродинамическими свойствами – плавать на поверхности
желудочного сока, что является преимуществом для
всасывающихся в желудке ЛВ [7]. Используя техно-
логию наслаивания, липофильные ЛВ или вводят в
сухом виде в ядро пеллет, или наслаивают на ядро при
растворении их в неполярных растворителях таких,
как спирт этиловый.
С целью достижения оптимального терапевтического профиля высвобождения ЛВ из пеллет осуществляются работы по модификации скорости и места
перехода ЛВ в среду организма из ЛФ [1, 4]. Модификация высвобождения ЛВ из пеллет обеспечивается: подбором вспомогательных веществ, определенным видом твердой ЛФ и технологией ее получения
[3]. Классификация пеллет по получаемому профилю
высвобождения приведена в табл. 4 [6].
К наиболее распространенным способам модификации относятся: нанесение полимерных покрытий, включение в состав гидрофобных полимеров, а
также изготовление мукоадгезивных пеллет.
Один из способов модификации высвобождения ЛВ – покрытие пеллет полимерной пленочной
оболочкой. Его часто применяют благодаря сферической форме пеллет, идеальной для нанесения покрытия (ввиду низкого соотношения поверхность:
объем для данного размера частиц и отсутствия граней) [1, 4]. Полимеры, используемые для нанесения в виде пленочного покрытия на пеллеты, делятся на 2 основные группы: эфиры целлюлозы и
производные акриловой кислоты. По сравнению с пленками,
Таблица 2
образованными эфирами целМЕТОДЫ ПОЛУЧЕНИЯ ПЕЛЛЕТ
люлозы, пленки, полученные из
производных акриловой кислоВспомогательные
вещества
Технология
Используемое
ты (Eudragit® или Kollicoat®), боВид пеллет
получения
влажная
пеллетизация
оборудование
пеллет
лее гибки. Поэтому они лучше
пеллетизация
плавлением
подходят для покрытия пеллет,
ПВП,
предназначенных для прессоваПеллетирастворимые
зирующий диск производные
ния [3, 6].
целлюлозы
В качестве гидрофобных веПВП,
ществ,
обеспечивающих замедПЭГ,
Миксер
растворимые
ление
высвобождения
ЛВ из пелполоксамер,
с высоким
производные
липиды, воск
усилием сдвига
лет,
используется
воск.
Он может
целлюлозы
Прямая
Гомогенные
выступать
и
в
качестве
матрицы,
пеллетизация
МКЦ, ПВП,
Сушилкаи
как
покрытие
[7,
8].
Воск
вворастворимые
гранулятор
с псевдоожижен- производные
дят в рецептуру в концентрации
целлюлозы
ным слоем
от 4 до 20%, предварительно тонПЭГ, ПВП,
Экструдеры:
ко размолов его, или получив чаSoluplus,
двухшнековые,
стицы; далее используют эмульполоксамер,
вальцовый
гирование в водной фазе, при
МКЦ
и поршневой
определенном
температурном
ПВП,
Сушилкарежиме,
с
применением
ПАВ.
растворимые
гранулятор
Наслоение
производные
с
псевдоожиженПример
технологии
изготовлена ядро (ядро
целлюлозы
ным слоем
может быть
ния: частицы воска с опредеГетерогенные
получено
ПВП,
ленным размером (зависит от
прямой
Аппарат
растворимые
размера частиц остальных вспопеллетизацией) барабанного типа производные
могательных веществ, вводимых
целлюлозы
в состав пеллет), смешивают с
Примечание. ПВП – пищевые волокна пшеничные; ПЭГ – полимер этиленгликоля;
МКЦ (50%), гидрофильным ЛВ
МКЦ – микрокристаллическая целлюлоза; ГПМЦ – гидроксипрорилметил целлюлоза.
52
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Обзор
(40–46%) и получают пеллеты методом экструзии-сферонизации.
Затем пеллеты подвергают термической обработке (обжиг при
температуре 100°С, время экспозиции – 140 с; причем температура должна превышать температуру плавления воска, что
обеспечивает более прочную и
однородную структуру пеллет
(расплавленный воск заполняет
полости), а также выход воска на
поверхность пеллет, увеличивая
ее гидрофобность и снижая уровень высвобождения гидрофильных ЛВ.
Мукоадгезивные
пеллеты применяются для пролонгации высвобождения ЛВ и
обеспечения его локального всасывания в ЖКТ. Для получения мукоадгезивных пеллет,
покрытых
пленочной
оболочкой, могут быть использованы следующие полимеры: гидроксипропилметилцеллюлоза (ГПМЦ), натрия альгинат, смесь ГПМЦ и карбопола,
натрия карбоксиметилцеллюлозы (натрия КМЦ). В качестве ядра можно использовать
сахарные сферы (Nonpareil 101,
Frenund); на них наслаивается
раствор ЛВ [2]. Полимеры наносятся в виде спиртового раствора с ПВП (пример связывающего вещества) в качестве
внешнего слоя с целью обеспечения адгезии [3]. При введении такой лекарственной формы в организм можно достичь
повышения биодоступности ЛВ
за счет адгезии на определенном
участке всасывания.
На современном рынке лекарственных препаратов представлены следующие пеллеты: ультоп
(омепразол) – пеллеты, покрытые оболочкой, помещенные в
твердую желатиновую капсулу;
агренокс – капсулы с модифицированным высвобождением,
содержащие таблетки ацетилсалициловой кислоты, покрытые
оболочкой; пеллеты дипиридамола и др.
Фармация №4, 2012
Таблица 3
ВВЕДЕНИЕ ЛЕКАРСТВЕННОГО ВЕЩЕСТВА
В ПЕЛЛЕТЫ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ИХ РАСТВОРИМОСТИ
Свойства ЛВ
Метод
введения
В сухом
виде
Гидрофильные
В
растворе
В сухом
виде
Гидрофобные
В
растворе
Используемые
вспомогательные вещества
Высвобождение
ЛВ из ЛФ
Растворимые производные целлюлозы, ПВП, полиолы
Обычное
Воск, липиды,
пектины, ПЭГ, производные
акриловой кислоты
Модифицированное
В сочетании со связывающим
веществом: КМЦ, МЦ, крахмал, ПВП; растворимые производные целлюлозы, полиолы
Обычное
Липиды, воск, пектины
Модифицированное
ПВП, ПЭГ (при соотношениях
с ЛВ 1:5 и более)
Модифицированное
Растворимые производные
целлюлозы, ПВП
Обычное
Органический растворитель,
производные целлюлозы,
ПВП, полиолы
Обычное
Органический растворитель,
ГПМЦ, ПМЦ, ПЭГ, производные акриловой кислоты
Модифицированное
Липиды, воск, пектины
Обычное,
модифицированное
Таблица 4
КЛАССИФИКАЦИЯ ПЕЛЛЕТ ПО ПРОФИЛЮ
ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ИЗ НИХ ЛЕКАРСТВЕННОГО ВЕЩЕСТВА
Классификация
пеллет
по модификации
высвобождения
Вид модификации
высвобождения
Методы
модификации
высвобождения
Ускоренное
высвобождение
Нанесение ТДС
(ЛВ в высокоаморфном состоянии)
на нейтральное ядро пеллет;
пеллеты, представляющие собой ТДС
Контролируемое
высвобождение
Сочетание слоев, содержащих
полимер, создающий осмотический
или диффузионный барьер,
и слоев с ускоренным
или нормальным высвобождением
Сочетание пеллет с различными
профилями высвобождения
Модифицированное
(сюда относятся
пеллеты
резервуарного
типа)
Нанесение полимерной
пленочной оболочки
Введение полимера, создающего
осмотический или диффузионный
барьер, в состав пеллет
Пролонгированное
высвобождение
Введение в состав пеллет
гидрофобных веществ (воска)
Применение техники обжига
при получении пеллет
Нанесение на поверхность пеллет
полимера, обладающего
мукоадгезивными свойствами
53
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Обзор
Выводы
1. Получение лекарственных форм с модифицированным высвобождением на основе пеллет – одно
из наиболее перспективных направлений.
2. Создание лекарственной формы на основе пеллет с модифицированным высвобождением характеризуется большим числом технологических подходов
и возможностей к изменению скорости и продолжительности высвобождения лекарственного вещества,
места его высвобождения, а также интенсивности
действия, что в конечном итоге влияет на терапевтическую эффективность препарата.
ЛИТЕРАТУРА
1. Алексеев К.В., Сизяков С.А., Блынская Е.В. и др. Современные
пленочные покрытия в технологии таблеток // Фармация. – 2009, №
8. – С. 45–49
2. Алексеев К.В., Кедик С.А., Грицкова И.А.. Полимеры для
фармацевтической технологии. – М.; 2010. – 509 с.
3. Алексеев К.В., Блынская Е.В., Сизяков С.А. Вспомогательные
вещества в технологии таблеток с модифицированным
высвобождением // Фармация – 2009, № 6. – С. 49–55.
4. Алексеев К.В., Блынская Е.В., Машутин А.Б. и др. Обоснование
выбора пленочных покрытий для таблеток с модифицированным
высвобождением // Человек и лекарство: материалы конференции
«Стратегия развития российской фармации» в рамках XV
Российского национального конгресса. – М., 2008. – С. 134–136.
5. Коржавых Э.А. Номенклатура лекарственных форм. – М., 2004. –
С.126.
6. Rao B.S., Seshasayana A., Himasankar K. Design and evaluation of
eudragit RL 100 sintered matrix tablets // Indian. J. Pharm. Sci. – 2004;
66: 202–207.
7. Pandey V.P., Kannappan N., Manavalan R., Subburaj T. Sustaining
pattern of phenformin hydrochloride using various polymers and waxes
// Boll. Chim. Farm. – 2002; 141: 361–366.
8. Reena S., Poddar S.S., Chivate A. Sintering of Wax for Controlling
Release From Pellets // Boll. Chim. Farm. – 2006; 211: 361–511.
9. Siepmann J., Peppas N.A. Modeling of drug release from delivery
systems based on hydroxypropyl methylcellulose (HPMC) // Adv. Drug
Deliv. Rev. – 2001; 48: 139–157.
SUMMARY
MODIFIED RELEASE PELLET-BASED DOSAGE FORMS
Professor K.V. Alekseyev, PhD; N.V. Tikhonova; E.V. Blynskaya, PhD;
V.K. Alekseyev, N.A. Uvarov, E.Yu. Karbusheva
V.V. Zakusov Research Institute of Pharmacology, Russian Academy
of Medical Sciences, Moscow
The paper gives information on the pharmaceutical technology of
incorporating the drug substances into pellets and their advantages
in the preparation of dosage forms with the given substances release
profile.
Key words: pellets, modified release, polymer coating.
Изучаем БАД
© Коллектив авторов, 2012
УДК 615.322:582.475.4]:615.451.16].07
ИССЛЕДОВАНИЯ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ
НАСТОЕВ СЫРЬЯ СОСНЫ КЕДРОВОЙ
СИБИРСКОЙ И БАД НА ЕГО ОСНОВЕ
А.И. Марахова1, канд. фарм. наук, Н.Н. Федоровский2, канд. хим. наук
1
Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова
2
Московский государственный университет технологий и управления им. К.Г. Разумовского
E-mail: [email protected]
Изучен качественный состав биологически активных веществ
почек, коры и хвои сосны кедровой сибирской; определено количественное содержание флавоноидов, дубильных веществ, аскорбиновой кислоты, эфирного масла и суммы органических кислот.
Для БАД «Масло сосны кедровой» установлены некоторые показатели, характеризующие качество жирного масла.
Ключевые слова: сосна кедровая сибирская, флавоноиды,
дубильные вещества, аскорбиновая кислота, эфирное масло,
органические кислоты, содержание, жирное масло.
ырье сосны кедровой сибирской издавна
широко применяется в народной медицине. Эфирное масло, получаемое из коры, использу-
С
54
ется как наружное средство при мышечных болях,
ревматизме. Его принимают внутрь при инфекциях мочевыводящих путей, простуде и пневмонии.
Смола сосны кедровой эффективна для лечения ран
как антисептическое и регенерирующее средство.
Хвоя сосны кедровой является сырьем для приготовления спиртовой настойки, используемой для
лечения и профилактики цинги, а также для растирания суставов при ревматизме, подагре, артритах.
Настои и отвары хвои кедровой сосны рекомендуют принимать при заболеваниях органов дыхания
как простудного, так и инфекционного характера:
бронхите, трахеите, воспалении легких, пневмонии, туберкулезе. Настойка почек сосны кедровой
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Изучаем БАД
назначается для лечения заболеваний дыхательных
путей, гиперацидных гастритов, язвенной болезни желудка. Из кедровых орехов производят масло,
эффективное для лечения ларингита и ОРЗ, псориаза, трофических язв, язв желудка и двенадцатиперстной кишки [2–4].
Несмотря на широкое применение в народной
медицине сырья сосны кедровой сибирской, недостаточно исследован его химический состав. Цель
настоящей работы – проведение качественного и количественного анализа хвои, коры и почек сосны кедровой сибирской и БАД на его основе.
масло – по методикам общих статей ГФ XI [1]. Согласно данным табл. 1, дубильными веществами богата кора сосны кедровой сибирской (4,61±0,04%), а
эфирным маслом – хвоя (3,67±0,03%).
В ходе проведенных исследований было выявлено, что наибольшее количество свободных органических кислот (2,76±0,03%) содержится в коре сосны кедровой сибирской, а аскорбиновой кислоты
(0,28±0,04%) – в хвое (см. табл. 1).
Сумму органических кислот рассчитывали с помощью потенциометрического титрования, для
этого извлечение объемом 50 мл титровали 0,1 М
раствором натрия гидроксида с помощью микробюретки. Для определения точки эквивалентности
строили кривые потенциометрического титрования
(рис. 2).
Содержание флавоноидов в хвое и почках сосны
кедровой сибирской определяли спектрофотометрически после реакции с хлоридом алюминия. Извлечение флавоноидов проводили трехкратной экстракцией 70% спиртом этиловым при соотношении сырья и
экстрагента 1:10. Максимумы поглощения в спектрах
комплекса флавоноидов спиртового экстракта хвои с
хлоридом алюминия и комплекса рутина с хлоридом
Экспериментальная часть
Объектом исследования служило свежее сырье
сосны кедровой сибирской – почки, кора и хвоя, собранные в апреле–мае 2009 г. (рис.1).
С использованием известных качественных реакций в сырье сосны кедровой сибирской подтверждено присутствие биологически активных веществ
(БАВ). Так, в коре, почках и хвое обнаружены флавоноиды, среди которых преобладают флаваноны
и флавонолы. Установлено наличие дубильных веществ и сапонинов, предположительно с преобладанием стероидной природы.
В коре выявлена смесь гидролизуемых и конденсированных дубильных веществ, в хвое
преобладают гидролизуемые дубильные вещества, в почках –
конденсированные дубильные
вещества.
Методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) в системе бензол – спирт этиловый – уксусная кислота (45:8:3) на пластинке
«Силуфол» с последующим детектированием спиртовым раствором алюминия хлорида в сырье сосны кедровой сибирской
Рис. 1. Внешний вид хвои, коры и почек сосны кедровой сибирской
установлено присутствие кверцетина.
Таблица 1
В водных извлечениях хвои
СОДЕРЖАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ (В %)
сосны кедровой сибирской опреВ СЫРЬЕ СОСНЫ КЕДРОВОЙ СИБИРСКОЙ
деляли содержание экстрактивных веществ, извлекаемых водой,
Биологически активные вещества
Почки
Кора
Хвоя
которое составило 22,2±0,3%.
Дубильные вещества
Определение
содержания
1,85±0,02
4,61±0,04
0,46±0,03
в пересчете на танин
аскорбиновой кислоты и суммы
Сумма флавоноидов
Определение
свободных органических кислот
0,075±0,002
0,48±0,02
в пересчете на рутин
не проводилось
в сырье сосны кедровой сибирЭфирное масло
1,85±0,02
1,10±0,02
3,67±0,03
ской проводили по фармакопейной методике (ст. «Плоды шиАскорбиновая кислота
0,16±0,02
0,09±0,01
0,28±0,04
повника», ГФ XI изд., вып. 2.);
Сумма свободных органических кислот:
содержание дубильных веществ
методика ГФ
0,84±0,03
2,76±0,03
1,20±0,02
потенциометрическое титрование
0,76±0,01
2,15±0,02
1,02±0,02
в пересчете на танин и эфирное
Фармация №4, 2012
55
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Изучаем БАД
pH
D
0,7
8
0,6
0,5
7
2
0,4
6
0,3
0,2
5
1
0,1
4
350
0,2
0,6
1,0
1,4
1,6 2,0
NaOH, мл
2,4
Рис. 2. Кривая потенциометрического титрования
свободных органических кислот хвои сосны кедровой
сибирской 0,1 М раствором натрия гидроксида
Таблица 2
ПОКАЗАТЕЛИ, ХАРАКТЕРИЗУЮЩИЕ
КАЧЕСТВО БАД «МАСЛО СИБИРСКОГО КЕДРА»
Показатель
Значение
Кислотное число
1,50±0,03 мл NaOH/мг
Число омыления
13,40±0,06 мл НCl/г
Эфирное число
Йодное число
Перекисное число
11,89±0,08 мг KOH/г
59,43±0,04 г I2/г
5,10±0,02 моль(1/2 О)/кг
алюминия (рис. 3) практически совпадали, поэтому
пересчет суммы флавоноидов осуществляли на рутин. Наиболее богатой флавоноидами (0,48±0,02%)
оказалась хвоя (см. табл. 1).
Для жирного масла, получаемого из семян сосны кедровой сибирской (БАД «Масло сибирского
кедра»), найдено значение кислотного числа, числа
омыления, эфирного числа и йодного числа (табл. 2).
Выводы
1. Проведен качественный и количественный
анализ билогически активных веществ почек, коры
и хвои сосны кедровой сибирской. Во всех анализируемых видах сырья определено содержание флаво-
56
400
λ, нм
450
500
Рис. 3. Спектр комплекса флавоноидов хвои
с хлоридом алюминия и спектр комплекса рутина
с хлоридом алюминия: 1 – спектр спиртового раствора
рутина с хлоридом алюминия; 2 – спектр флавоноидного
комплекса извлечения хвои с хлоридом алюминия
ноидов, дубильных веществ, аскорбиновой кислоты,
эфирного масла и суммы органических кислот.
2. Для БАД «Масло сосны кедровой» установлены некоторые показатели, характеризующие качество жирного масла.
ЛИТЕРАТУРА
1. Государственная фармакопея СССР, XI издание, вып. 1, 2 – М.:
Медицина, 1989, 1990. – 326 с., 400 с.
2. Иванова А. Лечение кедром и другими хвойными породами. –
Минск, 1999. – 266 с.
3. Соколов С.Я. Фитотерапия и фитофармакология. – М.: МИА,
2000. – 967 с.
4. Стикс В., Вайгерштофер У. В царстве запахов: эфирные масла и
их применение. – М.: Невеус, 2004. – 442 с.
SUMMARY
INVESTIGATIONS OF THE STANDARDIZATION OF INFUSIONS OF RAW
SIBERIAN STONE PINE (PINUS SIBIRICA) AND ITS DIETARY SUPPLEMENTS
A.I. Marakhova, PhD1; N.N. Fedorovsky, PhD2
1
I.M. Sechenov First Moscow State Medical University
2
K.G. Razumovsky Moscow State University of Technologies and
Management
The qualitative composition of the biologically active substances of
Siberian stone pine (Pinus sibirica) buds, bark, and needles was investigated; the levels of flavonoids, tannins, ascorbic acid, essential oils,
and sum of organic acids were measured. Some parameters characterizing the quality of the fatty oil were established for the dietary supplement «Kedar oil».
Key words: Siberian stone pine (Pinus sibirica), flavonoids, tannins,
ascorbic acid, essential oil, organic acids, content, fatty oil.
Фармация №4, 2012
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
70
Размер файла
5 902 Кб
Теги
7506
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа