close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Влияние иммуномодулятора Миксоферон на иммунитет коров при субклиническом мастите

код для вставкиСкачать
На правах рукописи
Сафонов Михаил Михайлович
Влияние иммуномодулятора «Миксоферон» на иммунитет коров при
субклиническом мастите
06.02.06. – Ветеринарное акушерство и биотехника репродукции животных
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
кандидата ветеринарных наук
Москва – 2015
1
Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном
учреждении высшего образования «Московская государственная академия
ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина» на
кафедре акушерства, гинекологии и биотехники репродукции животных
(ФГБОУ ВО МГАВМиБ – МВА имени К.И. Скрябина)
Научный руководитель:
Дегтярев Владимир Павлович академик
РАН,
доктор биологических наук,
профессор
Официальные оппоненты:
Племяшов Кирилл Владимирович доктор
ветериннарных наук, профессор, зав.
кафедрой акушерства и оперативной
хирургии ФГБОУ ВПО СПГАВМ
Лобадин Константин Алексеевич доктор
ветеринарных наук, профессор, зав.
кафедрой акушерства и физиологии ФГОУ
ВПО «Воронежский ГАУ им. Императора
Петра 1»
Ведущая организация:
ФГБОУ ВО «Саратовский государственный
аграрный университет им. Н.И. Вавилова
Защита состоится «__»_______2015 года в 12.00 часов на заседании
диссертационного совета Д 220.042.05 при Федеральном государственном
образовательном
учреждении
высшего
образования
«Московская
государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА
имени К.И. Скрябина» по адресу: 109472, г. Москва, ул. Академика
Скрябина, 23; Тел.: (495) 377-93-83.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВО
«Московская государственная академия ветеринарной медицины и
биотехнологии – МВА имени К.И. Скрябина»
Автореферат размещён на сайте ВАК [email protected]
Автореферат разослан «__»________2015 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета
Л.А. Волчкова
2
1. Общая характеристика работы
Актуальность темы. Обеспечение продовольственной независимости
населения России, снижение потребления импортных продуктов питания,
является одной из приоритетных задач нашей экономики.
Маститы у коров распространены широко, экономически значимы, и
имеют социальное значение и представляют серьезную угрозу здоровью и
жизни человека.
Одним из важнейших факторов, ухудшающих качество молока и
снижающих продуктивность молочного скотоводства, является заболевание
коров маститом.
По данным Всемирной организации ветеринарного здравоохранения,
мастит приносит значительно больший ущерб молочному скотоводству, чем
все болезни коров вместе взятые. В некоторых случаях экономические
потери от этого заболевания значительно превышают убытки, причиняемые
другими болезнями (В.С. Авдеенко, 2014; Д.Д. Логвинов, 1979; Ю.М. Огнев,
1983; О.О. Надточий, 1987; В.М. Каратова, А.И. Ивашура, 1988; В.И. Беляев,
1990; А.И. Ивашура, 1991; А.П. Подберезный, Н.И. Поленцев, 1994;
Л.К.Попов, Ю.Д. Попов, 1997; И.А. Порфирьев, А.М. Петров, 2009; Б.Л.
Белкин, Л.А. Черепахина, В.М. Сотникова, 2009; Е.С. Воронин, А.М. Петров,
2007, С.В. Федотов, 2014).
К примеру, ежегодно в Великобритании выделяется – 32% коров с
субклиническим маститом. В Швеции – 28%, в Индии – 54% в Нидерландах
– 15%. В Германии около 60% случаев появления мастита регистрировалось
в зимние месяцы (F.Meyer, 1988; P.S. Chondhuri, 1988; A. Phelps, 1989; C.
Knothe, 1989).
Он вызывает преждевременную выбраковку коров вследствие атрофии
пораженных маститом четвертей вымени, недополучение молока, телят,
ухудшение биологических и технологических качеств молока, увеличение
заболевания телят при выпойке их молозивом или молока от больных
маститом животных и т.д.
По данным В.М. Юркова, Л.Д. Демидовой (2002), достичь
полноценного питания страны без молока невозможно. Молоко содержит все
необходимые питательные и биологически активные вещества. Из молока
выделено более 250 химических компонентов, в том числе 140 различных
жирных кислот.
Согласно статистике Международной Молочной Федерации, маститом
ежегодно болеют 25% коров, а по данным ФГУ «Центр ветеринарии» форма
2 вет., мастит поражает до 50% коров дойного стада; причем в 95% случаев
приходится на долю субклинического мастита в период лактации коров.
До сих пор все еще слабо исследована эффективность комплексного
применения иммуностимуляторов при лечении скрытых маститов. В
настоящее время субклинические маститы, вызывают вторичные
иммунодефициты в организме животного (Н.Н. Озерцовская, 1995). В
последние годы вырос интерес к иммунотерапии маститов коров, что
3
способствует повышению иммунологической реактивности организма
животных (С.Н. Веденеев, 2005; Е.С. Воронин, А.М. Петров, 2007).
Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось
изучение показателей иммунитета у больных субклиническим маститом
коров, а также изучение динамики иммунных реакций у животного в разные
периоды развития этой болезни и в процессе выздоровления животного.
Изучить целесообразность использования применяемого нами
препарата, для коррекции параметров иммунитета у коров при маститах, а
также возможность использования данного препарата в качестве лечебнопрофилактического средства при данном заболевании.
Исходя из этого, были поставлены следующие задачи:

Изучить распространенность субклинических маститов у
коров в период лактации в Тверской и Воронежской областях;

Исследовать состав микрофлоры в молоке коров при
субклиническом мастите;

Изучить содержание соматических клеток в молоке коров
при субклиническом мастите;

Изучить состояние основных параметров иммунитета у коров при
маститах;

Изучить динамику показателей иммунитета у коров в различные
периоды течения болезни;

Определить возможность фармакоррекции основных параметров
иммунитета с использованием иммуномодулятора Миксоферона®;

Разработать практические предложения по организации лечебнопрофилактических мероприятий при субклинических маститах у коров с
использованием иммуномодулятора Миксоферона®.
Научная новизна. Впервые провели комплексный сравнительный
анализ показателей иммунитета у молочных коров, больных субклиническим
маститом, в различные периоды течения болезни. Выявили наиболее
характерные показатели иммунной системы, которые отражают состояние
организма животных при данном заболевании.
Разработали и внедрили метод стимуляции иммунных реакций,
протекающих в организме коров при данной патологии с использованием
нового иммуномодулятора Миксоферона®.
Установили, что лечение животных медикаментозными различными
препаратами
с
одновременным
использованием
вышеуказанного
иммуномодулятора способствует более быстрому выздоровлению животных,
а также восстановление в кратчайшие сроки их продуктивных качеств.
Теоретическое и практическое значение работы. Результаты
исследований показателей иммунитета позволяют прогнозировать развитие и
исход маститов, способствуют восстановлению продуктивности животных.
Нами впервые было определено содержание в крови Т- и В-лимфоцитов,
уровень фагоцитарной активности нейтрофилов крови в разные периоды
течения болезни, а также содержание в сыворотке крови иммуноглобулинов
4
классов G и M, лизоцима, определена бактерицидная активность сыворотки
крови коров при субклиническом мастите.
На основании проведенных исследований нами разработаны
практические предложения по активизации иммунных реакций,
протекающих в организме коров при маститах, с использованием
иммуномодулятора Миксоферона®.
Апробация работы. Основные теоретические положения и результаты
докладывались на Международной научно-практической конференции
«Проблемы увеличения производства продуктов животноводства и пути их
решения» в ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт
животноводства (ВНИИЖ) 21-23 октября 2008 г., Дубровицы, на
Международных научно-практических конференциях ФГОУ ВПО
«Московская государственная академия ветеринарной медицины и
биотехнологии имени К.И. Скрябина» (2008-2010 гг.), на Международной
научно-практической конференции «Повышение конкурентоспособности
животноводства, задачи кадрового обеспечения» Российская академия
менеджмента в животноводстве, 17 июня 2010 г. (п.Быково, МО), на
Всероссийской конференции ЗАО «Мосагроген» 5 ноября 2009 г. «О влиянии
иммуномодулятора Миксоферона, при лечении коров и свиней».
Основные положения, выносимые на защиту:

Распространение и формы проявления мастита у коров в
Тверской и Воронежской областях;

Результаты изучения иммунитета у коров при субклиническом
мастите;

Влияние иммуномодулятора Миксоферона® на параметры
иммунитета у коров при маститах;

Возможность использования иммуномодулятора Миксоферона®
в комплексе с другими препаратами для лечения коров, больных
субклиническим маститом;
Рекомендации по комплексному лечению коров, больных маститами,
на основе активизации основных параметров их иммунитета с
использованием иммуномодулятора «Миксоферона®» по предложенной
нами схеме и в указанных нами дозах.
Степень достоверности и апробация результатов исследований.
Основные положения, заключение и рекомендации, сформулированные в
диссертации, отвечают цели и задачам работы, при этом логически вытекают
из представленного материала. Обоснованность и достоверность
подтверждается большим объемом исследований, проведенных на
современном уровне со статистической обработкой данных. Основные
теоретические положения и результаты докладывались на Международной
научно-практической конференции «Проблемы увеличения производства
продуктов животноводства и пути их решения» в ГНУ Всероссийский
научно-исследовательский институт животноводства (ВНИИЖ) 21-23
октября 2008 г., Дубровицы, на Международных научно-практических
5
конференциях ФГОУ ВПО «Московская государственная академия
ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина» (2008-2010
гг.), на Международной научно-практической конференции «Повышение
конкурентоспособности животноводства, задачи кадрового обеспечения»
Российская академия менеджмента в животноводстве, 17 июня 2010 г.
(п.Быково, МО), на Всероссийской конференции ЗАО «Мосагроген» 5 ноября
2009 г. «О влиянии иммуномодулятора Миксоферона®, при лечении коров и
свиней».
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 научных
статей, в том числе 2 работы в рецензируемых журналах ВАК.
Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 115
страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы,
собственных исследований, обсуждение полученных результатов, выводов,
практического
использования
полученных
научных
результатов,
рекомендаций по использованию научных выводов, списка используемой
литературы (156 источников, в том числе 47 зарубежных источников). Работа
содержит 31 таблицу, 6 рисунков и 2 страницы приложения.
2. Собственные исследования
2.1 Материалы и методы исследования
Исследования по теме диссертации проведены с 2007 по 2010 гг. на
кафедре акушерства, гинекологии и биотехники репродукции животных
ФГОУ ВПО МГАВМиБ, а также в ЗАО «Калиниское» Калининского района
Тверской области и ООО «Бородино» Терлецкого района Воронежской
области.
С целью изучения эффективности лечения вышеуказанной патологии с
использованием иммуномодулятора Миксоферона® по принципу аналогов
(живая масса, продуктивность, время после отела), были подобраны в двух
хозяйствах группы животных: ЗАО «Калиниское» - 78 голов; ООО
«Бородино» - 62 головы.
Диагноз установили на основании показаний многофункционального
аппарата «Экотест-303» (Эконикс®) сигнализатором мастита.
Таблица 1
Общая схема исследований
Название
хозяйства
ЗАО
«Калиниское»
ООО
«Бородино»
I
Контрольная
группа
II
опытная
группа
III
Опытная
группа
20
30
28
22
30
32
Мастит определяли с помощью – многофункционального
сигнализатора мастита («Экотест-303П») он предназначен для контроля
6
наличия мастита в молоке на потоке непосредственно в процессе дойки
коров. Прибор использует сравнительный метод анализа электропроводности
молока из разных долей и сигнализирует о пораженной доле вымени на
самой ранней стадии развития мастита. Информация о первых признаках
воспаления может быть получена за 1-4 дня до появления видимых
изменений. Для повышения надежности диагностики мастита может
использоваться второй вспомогательный метод контроля наличия мастита:
по температуре поступающего в коллектор молока. Сигнализатор может
быть связан с вышестоящей системой управления, для чего имеет
изолированный выход в виде замыкающего контакта. Четыре канала
измерения электропроводности для реализации сравнительного метода
параметров молока по 4-м долям. Индикация результатов анализа с помощью
ярких светодиодов; зеленый-красный по каждой из 4х долей и красный при
срабатывании выходного реле.
На лицевой панели прибора имеются 4 лунки, со встроенными
светодиодами. Индикация датчиков о наличии мастита в молоке происходит
моментально посредством высвечивания соответствующих цветовых
индикаторов на лицевой панели прибора после нажатия на кнопку
управления:

«зеленый» свет – норма.

«желтый» свет – субклинический мастит.

«красный» свет – клинический и хронический мастит.
На основании применяемых лекарственных средств перед постановкой
основного эксперимента сформировали следующие группы животных:
1-я контрольная группа (здоровые животные) – 20 и 22 соответственно.
Традиционная схема лечения коров больных маститом.
2-я опытная группа: 30 коров в обоих хозяйствах, больных
субклиническим маститом. Для их лечения использовали:
Фармоксидин – вводили 20 мл/голова подкожно два раза в сутки;
витамин Активин – вводили 0,25 мг/на 10 кг живой массы подкожно – 2 раза
в день; пробиотик «Субтилис» - 300 г/тонну корма или воды, ежедневно в
течение 7 дней.
3-я опытная группа. ЗАО «Калиниское» - 28 голов, ООО «Бородино» 32 головы. Третьей опытной группе, вводили те же лекарственные препараты
(кроме Фармоксидина), применяли Миксоферон в дозе 5 мл (50 доз) два раза
в сутки внутримышечно. Лекарственные препараты вводили в течении 7 дней
– 1 этап; 14 дней – 2 этап; 30 дней – 3 этап.
Используемые лекарственные препараты:
Миксоферон® - единственный отечественный интерферон для
животных (ЗАО «Мосагроген»), лекарственное средство для животных,
представляющее собой смесь белков интерферона альфа 2b, фосфатных
солей натрия и калия в качестве стабилизаторов и реополиглюкина в
качестве наполнителя. Препарат представляет собой порошок или пористую
массу от белого до коричневого цвета.
7
Миксоферон® - обладает противовирусным и иммуномоделирующим
действием. Подавляет размножение как ДНК-, так и РНК-содержащих
вирусов, ингибируя экспрессию вирусных генов. Иммуномоделирующее
действие интерферона включает воздействие на клеточные звенья иммунной
системы: стимулирует литическую активность лимфоцитов, специфических
цитотоксических Т-лимфоцитов и макрофагов, влияет на образование
специфических антител В-лимфоцитами, регулирует экспрессию антигенов
KLA на мембранах клеток и стимулирует выработку собственного
интерферона альфа(2b), автор ЗАО «Мосагроген».
Миксоферон® в терапевтических дозах хорошо переносится
животными,
не
оказывает
местно-раздражительного.
А
также
эмбриотоксического, терапевтического мутагенного и сенсибилизирующего
действия.
Миксоферон® – применяют с профилактической и лечебной целью, его
вводят внутримышечно или подкожно в форме стерильного раствора,
приготовленного из расчета (1 лечебная доза в 1мл. растворителя), что
соответствует 100000 МЕ суммарной противовирусной активности.
Препарат также совместим с любыми химиотерапевтическими
препаратами, витаминами А, D, E, B, B2, B5, B6, B12, PP, Ba, H, C,
незаменимыми аминокислотами, а также каратиноидами.
У коров молочного направления применение Миксоферон® показало
высокую эффективность при различных патологиях кожи вымени
(папилломатозе сосков) у молочных коров. Срок выздоровления с
сохранением функции сосков составляет 6-10 дней.
Интерфероны имеют ряд преимуществ по отношению к другим
противовирусным средствам, они обладают широким спектром
антивирусной активности и не вызывают формирование резистентных форм
вирусов (В.И. Воронин, А.М. Петров, М.М. Серых, 2002).
Фармоксидин® (Pharmoxidin) – лекарственное средство для животных,
в 1мл которого содержится 10мг гидросиметилхиноксилиндиоксида, а также
нипагин и вода для инъекций.
Фармоксидин® – антибактериальный химиотерапевтический препарат
широкого спектра действия, активен в отношении грамотрицательных,
грамположительных патогенных и условно-патогенных аэробных и
анаэробных микроорганизмов спорообразующих и неспорообразующих
видов.
Фармоксидин® избирательно ингибирует синтез ДНК в микробной
клетке, влияя на синтез РНК и белка, вызывает структурные изменения
клеточной стенки бактерий, подавляет активность внеклеточной
бактериальной нуклеазы и α-токсина. Применяется для лечения маститов
крупного рогатого скота.
Пробиотик «Субтилис®» применялся нами с питьем или кормом (300
г/тонна). Обладает высоким свойством кормовых антибиотиков, которые
используются в животноводстве и птицеводстве, т.к. в Европе кормовые
антибиотики запрещены.
8
Заменитель кормовых антибиотиков «Субтилис®» применяется для
профилактики и лечения заболеваний, вызываемых патогенными и условнопатогенными организмами и грибками (сальмонеллой, кишечной палочкой,
аэромонадами, псевдомонадами и др.).
Витамин «Активин» - масленый витамин, куда входят комплекс
витаминов (C, E, A, B, D3) и др.
Определение количества Т-лимфоцитов в периферической крови
проводили согласно по Л.К. Эрнста (1998) с использование антииммунных
сывороток крс.
Определение субпопуляций лимфоцитов производим электронноавтоматическим методом с использованием аппарата «Культер» (Gen-S),
способного производить дифференциальный подсчет лейкоцитов, включая Тхелперы и Т-супрессоры на основе VCS технологии (изменение объема,
радиочастотных параметров и лазерного светорассеивания).
Фагоцитарную
активность
нейтрофилов
определяли
модифицированным методом Лейрида с использованием взвеси суточной
культуры E.coli шт. 020 по методу В.М. Бермана, Е.М. Славской (1958).
Концентрацию лизоцима в сыворотке крови определяли с использованием
ацетонового порошка Micrococcus Lysodeicticus относительно стандартного
кристаллического лизоцима в концентрации от 0,5 до 100 мкг/мл по E.
Ossepman, D. Lawtor (1966).
Количественное определение иммуноглобулинов G и M классов в
сыворотке крови коров проводили в реакции простой радиальной
иммунодиффузии по методу Мончини (1965).
Определение бактерицидной активности сыворотки крови проводили
измерением степени задержки прироста биомассы E.coli 020 под влиянием
сыворотки фотоколометрическим методом при зеленом светофильтре.
Данные результатов исследований обрабатывали по Мишелю и
Трефферу (1956) вариационной статистики. Достоверными считались
различия при значениях P<0,05.
Для проведения иммунологических исследований пробы крови
отбирали в утренние часы до кормления и лечения, а затем на 7, 14, 30-е
сутки после лечения.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Заболеваемость данных коров маститом в ЗАО «Калининское»
Тверской области (2008-2010 г.) составила от 29 до 73 %. При этом
клиническую форму мастита установили у 15% коров.
В ООО «Бородино» Воронежской области клиническая форма мастита
выявлена у 18% коров, а субклиническая – соответственно у 78% животных.
Микробиологическими исследованиями секрета молока, коров больных
субклинической формой мастита было установлено 50-78,9% различной
микрофлоры в основном в форме их ассоциаций (стафилококки,
9
стрептококки, кишечная палочка, синегнойная палочка, вульгарный протей и
др.)
Нами было установлено в молоке коров при субклинической форме
маститаповышенное содержание соматических клеток более 500-700
тыс./см3. Молоко имело щелочную реакцию pH – 7,8-8,0.
Таблица 2
Т+О-лимфоцитов в крови у подопытных коров (тыс/мкл)
Сроки
исследова
ний
До
лечения
ЗАО «Калининское»
ООО «Бородино»
Контроль
II
III
Р
II
III
Р
1.688±0.2109
1.711±0.2167
Р<0.05
1.705±0.1181
1.713±0.2100
Р<0.05
2.150±0.24
7-е сутки
1.457±0.4947
2.051±0.3107
Р<0.05
1.501±0.4911
2.013±0.3104
Р>0.05
2.160±0.27
14-е сутки
1.731±0.4030
2.315±0.6467
Р<0.05
1.700±0.4018
2.311±0.5961
Р>0.05
2.110±0.31
30-е сутки
1.810±0.2414
2.330±0.4013
Р<0.05
1.803±0.2444
2.300±0.4005
Р>0.05
2.117±0.25
Из данных таблицы №2 видно, что у животных 2 и 3-й опытных групп
содержание Т-лимфоцитов в крови до лечения было на 20% ниже (Р<0.05),
чем у контрольных животных.
Это, вероятно, указывает на снижение показателей иммунитета во
время болезни. У животных 2-й группы содержание Т-лимфоцитов
достоверно снижалось (Р<0.05) в процессе лечения и к 7 дню было на 31%
ниже по сравнению с животными контрольной группы. Из результатов
исследования видно, что существенная разница (14%) в содержании Тлимфоцитов у животных 2-й группы сохраняется некоторое время и после
выздоровления животных.
Через 7 дней после начала курса лечения у животных 3-й (опытной
группы) отмечаем увеличение Т-лимфоцитов до средних величин,
характерных для здоровых животных.
Из таблицы №3 видно, что у животных 2-й и 3-й группы содержание Тхелперов до лечения было достоверно ниже (Р<0.05) на 17%, чем у
контрольных животных (здоровых). Это указывает на снижение показателей
Т-хелперов во время болезни. У животных 2-й группы, содержание Тхелперов незначительно повышалось в процессе лечения и к 7 дню было на
12% ниже по сравнению с животными контрольной группы.
Существенная разница (10%) в содержании Т-хелперов у животных 2-й
группы сохраняется некоторое время и после выздоровления животных.
Через 14 дней после начала курса лечения у животных 3-й группы мы
наблюдаем увеличение содержания Т-хелперов до средних величин,
характерных для здоровых животных, что по нашему мнению, указывает на
благотворное влияние Миксоферон® на иммунную систему в процессе
болезни.
10
Таблица 3
Динамика содержания Т-лимфоцитов (хелперов, помощников) в
крови подопытных коров контрольной и опытных групп
Сроки
исследова
ний
ЗАО «Калининское»
Группы лечения
контроль
II
III
До
лечения
7-е сутки
14-е сутки
30-е сутки
ООО «Бородино»
Группы лечения
Р
контроль
II
III
Р
Р<0.05
Р<0.05
Р<0.05
Р>0.05
Р<0.05
Р>0.05
Р<0.05
Р>0.05
В конце исследования при клиническом выздоровлении животных у
коров 2-й опытной группы, которых лечили, с добавлением фармоксидина,
содержание Т-хелперов было на 9,5% ниже, чем у здоровых животных 3-й
опытной группы этот показатель приблизительно был равен к норме (34,1%)
Р>0.05.
Таблица 4
Динамика фагоцитарной активности нейтрофилов крови (%)
Сроки
исследова
ний
До лечения
7-е сутки
14-е сутки
30-е сутки
ЗАО «Калининское»
Группы лечения
контроль
64.71
65.11
66.54
65.31
II
66.21
65.9
64.7
63.3
ООО «Бородино»
Группы лечения
Р
контроль
II
III
Р
67.89
Р>0.05
63.11
66.71
67.91
Р>0.05
68.01
Р>0.05
64.71
65.90
68.20
Р>0.05
66.77
Р<0.05
65.33
64.71
67.11
Р>0.05
65.94
Р<0.05
64.91
63.01
65.49
Р>0.05
III
Фагоцитарная активность нейтрофилов крови у животных 2й и 3й
опытных групп до начала лечения была незначительно выше (Р<0.05), чем в
контроле. В конце лечения при клиническом выздоровлении у коров 2й
опытной группы фагоцитарная активность была на 5% ниже (Р<0.05), чем у
здоровых животных, 3й опытной группы этот показатель был на уровне
нормы (66.28).
Из таблицы №5 видно, что животные 2й и 3й опытных групп
содержание лизоцима до лечения было на 23% выше (Р<0.05), чем в
контроле. Это указывает на острую стадию заболевания маститом и высокую
активность лизоцима (как фактора воспаления) в подавлении патогенной
микрофлоры.
11
Таблица 5
Динамика содержания лизоцима в сыворотке крови коров (мкг/мл)
Сроки
исследова
ний
До лечения
7-е сутки
14-е сутки
30-е сутки
ЗАО «Калининское»
Группы лечения
контроль
36.11
35.41
35.91
36.40
II
44.69
41.31
39.27
27.81
III
44.90
40.90
41.11
36.17
ООО «Бородино»
Группы лечения
Р
контроль
II
III
Р
Р<0.05
36.00
43.99
44.21
Р<0.05
Р>0.05
35.00
40.70
39.90
Р>0.05
Р>0.05
35.09
38.11
41.20
Р>0.05
35.99
28.01
35.96
Р>0.05
Р<0.05
В конце исследования при клиническом выздоровлении у коров 2й
опытной группы, которых лечили фармоксидином, концентрация лизоцима
была на 21% ниже (Р<0.05), чем у здоровых особей 3й опытной группы этот
показатель приблизился к норме (35.96±0.20) и находился на постоянном
уровне.
Таблица 6
Динамика содержания иммуноглобулинов G в сыворотке крови
коров (мг/мл)
Сроки
исследова
ний
ЗАО «Калининское»
Группы лечения
ООО «Бородино»
Группы лечения
контроль
II
III
Р
контроль
II
III
Р
До лечения
7-е сутки
15.67±0.20
12.11±1.17
12.18±0.91
15.00±0.11
12.10±1.12
12.10±0.10
Р<0.05
14.72±0.71
11.43±0.50
13.29±0.23
Р<0.05
Р<0.05
14.11±0.60
11.73±0.41
13.40±0.21
Р>0.05
14-е сутки
30-е сутки
14.60±0.36
10.68±0.64
15.30±0.70
Р<0.05
14.11±0.3
10.91±0.71
15.70±0.81
Р>0.05
14.39±0.19
10.61±1.03
14.77±0.91
14.40±0.17
10.71±1.04
14.90±0.90
Р>0.05
Р<0.05
Анализируя таблицу №6, видим, что у животных 2й и 3й опытной
групп, содержание иммуноглобулинов G до лечения было на 22% ниже, чем
у контрольных особей (Р<0.05), у коров 2й группы, содержание
иммуноглобулинов G достоверно (Р<0.05)снижалось в процессе
исследования и к 30 дню было на 27% ниже по сравнению с контрольной
группой. У особей 3й группы этот показатель повышался, и к 30 дню лечения
составил (14.90±0.90) и (14.77±0.91)
Таблица 7
Динамика содержания иммуноглобулинов M в крови коров (мг/мл)
Сроки
исследова
ний
ЗАО «Калининское»
Группы лечения
ООО «Бородино»
Группы лечения
контроль
II
III
Р
контроль
II
III
Р
До лечения
7-е сутки
6.40±0.41
5.16±0.61
5.29±1.01
5.27±0.49
5.30±1.01
Р<0.05
4.70±0.72
5.80±0.70
Р<0.05
Р<0.05
6.39±0.27
5.60±0.31
5.47±0.31
4.60±0.73
5.90±0.79
Р>0.05
14-е сутки
30-е сутки
4.50±0.81
3.61±0.69
6.91±0.73
Р<0.05
4.30±0.70
3.64±0.70
6.99±0.41
Р>0.05
4.12±0.71
3.10±0.31
4.51±0.81
4.10±0.25
3.09±0.27
4.56±0.61
Р>0.05
Р<0.05
12
Из таблицы №7, видно, что содержание иммуноглобулинов V у
животных 2й и 3й групп до начала лечения было ниже, чем в контрольных
группах (Р<0.05). У коров 3й опытной группы, которым вводили
Миксоферон®, содержание иммуноглобулинов М в сыворотке крови
незначительно снижалось в процессе исследования и к 30 дню составило
(4.51±0.81) и (4.56±0.61) соответственно. Тогда как у животных 2й опытной
группы, которых лечили, с применением фармоксидина, этот показатель
(3.10±0.31) и (3.09±0.27) соответственно, оказался достоверно (Р<0.05) ниже
уровня характерного для здоровых животных. Таким образом, из таблиц №5
и №6 видно, что содержание иммуноглобулинов классов G и M в сыворотке
крови больных маститом коров было значительно ниже, чем у здоровых
особей. В процессе лечения у коров 2й опытной группы содержание
иммуноглобулинов классов G и M осталось достоверно низким в течение
всего периода исследования (30 суток).
Использование для лечения коров 3й опытной группы, применение
нового препарата иммуномодулятора Миксоферон® показало его высокую
эффективность, что нашло отражение в увеличении содержания
иммуноглобулинов классов G и M в сыворотке крови, особенно к концу
второй недели после начала лечения, а к 30 суткам данные показатели были
на уровне здоровых животных. У коров 3й опытной группы к концу 30-х
суток наступило полное выздоровление, они быстрее приходили в охоту и к
60-дневному сроку после отела были оплодотворены.
Таблица 8
Динамика содержания Т-супрессоров в крови коров)
Сроки
исследова
ний
До
лечения
7-е сутки
14-е сутки
30-е сутки
ЗАО «Калининское»
Группы лечения
контроль
II
III
ООО «Бородино»
Группы лечения
Р
контроль
II
III
Р
Р<0.05
Р<0.05
Р<0.05
Р<0.05
Р<0.05
Р>0.05
Р<0.05
Р>0.05
Из данных таблицы №8 видно, что у животных 2й и 3й опытных групп
содержание Т-супрессоров до лечения было на 36% выше (Р<0.05), чем у
контрольных
животных.
Это
указывает
на
явно
выраженное
перераспределение субпопуляций в результате воспалительного процесса в
вымени после родов. У животных 2й опытной группы содержание Тсупрессоров в процессе лечения оставалось постоянным и к 7 дню было
значительно выше по сравнению с животными контрольной группы (Р<0.05).
13
Как видно из результатов исследований существенная разница в содержании
Т-супрессоров у коров 2й опытной группы сохраняется некоторое время и
после выздоровления животных, через 14 дней после начала курса лечения у
коров 3й опытной группы мы наблюдаем все еще снижение содержания Тсупрессоров до величин (Р>0.05), характерных для здоровых животных, что
вероятно связано с воздействием Миксоферон® на иммунную систему
животных.
Так, в результате наших исследований установлено, что у больных
маститом коров выявлены следующие нарушения: на фоне снижения Тпопуляций лимфоцитов отмечено перераспределение субклассов в пользу
увеличения Т-супрессоров и снижения Т-хелперов.
Отмечено увеличение уровня лизоцима на 20% (Р<0.05) у больных по
сравнению со здоровыми особями.
Снижение количества Т-лимфоцитов, фагоцитов и концентрации
иммуноглобулинов
свидетельствуют
о
развитии
вторичного
иммунодефицита в организме коров, больных субклиническим маститом.
Проведенные исследования показали, что в изученных нами
параметрах иммунитета существуют определенные отклонения.
Особенно они проявляются в начале заболевания и не приходят в
норму к моменту выздоровления коров.
Так, например, начиная с 6го дня после отела отмечена тенденция
снижения уровня Т-лимфоцитов, фагоцитарной активности сыворотки крови,
особенно это заметно в начале болезни сразу же после отела коров.
Таким образом, в процессе развития болезни при традиционных
способах лечения (II группа) уровень показателей иммунитета остается
достоверно низким, что является неблагоприятным прогностическим
фактором в выздоровлении животных.
Так, полученные нами данные свидетельствуют о постоянном низком
уровне Т-лимфоцитов (II группа) в течении всего периода заболевания после
отела коров, на 21% (Р<0.05). Вероятно, это свидетельствует о
напряженности лимфопоэза и развитии иммунодефицитного состояния
клеточного звена иммунитета у животных II группы с традиционным
способом лечения больных животных (Т-лимфоциты).
Анализируя данные, отражающие характер изменений в иммунной
системе животных при данной патологии, таких как бактерицидная и
лизоцимная активность сыворотки крови, фагоцитоз нейтрофилов, следует
сказать о том, что повышение этих показателей в периоды после отела при
субклинических маститах следует расценивать как адаптационную реакцию,
носящую компенсаторный характер на фоне ослабления на специфических
факторов защиты организма коров.
Анализируя полученные данные по изучению состояния иммунитета у
коров в разные периоды заболевания после отела, можно сделать общий
вывод о снижении механизмов иммунной защиты организма коров в период
после отела, что и обуславливает возникновение субклинических маститов,
так-как за условно-патогенной микрофлоры ослабляется надзор со стороны
14
иммунной системы. Кроме того, это позволяет в определенной степени
обоснованно трактовать последовательность развития иммунных реакций и
высокой эффективности при лечении коров, больных субклиническим
маститом, с использованием иммуномодуляторов и в частности
Миксоферон®.
Как показали проведенные нами исследования, из числа коров 3й
опытной группы в течение 3х месяцев плодотворно осеменилось 70%.
Средняя продолжительность лечения у животных данной группы составила
8,4 дня, у животных 2й опытной группы соответственно – 10,9 дня. Средняя
продолжительность сервис-периода у животных 2й опытной группы была-97,
и у коров 3й опытной группы – 61 день соответственно и оплодотворенность
составила 78%.
Таким образом, применение Миксоферон® показало его высокую
лечебно-профилактическую эффективность и возможность использования
его с целью фармакоррекции иммунодефицитных состояний при
субклинических маститах у коров, что позволяет рекомендовать данный
препарат к его широкому внедрению в акушерско-гинекологической
практике.
4. Выводы
1. Выявили, что в ЗАО «Калининское» Калининского района Тверской
области в течение года заболеваемость коров маститом составляла 15%, ООО
«Бородино» – 18% от общего поголовья животных и возрастает
пропорционально возрасту и увеличению продуктивности.
В ЗАО «Калининское» удой на фуражную корову в 2010 г. составил
8700 кг молока, ООО «Бородино» – 7800 кг молока.
При этом у коров нарушается воспроизводительная функция,
снижается оплодотворяемость, увеличивается сервис-период и межотельный
период, снижается выход телят, что наносит значительный экономический
ущерб обоим хозяйствам.
2. Доказали, что из четвертей вымени больных маститом коров
выделяется в основном микрофлора (50,0-78,9%) в форме ассоциаций
(стафилококки, стрептококки, кишечная и синегнойная палочки, вульгарный
протей) с высокой степенью устойчивости к большинству известных
антибиотиков.
3. Выявили, что в начале заболевания послеродовые маститы
возникают на фоне иммунодефицитного состояния, развивающегося после
отела и характеризующегося снижением количества Т- и В-лимфоцитов в
крови животных.
Снижение Т-лимфоцитов на 20%, В-лимфоцитов – 21% по сравнению
со здоровыми животными в послеродовый период.
4. Обнаружили, что до лечения у коров, больных субклиническим
маститом, отмечается увеличение в 2,5-3,0 раза содержания нейтрофилов в
15
крови, а также усиление фотоцитарной активности нейтрофилов по
сравнению со здоровыми животными. На наш взгляд, это связано с острой
фазой течения болезни. В процессе лечения у животных 2-й опытной группы
(обоих хозяйств), где применялся традиционный способ (формаксидин)
фагоцитарная активность со второй недели лечения постепенно снижалась в
течение всего курса лечения.
5. Доказали, что у коров, больных субклиническим маститом, в начале
заболевания содержание лизоцима было на 14,6% выше, чем у здоровых
животных. Это указывает на острую фазу заболевания и усиление активности
лизоцима как фактора неспецифической резистентности в подавлении
патогенной микрофлоры. В то же время у животных 2-й опытной группы, где
применялся традиционный способ лечения (формаксидин), содержание
лизоцима в сыворотке крови постепенно снижалось и к 30 дню составило
27,1 мкг/мл.
6. Выяснили, что содержание иммуноглобулинов G и M в сыворотке
крови, а также бактерицидная активность сыворотки крови у больных коров,
которым вводили Миксоферон были на уровне здоровых животных или
несколько превышали их ( показатели из таблицы ).
7. Применение традиционных средств (препараты ) при лечении
больных животных способствовало выздоровлению (10,9 дней) коров, однако
проводимая терапия не устраняла имеющуюся недостаточность иммунной
системы в исследуемые сроки, что приводило к снижению плодотворного
осеменения животных.
8. Введение «Миксоферона»® внутримышечно (50 мг/гол.) коровам (5
мл), больным серозным маститом, оказало благотворное влияние на
показатели клеточного (Т-лимфоциты, фагоцитоз) и гуморального (Влимфоциты, лизоцим, иммуноглобулины, бактерицидная активность)
иммунитета, что профилактировало развитие иммунодефицитного состояния
у коров.
9. Комплексное лечение животных с клиническими признаками
субклинического мастита с использованием нового иммуномодулятора
«Миксоферона»® способствует полному выздоровлению животных к концу
первого месяца лечения. Это происходит за счет активизации
неспецифической резистентности и иммунитета, что способствует также
снижению бесплодия, сокращению сервис-периода и улучшению
продуктивных качеств у подопытных животных.
5. Сведения о практическом использовании результатов
исследования
1. По материалам диссертации исследований имеются Акт №1 и Акт №2
внедрение в производство обоих хозяйств, утвержденные руководством
хозяйств.
16
2. Результаты исследований используются в учебном процессе на кафедре
ветеринарного акушерства и биотехники репродукции животных ФГОУ ВПО
МГАВМиБ, Тверской с/х-й академии, Воронежского аграрного университета.
6. Рекомендации по использованию научных выводов
1.
Учитывая существенное снижение основных параметров
неспецифической резистентности и иммунитета у коров при субклиническом
мастите, рекомендуем в предродовые периоды создавать животным
улучшенные условия содержания, ухода, кормления, предоставлять им
ежедневный активный моцион, что будет способствовать активизации их
иммунных реакций.
2.
Для лечения коров при субклиническом мастите и коррекции их
иммунологических параметров рекомендуем в комплексе с традиционными
методами лечения использовать – иммуномодулятор Миксоферон®
(интерферон).
Миксоферон® (интерферон) необходимо вводить внутримышечно 2
раза в сутки в дозе 20-50 доз/гол. В течение (7; 14; 30 дней).
3.
Результаты исследований послеродовой патологии и терапии
коров, больных субклиническим маститом, рекомендуем использовать в
учебном процессе учебных заведений, а также зооветеринарной практике.
4.
Терапевтическая эффективность, при проведении опытов, в 3й
опытной группе составило 90,9% (±3).
7. Список опубликованных работ по теме диссертации ВАК
*1. Сафонов, М.М. Применение «миксоферона®», «фармоксидина®» и
пробиотика Субтилис при серозном мастите коров // М.М. Сафонов, П.П.
Серов, Голиков, Н.Д., Сорокин, О.А. - Ветеринария. - №12. – 2010. – С. 3841.
* 2. Сафонов, М.М. Использование иммуномодулятора Миксоферон,
при лечении субклинического мастита в ЗАО «Калининское», ООО
«Бородино». - Молочное и мясное скотоводство. - № 7. - 2010.
3. Сафонов, М.М. Пробиотик «Субтилис» в промышленном
птицеводстве. – Птицеводство. - №9. – 2009. - С. 23.
4. Сафонов, М.М. Современные продукты российской биотехнологии
// М.М. Сафонов, П.П. Серов, О.А. Сорокин. - Комбикорма. - №8. - 2009. С. 70-71.
*5. Сафонов, М.М. Токсиканты – причина отравления животных,
птицы, рыб
// М.М. Сафонов,
В.И. Белоусов, М.В. Калмыков. Комбикорма – №7. – 2009. – С. 57-58.
17
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
50
Размер файла
496 Кб
Теги
субклиническом, коровы, иммуномодуляторы, влияние, иммунитет, миксоферона, мастите
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа