close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Возрастные особенности структуры легких при парентеральном введении ксеногенной цереброспинальной жидкости

код для вставкиСкачать
На правах рукописи
Шатов Дмитрий Викторович
Возрастные особенности структуры лёгких
при парентеральном введении ксеногенной
цереброспинальной жидкости
14.03.01 – анатомия человека
Автореферат
диссертации на соискание учёной степени
кандидата медицинских наук
Симферополь – 2016
Работа выполнена в Медицинской академии имени С.И. Георгиевского
ФГАОУ ВО «КФУ им. В.И. Вернадского»
Научный руководитель:
Заведующий кафедрой нормальной анатомии МА
имени С.И. Георгиевского, доктор медицинских наук, профессор
Пикалюк Василий Степанович
Официальные оппоненты:
Заведующий кафедрой анатомии человека ГБОУ ВПО
"Оренбургский государственный медицинский университет",
доктор медицинских наук, профессор Железнов Лев Михайлович
Заведующая кафедрой морфологии и общей патологии, ГБОУ ВПО
"Сибирский государственный медицинский университет", доктор
медицинских наук, профессор Суходоло Ирина Владимировна
Ведущая организация: ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова
Минздрава России
Защита диссертации состоится « 21 » сентября 2016 г. в 12.00 часов
на заседании диссертационного совета Д.900.006.03
при Медицинской
академии имени С.И. Георгиевского по адресу: 295006, г. Симферополь,
бульвар Ленина, 5/7.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Медицинской
академии имени С.И. Георгиевского ФГАОУ ВО «КФУ им. В.И. Вернадского»
по адресу: 295006, г. Симферополь, бульвар Ленина, 5/7.
Автореферат разослан «___» __________ 2016 г.
Учёный секретарь
диссертационного совета Д.900.006.03
доктор медицинских наук,
профессор
Мороз Геннадий Александрович
3
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Заболевания органов дыхания являются
актуальной проблемой современности, обусловленной значительной
распространённостью этой патологии среди населения, прогрессированием
и отягчающим действием на сопутствующие поражения. По данным
специалистов Всемирной Организации Здравоохранения патология органов
дыхания занимает лидирующую позицию в структуре заболеваемости
взрослого населения (Мировая статистика здравоохранения, 2013). В связи
с этим, в последнее время всё более важным является улучшение качества
жизни пациентов, достигаемое применением различных методов терапии.
Однако, применяемые методы терапии и реабилитации не всегда достигают
оптимальных результатов, что требует поиска новых способов лечения.
Среди исследуемых веществ наиболее перспективным является
применение биологически активных веществ, таких как вазопрессин
(M. Westphal, 2011), кортиколиберин (A. Bozkurt, 2001), соматостатин
(C. Egger, 2014), меланоцитстимулирующий гормон (X.M. Yu, 2006), мелатонин
(M. Zhong, 2013), грелин (Y. Liu, 2014), фактор роста гепатоцитов (Ye-Ji
Lee, 2012), эпидермальный фактор роста (B. Yang, 2012), эндотелиальный
фактор роста (G.L. Oktar, 2013), эритропоэтин (G. Sigounas, 2008)и другие,
которые продемонстрировали своё влияние на лёгкие. Эти и многие другие
биологически активные вещества выявлены в составе цереброспинальной
жидкости (Пикалюк В.С. Ткач В.В., 2010).
Также был накоплен опыт применения ликвора с лечебной целью
при ряде патологических состояний: кровопотере (Шульгин Г.Т., 1981),
инфекционных болезнях (Фридман А.П., 1971), нарушениях обмена веществ
(Заднипряный И.В., 1981), лучевой болезни (Ткач В.В., 1998), ожогах (Ткач
В.В., 2005). Описаны положительные эффекты применения ксеногенной
цереброспинальной жидкости в гинекологии (Атаманова Е.М., 1954),
дерматологии (Родин А.Ю., 1990), эндокринологии (Бессалова Е.Ю., 2006,
2014; Бондаренко В.И., 1989; Киселёв В.В., 2014), неврологии (Ткач В.В. (мл),
2000). Установлено влияние ксеногенной цереброспинальной жидкости на
красный костный мозг (Шаймарданова Л.Р., 2011; Абсаттарова А.И., 2015),
лимфатические узлы и тимус (Кривенцов М.А., 2008, 2015), головний мозг
(Гасанова И.Х., 2014).
Цель исследования: изучить возрастные морфологические особенности
строения лёгких крыс при парентеральном введении ксеногенной
цереброспинальной жидкости в условиях моделирования экзогенного и
эндогенного повреждающего действия на организм животных.
Задачи исследования:
1. Выявить морфологические возрастные особенности паренхимы
лёгких крыс линии Вистар.
4
2. Описать
онтогенетические
особенности
морфологических
изменений лёгких крыс линии Вистар при парентеральном введении
ксеногенной цереброспинальной жидкости.
3. Определить характер и степень влияния применения ксеногенной
цереброспинальной жидкости на морфологические показатели лёгких крыс
линии Вистар в зависимости от длительности эксперимента и возраста
животных.
4. Описать особенности морфологических изменений лёгких
крыс в условиях однократного тотального облучения и итраконазолиндуцированной надпочечниковой недостаточности.
5. Изучить возможность корректирующего влияния ксеногенной
цереброспинальной жидкости при повреждении лёгких линии Вистар,
вызванных однократным тотальным облучением и моделированием
итраконазол-индуцированной надпочечниковой недостаточности.
6. Установить характер и степень влияния применения ксеногенной
цереброспинальной жидкости на морфологические показатели лёгких
крыс линии Вистар в зависимости от длительности эксперимента (при
облучении) или половой принадлежности (при применении итраконазола) с
использованием двухфакторного дисперсионного анализа.
Научная новизна полученных результатов.
В эксперименте описаны морфологические особенности структуры
лёгких крыс линии Вистар в различные возрастные периоды, а также при
парентеральном введении ксеногенной цереброспинальной жидкости.
Впервые описано влияние трёх- и десятикратного парентерального
введения ксеногенной цереброспинальной жидкости на морфологическую
структуру лёгких крыс при моделировании радиационно-индуцированного
повреждения лёгких, вызванного действием однократного тотального
облучения в дозе 5 Гр.
В эксперименте описаны морфологические изменения в лёгочной
паренхиме в зависимости от половой принадлежности, возникающие
при итраконазол-индуцированной надпочечниковой недостаточности, а
также установлен терапевтический эффект при введении ксеногенной
цереброспинальной жидкости.
Теоретическая и практическое значение полученных результатов.
Результаты, полученные в рамках проведённого исследования, продемонст­
рировали постнатальные онтогенетические особенности морфологических
изменений паренхимы лёгких интактных крыс после введения ксеногенной
цереброспинальной жидкости: увеличение процентного содержания
неизменённой паренхимы за счёт уменьшения процентного содержания
эмфизематозных участков при трёхкратном введении и в отдалённом периоде
при десятикратном введении наиболее выраженное в зрелом возрасте.
5
Исследованы особенности морфологических изменений паренхимы
лёгких крыс при парентеральном трёх- и десятикратном введении
ксеногенного ликвора в условиях смоделированного радиационноиндуцированного повреждения лёгких. Описаны половые отличия в
глубине повреждения лёгких, вызванном применением итраконазола, и их
восстановлении при введении ксеногенной цереброспинальной жидкости.
Практическая значимость работы заключается в теоретическом
обосновании возможного использования ксеногенной цереброспинальной
жидкости, как терапевтического средства для коррекции экзогенного и
эндогенного повреждающего действия на лёгкие, вызванные действием
облучения и введением итраконазола.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Паренхима лёгких крыс имеет морфологические особенности
в различные возрастные периоды. Наиболее оптимальное сочетание
морфометрических показателей лёгких обнаружено у крыс зрелого возраста,
проявлявшееся максимальным содержанием неизменённой паренхимы. В
других возрастных группах животных на фоне, уменьшения процентного
содержания неизменённой паренхимы, увеличивалось процентное
содержание эмфизематозных участков и участков дистелектаза.
2. Парентеральное введение ксеногенной цереброспинальной
жидкости вызывает изменения морфометрических показателей паренхимы
лёгких интактных крыс линии Вистар, зависящее от исходного возраста
животных, введённого количества ксеногенной цереброспинальной
жидкости, длительности эксперимента.
3. Ранние эффекты десятикратного введения КЦСЖ проявляются
снижением процентного содержания неизменённой паренхимы за счёт
увеличения процентного содержания эмфизематозных участков. Поздние
эффекты десятикратного введения носят обратный эффект, вызывая
увеличение процентного содержания неизменённой паренхимы за счёт
уменьшения процентного содержания участков эмфиземы и дистелектаза.
Введение КЦСЖ сопровождается уменьшением содержания коллагеновых
волокон в легочной паренхиме.
4. Контролируемые факторы воздействия, длительности эксперимента
или возраста животных и их взаимодействие оказывают максимальное
влияние на животных зрелого возраста при длительности эксперимента 7 и
30 дней.
5. Введение КЦСЖ при моделировании экзогенного повреждающего
воздействия облучением уменьшает выраженность деструктивных
изменений в лёгких крыс.
6. При моделировании эндогенного повреждающего действия,
вызванное
введением итраконазола, существуют морфологические
6
особенности структуры лёгких крыс зависят от половой принадлежности.
Введение КЦСЖ крысам, получавшим итраконазол, оказывает
разнонаправленное влияние на строение лёгких самок и самцов крыс.
Личный вклад диссертанта. Автором самостоятельно проведены
патентно-информационный поиск, анализ научной литературы по данной
проблеме, забор экспериментального материала для световой и электронной
микроскопии, анализ гистологических препаратов и электроннограмм,
органо- и гистоморфометрия с последующей их статистической обработкой
и обобщением полученных результатов. Все разделы диссертации написаны
диссертантом самостоятельно. Под руководством научного руководителя
соискатель провёл анализ и обобщение результатов исследования,
сформулировал все положения и выводы. Самостоятельно и в соавторстве с
научным руководителем написаны статьи.
Апробация результатов диссертации. Основные положения
диссертации доложены и обсуждены на IX конгрессе Международной
ассоциации морфологов (Москва, 2008); научно-практической конференции
«Прикладні аспекти морфології», посвящённой памяти профессоровморфологов Терентьева Г.В., Роменского О.Ю., Когана Б.И. (г. Винница,
2009); 86-й международной научно-практической конференции студентов
и молодых учёных «Теоретические и практические аспекты современной
медицины» (Симферополь, 2014); международной научно-практической
конференции, посвящённой 100-летию дня рождения профессора Зои
Измайловны Ибрагимовой «Макро-микроскопическая анатомия органов и
систем в норме, эксперименте и патологии» (Витебск, 2014); Всеукраинской
научно-практической конференции «Медична наука в практику охорони
здоров’я» (Полтава, 2014); научно-практической интернет-конференции с
международным участием «Значення морфологічних наук на сучасному
етапі розвитку медицини» (Черновцы, 2014); IX Международной научнопрактической конференции: «Теоретические и практические аспекты
развития научной мысли: Медицинские науки, Фармацевтические
науки, Ветеринарные науки, Биологические науки, Химические науки»
(Москва, 2015); научно-практической конференции «Морфологічні
дослідження – виклик сучасності» (Сумы, 2015); IV Конгрессе анатомов,
гистологов, эмбриологов и топографоанатомов Украины (Запорожье,
2015); Международной научной конференции «Актуальные вопросы
морфологии» (Кишинёв, 2015), XIX Международной медико-биологической
научной конференции молодых исследователей «Фундаментальная наука
и клиническая медицина. Человек и его здоровье» (Санкт-Петербург,
2016), 88 конференции студентов и молодых учёных «Теоретические и
практические аспекты современной медицины» (Симферополь, 2016),
Всероссийской научно-практической конференции с международным
7
участием, посвящённой 120-летней годовщине со дня рождения профессора
Б.М. Соколова (Рязань, 2016) .
Апробация работы проведена на совместном заседании сотрудников
кафедр нормальной анатомии, гистологии, цитологии и эмбриологии,
топографической анатомии и оперативной хирургии, медицинской биологии,
патологической анатомии, судебной медицины с курсом права Медицинской
академии имени С.И. Георгиевского ФГАОУ ВО «КФУ им. В.И. Вернадского»
18.02.2016 г.
Публикации. Основные результаты диссертации отражены в 18
научных работах, из них: 6 статей - в специализированных журналах (из них
4 статьи опубликованы до 31.12.2014 г.), 12 работ в сборниках материалов
конференций.
Структура и объём диссертации: диссертация изложена на 166 страницах
компьютерного текста и включает в себя введение, обзор литературы, материал
и методы, результаты собственных исследований, заключение, выводы,
практические рекомендации, список условных сокращений и обозначений,
список литературы. В диссертационной работе представлено 35 таблиц и 79
рисунков, из которых 57 – микрофотографии. Список литературы содержит
184 источника, из них 61 – кириллицей, 123 – латиницей.
Выражаю искреннюю благодарность заведующему кафедрой
медицинской физики и информатики, доктору биологических наук, доценту
Павлу Евгеньевичу Григорьеву, а также кандидату медицинских наук,
доценту кафедры патологической анатомии с секционным курсом Валерию
Викторовичу Шаланину за оказанную консультативную помощь при
интерпретации результатов исследования.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы исследования. Эксперимент был проведён
на 144 крысах линии Вистар и состоял из трёх этапов, которые были
направлены на изучение действия парентерального введения КЦСЖ на
лёгкие крыс в онтогенетическом аспекте, а также при моделировании
экзогенного и эндогенного повреждающего действия путём облучения и
введения итраконазола с дальнейшей коррекцией КЦСЖ.
Для изучения возрастных особенностей действия КЦСЖ на лёгкие крыс
линии Вистар животные обоих полов экспериментальной и контрольной
серий были разделены на три возрастные группы: неполовозрелые (1 месяц,
начальная масса тела – 25-30 г), зрелые (5 месяцев, начальная масса тела –
180-200 г), предстарческие (19 месяцев, начальная масса тела – 250-280 г).
Животные экспериментальных серий внутримышечно получали КЦСЖ, а
животные контрольных серий плацебо (0,9% раствор натрия хлорида). Доза
и кратность введения были аналогичными. Разовая доза составляла 0,002
8
мл/г массы тела животного. Длительность эксперимента – 7 (3 введения),
30 и 90 (по 10 введений) дней. Интервал между введениями – 2 дня. Всего в
этой части исследования были задействованы 96 животных.
Для моделирования экзогенного повреждающего действия крыс линии
Вистар животных обоих полов зрелого возраста (5 месяцев) подвергали
однократному тотальному облучению в дозе 5 Грей при помощи гамматерапевтического аппарата дистанционного облучения «Тератрон» на базе
Крымского Республиканского Учреждения «Клинический онкологический
диспансер». Исходные данные животных были аналогичны крысам зрелого
возраста из части исследования, посвящённого изучению возрастных
особенностей действия КЦСЖ на лёгкие крыс. Облучённые животные
были разделены на серии, получавшие плацебо или КЦСЖ. Длительность
эксперимента 7 (3 введения) и 30 (10 введений) дней. Интервал между
введениями – 2 дня. В качестве контроля для облучённых животных
выступали крысы контрольной серии, трёх- и десятикратно получавшие
плацебо. Всего животных – 24.
Эндогенное повреждающее действие крыс линии Вистар моделировали
при помощи перорального введения итраконазола («Итракон», производство
компании «Фармак»), индуцируя гипокортицизм. Исходные данные
животных были аналогичны крысам зрелого возраста из части исследования,
посвящённого изучению возрастных особенностей действия КЦСЖ на лёгкие
крыс. Возраст животных на момент начала исследования составлял 5 месяцев.
Крысы были разделены на половому признаку. Все животные получали
итраконазол в дозе 30 мг/кг живой массы тела ежедневно натощак. Через
10 дней с момента начала введения итраконазола животным десятикратно
вводили плацебо или КЦСЖ. Интервал между введениями составлял 2 дня.
Длительность эксперимента - 30 дней. Контролем послужили животные,
десятикратно получавшие плацебо. Всего животных – 24.
Прижизненное получение КЦСЖ осуществляли от здоровых коров,
находившихся под постоянным ветеринарным контролем, на базах
ОАО «Широкое» (Симферопольский район), научно-производственном
объединении «Элита» (Красногвардейский район). Непосредственны забор
КЦСЖ осуществляли путём субокципатальной пункции по методу проф.
В.В. Ткача в стерильные закрытые пластиковые пакеты типа «Компопласт». С
целью сохранения биологических свойств КЦСЖ помещали в сосуды Дюара
с жидким азотом при температуре минус 196°С. в дальнейшем выполняли
размораживание и стерилизацию на базе Крымского Республиканского
Учреждения «Центр службы крови» путём пропускания через фильтры
«Миллипор» разного диаметра (от 0,08 до 0,22 мкм). Обработанную КЦСЖ
разливали в ампулы и герметично запаивали. Хранение осуществляли в
холодильной камере при минус 4°C.
9
Эксперимент на животных выполняли в соответствии с правилами
Европейской конвенции защиты позвоночных животных, которые
используются в экспериментальных и других научных целях. Соблюдение
основных биоэтических норм при проведении исследования подтверждены
заключением комитета по этике ФГАОУ ВО «КФУ имени В.И. Вернадского»
(протокол №10 от 11.04.2016 г.).
После завершения сроков эксперимента животных декапитировали
под эфирным наркозом и проводили забор материала. Выполняли
взвешивание животных и измерение линейных размеров лёгких. Органы
фиксировали в 10% растворе формалина. Левое лёгкое после фиксации
промывали, обезвоживали в батарее спиртов восходящей концентрации,
проводили сквозь хлороформ и заключали в парафин. На микротоме
изготавливали срезы толщиной 5-7 мкм, которые впоследствии окрашивали
гематоксилином и эозином, пикрофуксином. Гистоморфометрическое
исследование проводили при помощи светового микроскопа ««Olympus»
- CX 41, морфометрию – в лицензионной программе «Olympus DP Soft».
При исследовании определяли процентное содержание (ПС) участков с
неизменённой паренхимой, эмфиземой, дистелектазами, кровоизлияниями,
а также выраженность коллагеновых волокон. ПС ислледуемых признаков
определяли как отношение суммарной площади признака к общей площади
среза, выраженное в процентах.
Материал для трансмиссионной электронной микроскопии забирали
с участков лёгких, свободных от крупных сосудов и бронхов, фиксацию и
заливку в смолы проводили по стандартной методике. Полутонкие срезы
(1 мкм) изготавливали на ультратоме УМПТ-7, окрашивали метиленовой
синью и просматривали в световом микроскопе для ориентировочного
определения характера материала. После этого изготавливали ультратонкие
срезы (30-60 нм), которые после окрашивания по Рейнольдсу просматривали
и фотографировали на электронном микроскопе ПЭМ-125К.
Все полученные данные поддавали статистической обработке с
использованием лицензионного программного обеспечения Open Office. При
анализе полученных данных рассчитывали среднюю арифметическую для
всей группы, среднеквадратическое отклонение, ошибку средней величины,
показатели динамики (абсолютный прирост, темп роста, темп прироста,
абсолютное значение одного процента прироста). При использовании
метода вариативной статистики для оценивания значимости отличий
полученных данных использовали t-критерий Стьюдента. Достоверным
считали результаты при значении р≤0,05; перед использованием
параметрического критерия проверяли их распределение на нормальность.
В случае ненормального распределения использовали непараметрический
метод сравнения двух независимых выборок – U-критерий Манна-Уитни.
10
Двухфакторный дисперсионный анализ выполняли с использованием
лицензионного программного обеспечения Statistica 10.0. При помощи
полученных данных оценивали степень воздействия контролированных
факторов (КФ) воздействия, длительности эксперимента или возраста
животных и их взаимодействие на структуру паренхимы лёгких.
Результаты исследования и их анализ. При трёхкратном введении
КЦСЖ крысам линии Вистар неполовозрелого возраста отмечали
увеличение ПС неизменённой паренхимы на 14,35% (p<0,05) и участков с
кровоизлияниями на 0,69% (p<0,05) за счёт уменьшения ПС эмфизематозных
участков на 15,95% (p<0,05). ПС участков с дистелектазами увеличивалось
незначительно и незначимо.
При трёхкратном введении КЦСЖ крысам линии Вистар зрелого
возраста отмечали аналогичные изменения: уменьшения ПС эмфизематозных
участков на 13,73% (p<0,05) за счёт увеличения ПС неизменённой паренхимы
на 5,07% (p<0,05), участков дистелектаза – на 9,23% (p<0,05), кровоизлияний
– на 0,57% (p<0,05).
У крыс предстарческого возраста трёхкратное введение КЦСЖ
приводило к увеличению ПС неизменённой паренхимы на 3,20%
(p<0,05) и участков дистелектаза на 7,99% (p<0,05) при уменьшении ПС
эмфизематозноизменённых участков на 10,82% (p<0,05) и ПС участков с
кровоизлияниями на 0,38% (p<0,05).
При изучении показателей динамики изменений морфометрических
показателей паренхимы лёгких под влиянием парентерального трёхкратного
введения КЦСЖ установлено, что для крыс неполовозрелого возраста
характерны более выраженные изменения показателей морфометрии лёгких,
чем у крыс зрелого и предстарческого возрастов.
Проведённый двухфакторный дисперсионный анализ показал, что
КФ воздействия (введение плацебо или КЦСЖ) влиял на все исследуемые
морфометрические показатели с разной степенью воздействия (23,48% до
93,24%). КФ исходного возраста животных оказывал влияние только на ПС
участков дистелектаза и кровоизлияний, при этом, на ПС неизменённой
паренхимы и эмфизематозных участков значимого воздействия не имеет.
Взаимодействие КФ наиболее влияло на ПС участков с кровоизлияниями и
не воздействовало на ПС эмфизематозных участков.
При десятикратном введении КЦСЖ и 30-дневной продолжительности
эксперимента получены разнонаправленные результаты в разных возрастных
группах. У крыс неполовозрелого возраста линии Вистар после десятикратного
парентерального введения КЦСЖ на 30 сутки эксперимента отмечали
уменьшение ПС эмфизематозных участков на 3,58% (p>0,05), при увеличении
ПС неизменённой паренхимы на 2,71% (p>0,05), участков дистелектаза – на
0,31% (p>0,05), участков кровоизлияний – на 0,56% (p>0,05).
11
У животных зрелого возраста на 30 сутки после десятикратного введения
КЦСЖ отмечали увеличение ПС эмфизематозных участков на 10,45%
(p<0,05), участков дистелектаза – на 0,61% (p<0,05) за счёт уменьшения
ПС неизменённой паренхимы на 8,85% (p<0,05), а также участков
кровоизлияний – на 2,22% (p<0,05). У крыс предстарческого возраста
отмечали уменьшение ПС неизменённой паренхимы на 12,22% (p<0,05) за
счёт увеличения ПС эмфизематозных участков на 9,71% (p<0,05), участков
кровоизлияний – 2,04% (p<0,05). ПС участков дистелектаза отличалось
незначимо.
При изучении показателей динамики действия КЦСЖ на исследуемые
морфометрические показатели паренхимы лёгких при длительности
эксперимента 30 дней также получили разнонаправленные данные. Так,
позитивная динамика изменений ПС неизменённой паренхимы при
введении КЦСЖ животным неполовозрелого возраста сменялась на
негативную с максимумом в предстарческом возрасте. При оценивании
показателей динамики действия экзогенного введения КЦСЖ на ПС
эмфизематозных участков получили несколько противоположные
данные, которые отличались наличием максимального темпа прироста
в серии животных зрелого возраста. Темп прироста ПС участков
дистелектаза уменьшался с увеличением возраста экспериментальных
животных. Введение КЦСЖ сопровождалось темпом роста ПС участков
с кровоизлияниями у крыс неполовозрелого возраста, сменяясь темпом
спада в зрелом возрасте.
При проведении двухфакторного дисперсионного анализа выявлено, что
на результирующие признаки КФ воздействия влиял в интервале от 29,02%
до 51,29%. При этом наибольшую степень влияния на результирующие
морфометрические признаки имел КФ исходного возраста (93,96% 97,05%). Взаимодействие КФ имело максимальное влияние на ПС участков
с кровоизлияниями, и практически одинаково влияло на ПС неизменённой
паренхимы и эмфизематозных участков.
Изучая отдалённые результаты десятикратного введения КЦСЖ крысам
зрелого возраста, было найдено увеличение ПС неизменённой паренхимы
на 20,93% (p<0,05) преимущественно за счёт уменьшения ПС участков
дистелектаза и эмфизематозных участков на 11,58% (p<0,05) и 9,35% (p<0,05)
соответственно. У крыс предстарческого возраста отдалённые результаты
десятикратного введения КЦСЖ продемонстрировали увеличение ПС
неизменённой паренхимы на 6,85% (p<0,05) за счёт уменьшения ПС
эмфизематозных участков на 5,56% (p<0,05), участков дистелектаза – на
1,23% (p<0,05).
Оценивая показатели динамики отдалённых результатов (90-дневный
эксперимент) десятикратного введения КЦСЖ, выявлено, что наибольшие
12
показатели темпа прироста были у животных зрелого возраста, за
исключением показателей динамики ПС участков кровоизлияний.
Степень влияния КФ воздействия на все результирующие
морфометрические признаки была достаточно высокой (72,29%-90,60%), за
исключением ПС участков с кровоизлияниями. КФ исходного возраста также
имел высокую степень влияния на все морфометрические признаки, кроме
ПС неизменённой паренхимы. При этом взаимодействие обоих КФ имело
влияние только на ПС неизменённой паренхимы и участков дистелектаза.
Также был проведён двухфакторный дисперсионный анализ по
изучению влияния КФ воздействия и длительности эксперимента, а также
их взаимодействие на результирующие признаки морфометрических
показателей лёгких крыс линии Вистар. КФ воздействия введения плацебо
или КЦСЖ влиял в широком диапазоне влияния (27,55-71,44%) на
морфометрические показатели легочной паренхимы крыс неполовозрелого
возраста. КФ длительности эксперимента оказывал высокую степень
влияния на все результирующие признаки – показатели морфометрии
лёгких крыс. При этом взаимодействие КФ воздействия и длительности
эксперимента значительно влияло только на ПС неизменённой паренхимы и
эмфизематозных участков. Этот же фактор оказывал максимальное влияние на
ПС участков кровоизлияний и не имел значительного влияния на ПС участков
дистелектаза у животных зрелого возраста. КФ длительности эксперимента и
взаимодействие КФ имели высокую степень влияния в диапазоне от 76,33%
до 96,73% и от 87,61% до 96,04% соответственно. КФ воздействия оказывал
существенное влияния на ПС участков дистелектаза и кровоизлияний
у животных предстарческого возраста. КФ длительности эксперимента
оказывал более высокую степень влияния, в сравнении с КФ воздействия,
на все результирующие признаки, за исключением ПС эмфизематозных
участков. Взаимодействие КФ влияло на все результирующие признаки с
максимумом влияния на ПС участков эмфиземы и кровоизлияний.
При окрашивании пикрофуксином в легочной ткани крыс контрольных
серий, получавших плацебо, наблюдали постепенное увеличение содержания
коллагеновых волокон. Так, в межальвеолярных перегородках у животных
неполовозрелого возраста они визуализировались в виде единичных
тонких, часто прерывистых, еле заметных волоконец с тенденцией к
увеличению их количества вокруг сосудов. С увеличением возраста
отмечали прогрессивное увеличение количества соединительной ткани
вокруг капилляров межальвеолярных перегородок, в периваскулярных и
перибронхиальных зонах. У животных предстарческого возраста описанные
выше явления достигали своего максимума: соединительнотканные волокна,
в виде выраженных тяжей разной, местами достаточно значительной
толщины, наблюдаются повсеместно, сопровождаясь огрубением стромы
13
лёгких. В лёгких животных экспериментальных групп, получавших
КЦСЖ, выявили увеличение количества соединительной ткани в лёгких
с увеличением возраста, но степень и распространённость их была менее
выражена в сравнении с изменениями, выявленными в контрольных группах
соответствующих сроков.
Суммируя вышесказанное, можно заключить, что введение КЦСЖ
существенно влияло на морфометрические показатели легочной паренхимы
крыс линии Вистар. Направленность и выраженность этих изменений имела
возрастные особенности, объясняемая сниженной реактивностью лёгких
у неполовозрелых крыс, и связанная с незрелостью нейроэндокринных
механизмов регуляции, которые преобладают в этом возрастном периоде,
и быстрым её истощением, усиленным метаболизмом и высокими
мобилизационными способностями (Нестеров Ю.В., 2003). Среди животных
зрелого возраста первоочерёдную роль начинают играть нервные механизмы
регуляции с менее выраженными изменениями и достаточно долгим
эффектом. В предстарческом возрасте отмечается ещё менее выраженные
изменения и короткий эффект, в сравнении со зрелыми животными (Нестеров
Ю.В., 2003). Вероятно, снижение образования коллагена, выявленное
при введении КЦСЖ, связано с действием на трансформирующий фактор
роста-β1, с ингибирующим эффектом на пролиферацию фибробластов лёгких
и клеточную миграцию.
Однократное тотальное облучение крыс линии Вистар приводило на 7
сутки эксперимента к уменьшению ПС неизменённой паренхимы на 22,53%
(p<0,05) и участков дистелектаза на 2,42% (p<0,05) за счёт увеличения ПС
эмфизематозных участков на 21,73% (p<0,05) и участков кровоизлияний
на 3,21% (p<0,05). На 30 сутки после однократного тотального облучения
отметили уменьшение ПС неизменённой паренхимы на 38,11% (p<0,05),
участков дистелектаза – на 1,66% (p<0,05), участков кровоизлияний – на
0,94% (p<0,05) за счёт увеличения ПС эмфизематозных участков на 40,7%
(p<0,05).
При изучении показателей динамики действия парентерального
введения КЦСЖ на морфометрические показатели паренхимы лёгких
облучённых крыс выявлено, что ПС неизменённой паренхимы и
эмфизематозноизменённых участков менялось более выражено к 30
суткам эксперимента. ПС участков дистелектаза уменьшалось большим
темпом при 7-суточном эксперименте. Показатель темпа прироста
ПС участков кровоизлияний сменялся негативным значением темпа
прироста при 30-дневном эксперименте. Изменения морфометрических
показателей легочной паренхимы сопровождались увеличением количества
коллагеновых волокон, достигая максимума при 30-дневном эксперименте. У
облучённых животных на ультраструктурном уровне выявлено расширение
14
интерстициального пространства, интрацелюлярный отёк с очаговым
просветлением цитоплазмы. Базальная мембрана имела нечёткие контуры.
Альвеолярные макрофаги были представлены клетками разной степени
зрелости.
По данным Yu Zhang (2012), J. Osterreicher (2001) в результате действия
облучения возникает активация апоптоза клеток паренхимы лёгких крыс,
вовлекая альвеолоциты І типа на 28%, альвеолоциты ІІ типа – на 15%,
эндотелиоциты – на 11%, сопровождаясь истончением альвеолярных стенок.
Принимая во внимание преобладание апоптоза альвеолоцитов І типа, в
организме активируются восстановительные процессы за счёт альвеолоцитов
ІІ типа, а также стимулируется запуск эпителиально-мезенхимальной
трансформации под действием трансформирующего фактора роста-β (C.
Almeida, 2013). В очагах инфильтрации увеличивается содержанием фактора
некроза опухоли -α (C.E. Rübe, 2002).
Трёхкратное введение КЦСЖ облучённым крысам приводило
к уменьшению ПС эмфизематозных участков, а также участков с
кровоизлияниями на 8,86% (p<0,05) и 2,44% (p<0,05) соответственно при
увеличении ПС неизменённой паренхимы на 7,20% (p<0,05), участков
дистелектаза – на 4,09% (p<0,05). Десятикратное введение КЦСЖ
облучённым животным на 30 сутки эксперимента приводило к увеличению
ПС неизменённой паренхимы на 11,29% (p<0,05) и участков дистелектаза
на 4,51% (p<0,05). ПС эмфизематозных участков уменьшилось на 14,41%
(p<0,05), участков кровоизлияний – на 1,39% (p<0,05).
При изучении показателей динамики влияния кратности введения
КЦСЖ облучённым крысам выявлено, что после десятикратного введения
изменения имели более выраженный характер. Исключение составлял темп
прироста ПС участков с кровоизлияняими, который имел более выраженный
характер при трёхкратном введении.
При проведении двухфакторного дисперсионного анализа было
выявлено, что КФ воздействия (применение плацебо/облучение с
последующим применением плацебо/облучение с последующим
применением КЦСЖ) имел высокую степень влияния на все
морфометрические показатели паренхимы лёгких крыс (95,90–97,09%).
КФ длительности эксперимента также имел высокую степень влияния
на морфометрические показатели с максимальным влиянием на ПС
неизменённой паренхимы (86,78%) и минимальным – на ПС дистелектаза
(65,50%). Взаимодействие КФ воздействовало на результирующие признаки
морфометрических показателей в диапазоне 31,15–97,29%.
Введение КЦСЖ сопровождалось уменьшением выраженности
коллагеновых волокон, интрацелюлярного отёка. В цитоплазме
альвеолоцитов ІІ типа отмечали увеличение количества осмиофильных
15
пластинчатых телец. Альвеолярные макрофаги с увеличением срока
эксперимента были представлены активно функционирующими формами.
Базальная мембрана имела нечёткие контуры. Защитные свойства КЦСЖ
обусловлены действием биологически активных веществ, которые
содержатся в её составе. Для мелатонина и витамина Е описано защитное
действие при радиационно-индуцированном повреждении лёгких (S.S.
Jang, 2013; N.S. Bese, 2007). Для других (вазопрессин, кортиколиберин,
соматостатин, меланоцитстимулирующий гормон, тиреотропин, грелин,
факторы роста, эритропоэтин и вещество Р) описаны протективные действия
при повреждении лёгких, индуцированные другими этиологическими
факторами. Биологически активные вещества вероятно уменьшают
содержание провоспалительных цитокинов, влияют на эпителиальномезенхимальную трансформацию, снижая количество трансформирующего
фактора роста-β, активируя Т-лимфоциты и ингибируя ренин-ангиотензинальдостероновую систему (F. Cappuccini, 2011; L. Kma, 2012).
Введение итраконазола крысам-самкам приводило к уменьшению ПС
неизменной паренхимы лёгких на 47,14% (p<0,05), участков дистелектаза
– на 0,30% (p<0,05). ПС эмфизематозных участков увеличилось на 46,48%
(p<0,05), участков кровоизлияний – на 0,96% (p<0,05). Введение итраконазола
крысам-самцам
оказывало аналогичные изменения: уменьшение ПС
неизменённой паренхимы на 32,61% (p<0,05), увеличение ПС эмфизематозных
участков и участков кровоизлияний на 30,19% (p<0,05) и на 2,42% (p<0,05)
соответственно. При окрашивании пикрофуксином в легочной ткани крыс
обоих полов, получавших ираконазол, соединеительнотканные волокна
визуализировались в виде тонких, красных волокон, вокруг капилляров
межальвеолярных перегородок, с тенденцией увеличения их количества в
периваскулярных зонах.
Итраконазол обладает ингибирующим эффектом на изоформы
цитохрома Р450 (CYP3A4, CYP3A5, CYP3A7), локализованные в
эндотелиальном ретикулуме разннобразных клеток печени, лёгких,
кишечника (A. Westlind-Johnsson, 2003; S. Anttila, 1997; E. Courcot, 2012; D.
Lacroix, 1997). Повреждение лёгких происходит вследствие ингибирования
изоформ цитохрома Р450, веществами, которые не были метаболизированы,
вследствие этого угнетения (P.A. Wijnen, 2010), а также носит вторичный
характер вследствие повреждения сердца, надпочечников, печени (K.M.
Main, 2002; M. Tuccori, 2008; N. Somchit, 2004; H Okuyan, 2013; M. Skov,
2002).
При изучении показателей динамики действия итраконазола крысам
зрелого возраста выявлено, что изменения исследуемых морфометрических
показателей были более выражены у самок, за исключением изменений ПС
участков кровоизлияний.
16
Десятикратное введение КЦСЖ крысам-самкам, получавшим
итраконазол, приводило к уменьшению ПС эмфизематозноизменённых
участков на 26,62% (p<0,05) и участков кровоизлияний на 3,29% (p<0,05)
за счёт значительного увеличения ПС неизменённой паренхимы на 22,16%
(p<0,05) и участков дистелектаза на 7,74% (p<0,05). Напротив, десятикратное
введение КЦСЖ крысам-самцам приводило к уменьшению ПС неизменённой
паренхимы на 5,81% (p<0,05), участков с кровоизлияниями – 4,13% (p<0,05)
при увеличении ПС эмфизематозных участков на 9,69% (p<0,05).
Изучив показатели динамики действия парентерального введения КЦСЖ
на морфометрические показатели паренхимы лёгких крыс, получавших
итраконазол, выявлено, что изменения ПС участков дистелектаза были более
выражены у самок, а ПС участков кровоизлияний – у самцов. Показатели
динамики изменений ПС неизменённой паренхимы и эмфизематозных
участков имели противоположное направление. У животных разных полов
при проведении двухфакторного дисперсионного анализа выявлено, что
КФ воздействия (применение плацебо/применение итраконазола и плацебо/
применение итраконазола и КЦСЖ) имел высокую степень влияния на все
результирующие признаки - исследуемые морфометрические показатели
(от 95,11% до 97,92%). КФ половой принадлежности исследуемых
животных влиял только на ПС участков дистелектаза (88,19%) и
кровоизлияний (65,74%). Это свидетельствует о том, что изолированное
влияние КФ половой принадлежности незначительное на наиболее
важные показатели морфометрии (неизменённая паренхима, эмфизема) но
влияет на наиболее динамичные показатели морфометрии (дистелектаз,
кровоизлияния). Взаимодействие КФ имело достаточно высокую степень
влияния на морфометрические показатели, за исключением ПС участков с
кровоизлияниями.
У самок, получавших итраконазол и КЦСЖ, коллагеновые волокна
определяются в виде красных волоконец и достаточно толстых тяжей,
размещённых как в структурах межальвеолярных перегородок, так и вокруг
крупных сосудов легочной ткани. У самцов степень коллагенообразования
более выражена: отмечается прогрессивное нарастание содержания
соединительной ткани вокруг капилляров межальвеолярных перегородок, в
периваскулярных и парибронхиальных зонах.
Е.Ю. Бессалова (2013) выявила, что введение КЦСЖ приводило к
снижению уровня эстрадиола у самок на 19,3%, тестостерона у самцов –
на 21%. Именно влиянием на содержание половых гормонов, вероятно,
обусловлена разнонаправленность изменений в легочной паренхиме крыс
разных полов под влиянием КЦСЖ. Половые отличия, выявленные в
паренхиме лёгких крыс под влиянием итраконазола, подтверждаются также
другими исследователями (M. Gharaee-Kermani, 2005; M. Grott, 2013; S.
17
Taniuchi, 2014; F. Ninomiya, 2013; R.C. Keith, 2013; E. Atlantis, 2013; Xu L,
2014).
Парентеральное введение КЦСЖ крысам линии Вистар влияет на
лёгкие животных, направленность и выраженность которых зависят
от исходного возраста, введённой дозы, а также исходного состояния
легочной паренхимы. Введение КЦСЖ животным, которые подверглись
однократному тотальному облучению, обладало протективным действием,
однако полученные результаты не достигали результатов контрольных
серий. Влияние парентерального введения КЦСЖ животным с легочным
повреждением, индуцированным итраконазолом, имел разнонаправленный
характер: у самок оказывал корригирующий эффект, а у самцов приводил к
усугублению гистологическиизменённой картины лёгких.
ВЫВОДЫ
В диссертации приведены данные, характеризующие особенности
строения лёгких крыс линии Вистар различных возрастных групп при
парентеральном введении ксеногенной цереброспинальной жидкости, а
также в условиях моделирования экзогенного и эндогенного повреждающего
действия на организм.
1. Проведённое исследование лёгких крыс линии Вистар выявило
онтогенетические морфологические особенности паренхимы лёгких
у животных неполовозрелого, зрелого и предстарческого возрастов.
Максимальное содержание неизменённой паренхимы лёгких обнаружено
у крыс зрелого возраста. В других возрастных группах животных, на фоне
уменьшения количества неповреждённой паренхимы, увеличивалось
процентное содержание эмфизематозных участков и участков дистелектаза.
2. Трёхкратное введение КЦСЖ приводило к увеличению процентного
содержания неизменённой паренхимы у неполовозрелых животных на 14,35%
(p<0,05), а у животных зрелого возраста на 5,07% (p<0,05) за счёт уменьшения
процентного содержания участков эмфиземы на 15,95% (p<0,05) и 13,73%
(p<0,05) соответственно. Введение КЦСЖ приводило к меньшей степени
выраженности коллагеновых волокон в межальвеолярных перегородках и
периваскулярных зонах, преобладающее среди неполовозрелых животных.
3. Ранние эффекты десятикратного введения КЦСЖ проявлялись
снижением процентного содержания неизменённой паренхимы на 8,85%
(p<0,05) у крыс зрелого возраста и на 12,22% (p<0,05) у крыс предстарческого
возраста. При этом отмечено увеличение процентного содержания
эмфизематозных участков на 10,45% (p<0,05) и 9,71% (p<0,05) у животных
зрелого и предстарческого возрастных периодов. Поздние эффекты
десятикратного введения носили обратный эффект: увеличение процентного
содержания неизменённой паренхимы в зрелом возрасте на 20,93%
18
(p<0,05) и предстарческом возрасте – на 6,85% (p<0,05) за счёт уменьшения
процентного содержания участков эмфиземы и дистелектаза в зрелой
возрастной группе на 9,35% (p<0,05) и 11,58% (p<0,05) соответственно, в
предстарческой возрастной группе – участков эмфиземы и дистелектаза на
5,56% (p<0,05) и 1,23% (p<0,05) соответственно. С увеличением возраста
отмечено увеличение содержания коллагеновых волокон в межальвеолярных
перегородках и периваскулярных, перибронхиальных зонах лёгких крыс,
которое было меньше выражено среди животных получавших КЦСЖ.
4. Проведённый
двухфакторный
дисперсионный
анализ
продемонстрировал, что контролируемые факторы воздействия и
длительности эксперимента оказывают влияние различной степени
выраженности на все морфометрические показатели паренхимы лёгких,
с максимальным влиянием на животных неполовозрелого и зрелого
возрастов при длительности эксперимента 7 дней и минимальным на
животных предстарческого возраста и длительности эксперимента 30 дней.
Взаимодействие контролируемых факторов воздействия и длительности
эксперимента на морфометрические показатели лёгких наиболее выражено
у животных зрелого возраста. Контролируемый фактор исходного возраста
оказывает максимальное влияние при длительности эксперимента 30
дней, а минимальное – 7 дней. Взаимодействие контролируемых факторов
воздействия и исходного возраста максимально влияет при длительности
эксперимента 7 дней и минимально – 90 дней.
5. При моделировании экзогенного и эндогенного повреждающего
воздействия выявлены деструктивные изменения в лёгких крыс. Однократное
тотальное облучение приводило к уменьшению процентного содержания
неизменённой паренхимы на 22,53% (p<0,05) на 7 сутки эксперимента и на
38,11% (p<0,05) на 30 сутки за счёт увеличения процентного содержания
эмфизематозных участков на 21,73% (p<0,05) и 40,7% (p<0,05) соответственно.
Введение итраконазола крысам приводило к уменьшению процентного
содержания неизменённой паренхимы у самок на 47,14% (p<0,05) за
счёт увеличения процентного содержания эмфизематозных участков на
46,48% (p<0,05). У самцов изменения носили менее выраженный характер:
процентное содержание неизменённой паренхимы уменьшилось на 32,61%
(p<0,05) за счёт увеличения процентного содержания эмфизематозных
участков на 30,19% (p<0,05). Облучение и введение итраконазола на 30
сутки эксперимента приводило к существенному увеличению содержания
коллагеновых волокон, вплоть до огрубления стромы лёгких крыс линии
Вистар обоих полов.
6. Введение ксеногенной цереброспинальной жидкости крысам
линии Вистар на фоне однократного тотального облучения оказывало
коррегирующее воздействие, зависящее от частоты введения ксеногенного
19
ликвора. Трёхкратное введение КЦСЖ облучённым крысам приводило к
увеличению процентного содержания неизменённой паренхимы на 7,20%
(p<0,05), а десятикратное – на 11,29 (p<0,05). При этом процентное содержание
участков эмфиземы уменьшалось на 8,86% (p<0,05) и 14,41% (p<0,05) при
трёх- и десятикратном введении КЦСЖ соответственно, сопровождаясь
уменьшением выраженности коллагеноза. Проведённый двухфакторный
дисперсионный анализ показал высокую степень влияния контролируемых
факторов воздействия и длительности эксперимента по отдельности на
все исследуемые морфометрические признаки. Взаимодействие данных
контролируемых факторов оказывало максимальное влияние на процентное
содержание участков с кровоизлияниями и минимальное – на процентное
содержание участков дистелектаза.
7. Введение КЦСЖ крысам-самкам, получавшим итраконазол,
оказывало протективное воздействие с уменьшением процентного
содержания эмфизематозных участков на 26,62% (p<0,05)
за счёт
увеличения процентного содержания неизменённой паренхимы на 22,16%
(p<0,05), а также уменьшения содержания коллагеновых волокон в легочной
паренхиме. Парентеральное введение КЦСЖ крысам-самцам, получавшим
итраконазол, усугубляло деструктивные изменения в лёгких: уменьшение
процентного содержания неизменённой паренхимы на 5,81% (p<0,05) за счёт
увеличения процентного содержания участков эмфиземы на 9,69% (p<0,05)
с увеличением содержания коллагеновых волокон в паренхиме лёгких.
Результаты двухфакторного дисперсионного анализа продемонстрировали,
что контролируемый фактор воздействия оказывал высокую степень
изолированного влияния контролируемого фактора воздействия и во
взаимодействии с контролируемым фактором половой принадлежности.
При этом контролируемый фактор половой принадлежности изолированно
не оказывал значимого влияния на процентное содержание неизменённой
паренхимы и эмфизематозных участков.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Полученные экспериментальные данные могут быть использованы
при оценке характера и степени выраженности морфологических изменений
лёгких крыс при парентеральном введении ксеногенной цереброспинальной
жидкости в зависимости от возраста и кратности введения ликвора.
2. Основываясь на данных, полученных при моделировании экзогенного
повреждающего действия облучения на лёгкие и парентеральном введении
ксеногенная цереброспинальной жидкости, ксеногенный ликвор может быть
рекомендован для практической коррекции радиационно-индуцированного
повреждения лёгких.
3. Данные,
полученные
при
моделировании
эндогенного
20
повреждающего действия на лёгкие, позволяет предположить развитие
итраконазол-индуцированного повреждения лёгких и рекомендовать
ксеногенную цереброспинальную жидкость в качестве корректора у
реципиентов женского пола.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ
ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Пикалюк В.С. Биологические эффекты спинномозговой жидкости как
гуморальной среды центральной нервной системы // В.С. Пикалюк, Е.Ю.
Бессалова, В.А. Королёв, М.А. Кривенцов, В.В. Киселёв, Л.Р. Шаймарданова,
Т.П. Конькова, Е.А. Беляева, Д.В. Шатов //Морфология (Архив анатомии,
гистологии и эмбриологии): Материалы докладов IX конгресса МАМ. –
2008. – Т. 133, № 2. – С. 106-107.
2. Шатов Д.В. Влияние ксеногенной спинномозговой жидкости на
макроскопические показатели лёгких крыс // Матеріали науково-практичних
конференцій «Прикладні аспекти морфології», присвячена пам’яті
професорів-морфологів Терентьєва Г.В., Роменського О.Ю., Когана Б.Й.
(м. Вінниця, 20-21 травня 2009 р.). – Винница, 2009. – С. 313-314.
3. Шатов Д.В. Морфологические изменения лёгких крыс при
парентеральном введении ксеногенной цереброспинальной жидкости
// Материалы 86-й международной научно-практической конференции
студентов и молодых учёных «Теоретические и практические аспекты
современной медицины» (г. Симферополь, 2014 г.). – Симферополь, 2014. –
С. 135-136.
4. Шатов Д.В. Онтогенетические особенности влияния ксеногенной
цереброспинальной жидкости на лёгкие крыс при парентеральном введении
/ Д.В. Шатов, В.С. Пикалюк, В.В. Шаланин, Т.С. Шимкус // Журнал
клінічних та експериментальних досліджень. – 2014. – Т. 2, №2. – С. 160167.
5. Шатов Д.В. Влияние ксеногенной цереброспинальной жидкости
на паренхиму лёгких крыс после одноразового тотального облучения /
Д.В. Шатов, В.С. Пикалюк, В.В. Шаланин, Т.С. Шимкус // Морфологія. –
2014. – Т.8, №2. – С. 77-88.
6. Шатов Д.В. Морфологические изменения лёгких крыс при
парентеральном введении ксеногенной цереброспинальной жидкости /
Д.В. Шатов, В.С. Пикалюк, В.В. Шаланин, Т.С. Шимкус // Материалы
международной
научно-практической
конференции,
посвящённой
100-летию дня рождения профессора Зои Измайловны Ибрагимовой «Макромикроскопическая анатомия органов и систем в норме, эксперименте и
патологии» (г. Витебск, 25-26 сентября 2014 г.). – Витебск, 2014 г. – С. 221224.
21
7. Шатов Д.В. Анализ морфометрических показателей паренхимы
лёгких крыс, подвергшихся одноразовому тотальному облучению и
коррекции ксеногенной цереброспинальной жидкостью / Д.В. Шатов,
П.Е. Григорьев // Клінічна та експериментальна патологія. – 2014. –
Т. XIII, № 3(49). – С. 204-207.
8. Шатов Д.В. Морфологические изменения паренхимы лёгких крыс
при введении итраконазола и ксеногенной цереброспинальной жидкости /
Д.В. Шатов, В.С. Пикалюк, В.В. Шаланин, В.В. Киселёв // Таврический
медико-биологический вестник. – 2014. – Т. 17, № 2 (66). – С. 139-145.
9. Шатов Д.В. Анализ морфометрических показателей паренхимы
лёгких крыс при введении итраконазола и ксеногенной цереброспинальной
жидкости / Д.В. Шатов, П.Е. Григорьев // Актуальні проблеми сучасної
медицини: Вісник Української медичної стоматологічної академії: Матеріали
Всеукраїнської науково-практичної конференції «Медична наука в практику
охорони здоров’я» (м. Полтава, 21 листопада 2014 р.). – Полтава, 2014. –
Т. 14, № 4 (48). – С. 243-245.
10. Шатов Д.В. Вплив ксеногенної цереброспінальної рідини на
паренхіму легень пацюків у нормі та патології // Матеріали Науковопрактичної інтернет-конференцї з міжнародною участю «Значення
морфологічних наук на сучасному етапі розвитку медицини» (м. Чернівці,
26-27 листопада 2014 р.). – Чернівці, 2014– С. 43-46.
11. Шатов Д.В. Анализ морфометрических показателей паренхимы
лёгких крыс при парентеральном введении ксеногенной цереброспинальной
жидкости / Д.В. Шатов, П.Е. Григорьев // Интер-медикал: Материалы
IX Международной научно-практической конференции «Теоретические
и практические аспекты развития научной мысли: Медицинские науки,
Фармацевтические науки, Ветеринарные науки, Биологические науки,
Химические науки» (г. Москва, 27–28 марта 2015). – 2015. – № 3(9). –
С. 56-62.
12. Шатов Д.В. Ультраструктурные изменения в лёгких крыс под
воздействием тотального однократного облучения и их коррекции
цереброспинальной жидкостью / Д.В. Шатов, В.С. Пикалюк, В.В. Шаланин
// Збірник тез доповідей Науково-практичної конференції «Морфологічні
дослідження – виклики сучасності» (м. Суми, 23-24 квітня 2015 р.). – Сумы,
2015 г. – С. 109-110.
13. Шатов Д.В. Морфологические изменения паренхимы лёгких
крыс при воздействии однократного тотального облучения и коррекции
ксеногенной цереброспинальной жидкостью / Д.В. Шатов, В.С. Пикалюк //
Актуальні питання медичної науки та практики. Збірник наукових праць. –
2015 р. – Вип. 82, Т. 2. – С. 497-505.
14. Шатов Д.В. Морфологічні зміни паренхіми легень пацюків за умов
22
одноразового впливу тотального опромінення та корекції ксеногенною
цереброспінальною рідиною / Д.В. Шатов, В.С. Пикалюк // Актуальні питання
анатомії, гістології, ембріології та топографічної анатомії (тези доповідей VI
конгресу анатомів, гістологів, ембріологів та топографоанатомів України)
(м. Запоріжжя, 16-18 вересня 2015 р.). – Запоріжжя, 2015 р. – С. 102.
15. Шатов Д.В. Половые особенности морфологических изменений
паренхимы лёгких крыс при введении итраконазола и коррекции ксеногенной
цереброспинальной жидкостью / Д.В. Шатов, В.С. Пикалюк, В.В. Киселёв
// Актуальные вопросы морфологии. Материалы Международной
научной конференции посв. 70-летию Государственного медицинского и
фармацевтического университета им. Николая Тестемицану (г. Кишинэу,
15–16 октября 2015 г.). – Кишинёв, 2015 г. – С.405–411.
16. Шатов Д.В. Влияние ксеногенной цереброспинальной жидкости
на ультраструктурные изменения в лёгких крыс после облучения //
Материалы 88 конференции студентов и молодых учёных «Теоретические и
практические аспекты современной медицины» (г. Симферополь, 21 апреля
2016 г.). – Симферополь, 2016. – С. 154–155.
17. Шатов Д.В. Влияние итраконазола и ксеногенной цереброспинальной
жидкости на морфологические особенности лёгких крыс / Материалы XIX
Международной медико-биологической научной конференции молодых
исследователей «Фундаментальная наука и клиническая медицина. Человек
и его здоровье» (г. Санкт-Петербург, 23 апреля 2016 г.). – Санкт-Петербург,
2016 г. – С. 627–628.
18. Шатов Д.В. Коррекция ксеногенной цереброспинальной жидкостью
морфологических изменений паренхимы легких крыс при воздействии
однократного тотального облучения /Д.В. Шатов, В.С. Пикалюк //
Российский медико-биологический вестник имени И.П. Павлова. Материалы
Всероссийской научно-практической конференции с международным
участием, посвящённой 120-летней годовщине со дня рождения профессора
Б.М. Соколова (г. Рязань, 3–4 июня 2016 г.). – 2016. – № 2 (приложение). –
С. 237.
ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ
КФ – контролируемый фактор
КЦСЖ – ксеногенная цереброспинальная жидкость
ПС – процентное содержание
Подписано в печать 25.05.2016 г.
Бумага офсетная. Печать офсетная. Формат 60×90/16.
Усл. печ. л. 1. Заказ № 47. Тираж 100 экз.
Отпечатано в ООО «Эльиньо»
г. Симферополь, бул. Ленина 5/7.
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа