close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

bd000100892

код для вставкиСкачать
На правах рукописи
УДК616.155.16:543.Я5
Королев Виталий Александрович
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
ГЛИКИРОВАННОГО ГЕМОГЛОБИНА
И МЕТОД ИЗОЭЛЕКТРИЧЕСКОГО ФОКУСИРОВНИЯ
В КАПИЛЛЯРАХ
14.00.46 Клиническая лабораторная диагностика
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
доктора медицинских наук
МОСКВА-2005 г.
Работа выполнена в Крымском государственном медицинском универси­
тете им. С. И. Георгиевского Министерства Здравоохранения Украины.
Научный ковсультйнт:
доктор медицинских наук, профессор Молчанов Вшктор Иванович.
Официальные оппоненты:
доктор медицииских наук, профессор Титов Владимир Ншсолаевич
доктор медицииских наук, профессор Амегов Алйссандр Сергеевич
дактор медицинских наук, профессор. КушливскнИ Николай Евгеньевич
Ведущая организация:
Московская медицинская академия им.И.М.Сетенова.
Защита состоится " / у "
Й4^^у^%^ Jf^4r
^2005 г. в
/О
часов на заседании диссертационного совета Д 208.071.04 при ГОУ ДПО
«Российская медицинская академия последипломного образования Росздрава» по адресу: 123995 г.Москва, ул.Баррикадиая, д 2/1.
С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке ГОУ
«Российская медицинская академия последипломного о^азования Росздрава» по адресу 125445, гМосква, ул.Беломорская, д. 19.
Автореф^ат разослан "//■
" / f "
A ^ ^ ^ J A ^ 2005 г.
PJyUJ^-U/и(
Ученый секрепгарь
диссертационного совета
Морозова В.Т.
^QQ^'H
^
1
^/«^^сРтУ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы
Патологические состояния человека сопровождаются изменением
стереохмической конфигурации углеводной части жизненно важных мак­
ромолекул, нарушением процессов глнкировакия [Галич И.П., 2003].
Следствие этого модификация межклеточного узнавания, нарушения им­
мунного ответа, ассоциация и агрегация клеток, возникновение новообра­
зований. Установлено, что гликированию подвержены трансатортные бел­
ки, ферменты, гормоны, антитела, диггие биологически важные вещества,
а также муцины, гликолипвды, протеогликаны, глпкосфинго- и гликофосфолипиды [Varki А. и Freeze Н.Н., 1994]. Однако особый интерес пред­
ставляет HbAic. как наиболее важный гликированиый белок в отношении
его клинико-диагностического значения. Накопившиеся к настоящему
времени данные свидетельсгвуют о клиническом значении определения
HbAjc. Практически всеговорято необходимости определения и учета его
показателей при лечении больных СД [Gomez-Perez F.J. et al., 1996;
O'Brien S.F. et Ы.. 1996; Afckus I. et a l , 1996; Mohan V. et a)., 1996; Chang
C.W. et al., 1996; Perret J L. et al., 1995]. Уровень HbAic рассматривают m
только как тест скриннинга обменных нарушений [Willms В., 1997;
Rudberg S. et al., 1993], но и как важный предиктор микрооосудистой па­
тологии [Hsu С, Y. et в1., 2000] и кардиоваскулярного риска [Siarma А.К. et
al., 1996; Laakso М , 1996]. HbAic — индикатор длительного гликемического контроля и диабетических осложнений. Учитывая распространен­
ность СД, которая фактически существенно выше регистрируемой, назре­
ла необходимость широко использовать тест HbAic и оп^)ативно опреде­
лять. Быстрое определение HbAic облегчает ведение СД, а ценность па­
раметра заключается также в возможности оптимизации терапии [Shiba Т.
et al., 1996], что позюляет уме||[ьЮ1№ьН»Ц§1йй|^Ч|1^еиия больных СД.
cn^micrrfjiQA
ft» mp^^-^^i
2
особенно при наличии поздних осложнений. Для определения HbAlc
предложены различные методы с низким коэффициентом вариации, аф­
финная хроматография [Rabinovich S.E. et al., 1993], иммунологический
метод [Jermendy G. et al., 1999]. Однако несмотря на это, на сегодняшний
день определение HbAlc все-таки еще не нашло должного использования
в практической работе врача. Проведенный опрос пациентов показал, что
только 4% больных знают, и им когда-то назначался анализ на HbAlc.
Остальные па1{иекты впервые на школе диабета услышали о существова­
нии этого анализа и о необходимости его регулярного контроля. А на во­
прос; кто из па1(иентов ре1улярно проводит этот анализ (постоянно 3-4
раза в под) дало ответ менее 1 % пациентов [Пархоменко А Д., 2000]
Цель исследования
Разработка нового метода И Э Ф определения уровня HbAlc и ис­
пользование его для скриннинга обменных нарушений, мониторинга глю­
козы у больных СД и контроля других хронических патологических со­
стояний в практике врача.
Задачи исследования:
1. Модифицировать И Э Ф в борат-пояиольной системе для опре­
деления HbAlc в клинике. Для этого использовать узкий градиент рН, рТ
HbAlc, И Э Ф проводить в капиллярах, а содержание HbAlc определять
фонометрически.
2. Оценить аналитическую надежность метода ИЭФ, сравнить
разработанный метод с ИОХ, оценить чувствительность, специфичность,
воспроизводимость разработанного определения HbAlc, а также воспро­
изводимость наиболее часто используемых в клинических условиях мето­
дов определения HbAlc.
3. Провести клиническую оценку наиболее часто используемых в
лабораториях методов определения HbAlc. При этом сравнить разные
методы определения HbAlc С Д проявлениях заболевания и определить
3
тменения уровня HbAlc при изменении гликемии натощак и гликемии
после еды при использовании различных методов определения. Для этого
разработать математическую программу и определить среднюю погреш­
ность уровня HbAlc и уровней гликемии в течение суток.
4. Уточнить взаимосвязь между уровняш! HbAlc и проявлениями
СД (возраст, длительность заболевания) и показателями состояния мета­
болизма (гликемия в течение суток, суточная шпокозурия, суточная протеинурия, 1П1декс массы тела).
6. Установить связь уровня HbAlc с диабепгической нефропатиев
и определить предикторы протеинурии у больных СД.
7. Оцедить возможность использования меюда И Э Ф в капиллярах
для определения гликированиого альбумина.
8. Опр«1!1вдить значение использования теста HbAlc в санаторнокурортных условиях и разработапгь алгоритм контроля нарушений угле­
водного обмена на курорте.
9. Определить значение определения HbAl с в клинике внутрен­
них болезней при патологических состояниях, не связанных с СД как в
стационаре (в гастроэнтерологии, кардиолопии:, нефрологии и диализе,
реаниматологии), так и на курорте (в кардиологии, пульмонологии и дет­
ской ревматологии).
10. Смоделировать диагностическое значение HbAlc, определен­
ного различными методами, по его уровню, линейной и нелинейной кор­
реляции, а также по влиянию (регрессивного анализа) основных показаггедайСД
Научная новизна исследования
1. Разработано и применено определение HbAlc, сочетающее в
себе выдаяение фракции HbAlc при помощи И Э Ф и последующего опре­
деления его величины фотоколориметрией с использованием тиобарбитуровой кислотой после неполного гидролиза с щавелевой кислотой.
2. Предложенный способ применен для оценки возможности оп-
4
ределения уровня гликированного альбумина в сьгаоротке крови, а соче­
тание его с определением модифицированного альбумина даст более пол­
ное представление об уровне поражения альбумина при СД.
3. Проведена маггематическая оценка аналитической надежности
метода И Э Ф в капиллярах по основным ее критериям: правильность, вос­
производимость, спеа)яфичность, чувствительность При этом показано,
что данный метод может быть альтернативным способом определения
HbAlc.
4, На основании сравнения различных методов определения
HbAlc разработана математическая модель этого параметра в отображе­
нии контроля СД и его основных проявлений.
5, Впервые показано диагностическое значение определения
HbAlc в условиях санаторно-курортного лечения и создан алгоритм кон­
троля СД и транзигорной гипергликемии на курорте.
6. Показана возможность использования HbAlc для контроля и
прогноза при различных хронических заболеваниях, не связанных с С Д
как в стационаре, так и на курорте
Практическая значимость работы
Данные, полученные в результате разработки метода И Э Ф в капил­
лярах, его клинической апробации, сравнении с другими популярными
методами определения HbAlc позволяют расширить пон5ггая о гликироваииом белке - HbAlc, его значении не только у больных С Д но и у боль­
ных с критическими состояниями в реаниматологии, у больных с заолеваниями почек, больных, получающих программный гемодиализ, обследуе­
мых с кардиальной и гастроэнтерологической патологиями, на курорте
На основании проведенного исследования разработаны практиче­
ские рекомендации по использованию методов определения HbAlc в
практике врача и пути применения HbAlc в клинике.
5
Внедрение результатов исследований в практику
Разработанный метод определения HbAic состоящий из И Э Ф с
последующей фотоколориметрией, внедрен в клинической лаборвггории
Крымской республиканской больницы им. Н.А, Семашко, использовался в
ООО Ж
"Марат" (пгт. Гаспра, г. Ялта) при обследовании отдыхающих, а
в ДП Клинический санаторий "Мисхор" внедрен алгоритм котроля гипергликемии на курорте и используется для выявления лиц с нарушением
метаболизма. Материалы диссертации также внедрены в практику отделе­
ния анестезиологии и интенсивной терапии 6-й юродской больницы и
тч»апевтического отделения военного госпиталя г.Симферополя.
Лоложеяия, выносимые на защиту
1. И Э Ф в капилляре с последующей фотоколориметрией в реак­
ции с 2-тиобарбитуровой кислотой после неполного гидролиза с щавеле­
вой кислотой, является альтернативным способом определения HbAlc.
Значения данного параметра отличаются от значений HbAlc, определен­
ного методом ионообменной хроматографии А коэффициенты вариации
при определении виутрисерийной и межсерийной воспроизводимосги ме­
тода 1 0 Ф в капиллярах также отличаются от общепринятых норм.
2. HbAIc предсгавляет собой не просто пролонгированный индекс
гликемии, а является важным прогностическим показателем как на диабе­
тическом, так и недиабетическом уровнях.
3. HbAIc является надежным маркером патолошчеоюк измене­
ний при заболеваниях, не связанных с СД; в первую очередь, при крити­
ческих состояниях в реаниматологии, для прогиозирсжамия протеинурии,
хронической почечной недостаточности при нефропатиях и в качестве
дополнительного критерия адекватносга программного гемодиализа в
нефрологии, а также для прогнозирования воспалительного процесса в
детской ревматологии.
6
4, На курорте определение НЬА 1с является выбором при контроле
за "транзиторной гипфгликемией".
Публикации
По теме научио-исследовательской работы опубликовано более 39
научных работ.в том числе 12 работ в периодических рецензируемых из­
даниях, рекомендованных В А К России, 19 - В А К Украины, I- изобрете­
ние 9 тезисов.
Объем и структура диссертации
Диссертация состоит из введения, б глав, заключения, выводов,
практических рекомендаций, библиографического указа11еля, изложена на
194 страницах машинописного текста. Работа иллюстрирована 89 рисун­
ками и 43 таблицами. Список литературы включает 314 источников (SO
отечественных и 264 иностранных).
Апробация работы
Маггериаяы диссертации апробированы на совместной межкафедральной конференции кафедр терапии и семейной медицины, госпиталь­
ной терапии, факультетской терапии скурсом эндокринологеи и проблем­
ной комиссии ФПО Крымскогогосударственногомедицинского универ­
ситета, на кафедре медидины кагтастроф и военной медицины .этого же
университета, кафедре эндокрииологаи ФППО М М А им. И.М. Сеченова,
кафедре эндокринологии Санкт-Петербургской медицинской академии
последипломного офазования. кафедрах эндокринологии и биологиче­
ской и фармацевтической химии Украинского медицинского университета
им. А.А. Богомольца, в диабетологическом отделе Киевского НИИ эндокринооюгии и обмена веществ, кардиологической клинике г. Карлсбурга
7
Передней Померании, кафедре клинической лабораторной дингностнки
Г О У ДПО «Российской медицинской академии последипломного образо­
вания».
Личный вю1ад соискателя в подготовке диссертации
Диссертация подготовлена соикаггелем самостоятельно. Дис­
сертант сам разработал метод И Э Ф в капиллярах и лично каполнял всю
работу, включая определение HbAlc разработанным способом и другими
методами, в Мисхорской кустовой «слинико-биохимической лаборатории
(г.ЯлтаХ кшнической лаборатории Крымской республи(санской клиниче­
ской больницы им.Н.А-Семашко (г. Симферополь) и в лаборатории 0 0 0
ЛК "Марат* (пгт. Гаспра, г. Ялта). Материалы диссертации набраны пол­
ностью самим диссертантом. При этом соискатель сочетал обследование
больных с проведением биохимических определений в лаборатории. Ав­
тор лично обучал врачей и средний медицинский персонал при внедрении
методов определения НЬА1с. Сам подбирал наибошее оптимальные пути
для статисгаческого анализа и предлагал профаммисгам методы матема­
тических подсчетов.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы исследования
Обследовано 492 больных. Уровень HbAlc у 292 больных СД
(155 больных СД 1 и 137 больных СД 2 определяли основными методами.
Диагноз СД определяли согласно кяассификаш'и, предложенной ВОЗ в
1999 году. Для нормализации обмена веществ обследованные больные
получали диетотерапию, таблетированные гипогликемизирующие средст­
ва в виде стандартного манинила-5 и/или традиционную инсулинотерапию. Цель лечения больных была определена согласно контрольным па­
раметрам СД. предложенным EDPG в 1998-1999 годах. У ряда обследо­
ванных выявлено нарушение уровня глюкозы крови. Кроме этого обсле-
8
дованы доноры и больньхе с разными хроническими заболеваниями с от­
сутствием явного СД (всего 200 человек).
Для определения уровня HbAlc использоцали следующие методы;
метод И Э Ф в капиллярах; колориметрические методы: основанные на не­
полном гидролизе гликированиого белка щавелевой кислотой с калибров­
кой по фруктозе и без неё, основанные на неполном гидролизе гликиро­
ваниого белка фосфорной кислотой; метод ионнообменяой хроматОфафин на микроколонках ("Sentinel", Италия); метод аффинной хроматогра­
фии "Abbott" (США). Метод "Диабет-тест", основанный на неполном гид­
ролизе гтпсированного белка с щаврлевой кислотой, расчёт проводят по
формуле: Е443 /0,029 = % HbAlc, где 0,029 — значение оптической плот­
ности (Еод) соответств>тощее 1 % содержанию HbAlc; % HbAlc — про­
цент гликированиого гемоглобина от общего гемоглобина крови; Е443 —
значение опт11ческой плотности исследуемой пробы; метод с использова­
нием калибровки по фруктозе, расчет проводят по формуле: HbAlc ~
Сфр^*СНЬ X 100%, где С фр — концентрация глюкозы в пробе (в моль/л).
определенная по калибровочному графику; С Нв — конц«нгтрация сум­
марного гемоглобина э пробе (в моль/л); 2 — коэффициент, учитываю­
щий, что 1 молекула НвА1с связана с 2 молекулами фруктозы; колори­
метрический метод с использованием фосфорной кислоты для определе­
ния HbAlc, концентрацию HbAlc рассчитывают по формуле HbAlc (гликированный гемоглобин, мкмоль фруктозы/ г Нв) - Сф мкмоль/л / НЬ г/л,
где НЬ — концетрация гемоглобина в гемолизате. Метод аффинной
хроматографии "Abbott" (США), основан на формировании специфиче­
ского окрашенного комплекса между HbAlc и полианнонным аффинным
реагентом, образованным из 3-аминофенилбороновой кислоты, проведе­
нии калибровки, расчете процентного содержания гликированиого гемо­
глобина [Middle F.A. et al., 1983]. Метод ноннообменной хроматографии
нл микроколонкях ("Sentinel*, Италия), принцип метода заключается
[Bisse Е.Л985] в том, что после подготовки гемолшата, из которого уда-
9
лены лабщ1ьны^ фракции, гемоглобины отделяются катион-обменной
смолой. ГЕроцейт ооцфвржаиия Г Г рассчитывали по формуле ( E A l c
/3*Еобщ)*10(т *= %НЬА1с.
Статистическая обработка получеюрых результатов
Статистическую обраболжу полученных результатов проводили с
использованием разработанной юмпыотериой программы, написанной на
языке TUrbo Pascal.
Результаты собственныж исследование
Сначала готовят грвднентяыю растворы для создания узкого фадиента рН, соответствукяцего р1 HbAlc, И Э Ф проводят Ь подиахрилаМидncfU геле в капиллярах ( 6 x 1 мм) (рис.1.). При этом мы исрольэоаали
"очищающий " лринцир ИЭФ: в уэкрм грапиенге рН задержится искомая
фракция HbAlc^ а Д1^г|яе белки гемолизата, которые ивиюют BIQ«> pi под»
в^1гвутся обычному электрофорезу и мигрируют в раствор (pfic.2.). По­
сле проведения И Э Ф каждый капилляр извлекают из аппарата и paci^aют в ciynve с 2 мл дистиллированной воды до положения гомогенной мас­
сы (для каждого pacri^proro капилляра огдельшм! пробирка).Далее Опыт
проводят ПО одному из колориметрических методов до получения искомо­
го результата (содержание HbAlc).
Ж^
Рис 1. Аппарат ПЭФ-1 для ИЭФ
0
10
ч
I _S^
Геашяиян
Ф
ИНЬА1е
73
7i
0
Друлкбвхкк
ттюяшжп
ТисЛ, Принцип И Э Ф глйкировянного гемоглобни*
Оцев1ея аналипгвческой надежности метода И Э Ф + Ф К
фцаШвш-теег)
Bnympticepuihfym восщнтзводчмоапь изучали, как у здоровых» таг
и у больных СД. Коэффициенть! вцжации у здоровых составили
V4-7,7«3, У%«14,10Э, V H =* 14,152, V % = 17,00«; У больных СД: V % 6,074. Межсерийная «осщюиходлщсхть V %
«= 20,305. Чумтвнтель-
яосгь метода ИЭФ+ФК проверена ирследованием жидкостей с различной
кошцентрацией
вещества.
Чувствительность
SOVo
альбумина
(Хср=0,105±0,00048) существ^но не отличалась от таковой физиологиче­
ского раствора (Хср=ОЛ06±0,0001). При сравневии разработанного метода
с методом И О Х обнаружено, что с р р ^ я ^^нфметическая уровня HbAlc
1фв определении искомого показателя методом И О Х (Ха) 12,б74±2,087%
не отличалась от такового при применении метода ИЭФ+ФК (Ya)
n
9,218±0.939% (t=l,S09,|»0,l). И^и проведении корреляционного анализа
Xa/Va обняруявено отсутствие линейной связи г=0,1292 <t=O,4W,p>0,5) и
ум^зенная нелинейная корреляция R=<).4944 (t=0,242,p<0,05), а обратная
непимейная корреляция Ya/Xa отхдггствовала R«!0.4747 (1=1^978,р>0,05).
Также отсутствовала свдзь как прямая Xa/Ya г =» 0Л372 (t=0,4,p>0,5), R *
0.3216 (t= 0,94,р>0.2). так и обратная Ya/Xa Я = 0.3645 (г=1,09.р>ОД) у
больных СД- У дтюроц в отсугспют'СД таШё не обнаружено прямой i ==^
0.0377{р>0,5), R = 0.0787(р>0,5) и обратной R»0.3438 (И),б7, р>0,5) коррели1Цион|^ой связи. При проведении регрбосионного анализа обнаружен
параболический вид функции между уровнями HbAlc при определении
его ИОХ/ИЭФ+ФК, таи: ИЭФ+ФКУИОХ, потому что ошибка гараболияеской ретреосии была наименьшая (С15).Однако данный анализ был недоотоверен щк у ьсбх бол14Ных, так и у болын^ СД и недиабетических доно­
ров. Дгш орввнекия уровней HbAlc, определенного дву1йя методами И О Х
( X ) и ЙЭФ+ФКОО, мы применили также нешфаи{втрический парный криrqpnft Внлконсона (критерий Т). Об1^аружено, что имеются различия меж­
ду двумя выборками у всех больных, у больных С Д У Здоровых доноров
подобйОгр различия не обшфужено. Спецйфичиосгь метода была изуче­
на двумя способами: путем до6авле1Ц<я сы|}оротки к гемолизату и опреде­
лением миграции сфокусированного гемолизага и кали^жгарв HbAlc.
Обнаружено, что добавление сыворотки к гемолизату не изменяет уровень
искомого показателя п^икиро^нного гемоглобин]», При применении вто­
рого способа в плоский полиакриламидный гель вносили изз^а|амые гемолтаты, сфокусированные гемолизаты при разли^^ных типах СД и калиб­
ратор HbAlc ("Boeringer mannheim"). Шучаемые гемолизаты были пред­
ставлены довольно выраженным фоном, а фракция HbAlc в относительно
небольшом размере мигрировала до уровня стандарта. И только сфокуси­
рованные гемолизаты имели небольшой фон, а фракция HbAlc также
мигрировала до уровня стандарта (рис 3).
12
f«t,3. Элешрофорегическая мнгряция (слгевя - направо) исследуемых
гемолизаггов» сффкуацюваямого гемолмзата, cruviapta HbAlc (no зя'
ряду) ("Bocringi^ manpheim") сервр Зс> сфокусированного гемолизата.
Вверху ••-", внизу ♦*+".
Сравнение различных мещцов определения гликированяого гемоглобина
Далее мы срав1|ивали различные методы (Нфвделения HbAlc. При
анализе и клинической оценке колориметрического метода определения
гликированного гемоглобина, основанного на ишолном гищхшизе с ща­
велевой х(1Слотой (метод **ДИ11бсгг<тест*0 обмфужено, ^гто корреляцион­
ная связь между уровнем HbAlc и состоянием углеводного обмена слабая,
а зависимость от других показателей, такик как общий холестерин сыво­
ротки, общий белок крови, возраст, длительность заболевания, иасса tena,
либо огсутсгвовала, либо была отрицательной. Не обн^)ужеио изменений
в содержании HbAlc у больных различными клиническими проявлениями
заболевания. Не выявлено зависимости от типа заболевания, от степени
13
тяжести. Не обнаружено также различий в содержании НЬА1с у больных с
вьтвленными и невыявленными микроангаопатиями: ретиноцатин, нефроангиопатии, микроангиопатии нижних конечностей. Не наблюдалась
корреляционная связь между уровнем HbAlc и сгадашма диабетической
нефропатии. TJptt анализе корреляции и^/жду этим колориметрический
методом ц методом И Э Ф в ка&иллярах обнаружено отсутствие связи. При
сопоставлении уровней HbAlc при использовании метода "Диабег-тест^ и
И Э Ф а капиллярах , что, используя второй метод, уровни Н(}А1с были
зшШитель^ю меньше (примерно в 3 раза), как у здоровых, так и у больных
СД . На наш взгляд заниженные экстинкции при использовании метода
И Э Ф в капиллярах можно объяснт> тем, что гщфолиз непол|шй и про­
ходит только на 30%, Поэтому в известном рас>|:еге по формуле: Е443 /
0,029 = % HbAlc, где 0,029 — значение оптической плотности (Eon) соот­
ветствующее 1 % сод^жанию Г Г ; % HbAlc — процент гликированного
гемогло^иа от общего гем(»-добина крови; Е443 — значение оптической
плотности исследуемой пробы, необходимо ввести коэффициент 3,3, и
тогда расчет будет выглядеть % HbAlc = (Б443 /0,029) • 3,3 (таблица 1),
При сравнении методов афф|ннной хроматографии "Abbott", коло­
риметрического "Диабег-тест^ и разработанного И Э Ф в капиллярах при
оценке контрольньос параметров СД обнаружено, что наиболее высокий
Tvpoaism соответствия одному и тому же течению заболе1ышия, особенш) у
больных СД1, наблюдался при определении НЬА]с методом И Э Ф в ка­
пиллярах (таблица 2 ) .
А при сравнении колориметрического метода И Э Ф в капиллярах
и колориметрического с использованием фосфорной кислоты для опреде­
ления HbAlc у больных СД обнаружено, что при применении метода
И Э Ф в капиллярах значения уровня HbAlc были щ большем количесгйе на
неадекватном уровне, чем при использовании колориметрического метода
с применением фосфоровой кислоты Срис.4).
14
Таблица 1
Значения Еоп, уровня HbAlc у больных СД при использовании мето­
да И Э Ф в капиллярах
N
Еоп
НЬА1с,%
1
0,080
9,103
2
0,070
7,97
3
0,070
7,97
4
0,085
9,67
5
0,080
9,103
6
0,112
12,74
7
0,073
8,31
8
0,065
7,4
9
0,082
9,33
10
0,072
8,19
И
0,072
8,19
12
0,112
12,74
13
0,078
8,88
14
0,094
10,69
Таблица 2
Процент соответствия уровня HbAlc и результатов самоконтроля
глюкозы одному и тому же течению заболевания
Метод определе­
ния
Сахарный диабет
1типа
Abbott
40%
"Диабет-тест"
25%
"ИЭФ+ФК"
50%
Сазсарный диабет
II типа
33%
-
33%
15
1 -нвдиабет ический уровень,! адекват ный уровень, 3.-неадекват ный
уровень
Рис.4. Сравнение методов И Э Ф в капиллярах(белый) и колоримет­
рического с использованием фосфорной кислоты(черный)
при конт роле глюкозы у больных СД2
А при сравнении метода Abbott с разработанным обнаружено, что
средняя погрешность по гликогемоглобину в единицах измерения НЬЛ)с
до середины зоны разброса гликемии натощак, гликемии после еды и об­
щего холестерина сыворотки (6,744) и средняя погрешность по гликоге­
моглобину в единицах измерения HbAlc от средней координаты осталь­
ных показателей (4,088) у больных СД 1 типа при использовании метода
Abbott была выше, чем при использовании метода ИЭФ в капиллярах:
средняя погрешность по гликогемоглобину в единицах измерения HbAlc
до середины зоны разброса гликемии натощак, гликемии после еды и об­
щего холестерина сыворотки (3,572) и средняя пофешность по гликоге­
моглобину в единицах измерения HbAlc от средней координаты осталь­
ных показателей (3,510) у больных СД 1 типа при использовании метода.
При изучении ассоциации HbAlc с показателями гликемического контро­
ля обнаружено, что только у метода И Э Ф в капиллярах средняя погреш­
ность по HbAlc в единицах его измерения до середины зоны разброса по­
казателей гликемии в течение суток была выше, чем аналогичная погреш­
ность от средней координаты гликемии в течение суток до координаты
показателей HbAlc. И имели противоположное направление по отноше-
16
нию к другим методам (не применяющих фокусировку), у которых карти­
на была обратная, то есть ассоциации была разнонаправленная
Клиническое использование гликированного гемоглобина
При этом обнаружено, что рри использовании метода ИЭФ+ФК
уровень HbAlc устанавливал корр<йтяционно-регрессионную зависимость
со Значительно бо"льшим количеством показателей СД, чем при примене­
ний других методов (рис, 5).
При изучении зависимости HbAlc и кошроля глюкозы крови об­
наружено следующее. Отмечена заметная нелинейная корреляция между
гликемией натощак и HbAlc при использовании метода Abbott. При этом
влияние первого показателя на второй можно объяснить параболической
регрессией и составило 29,99%.
Рнс.5. Корреляционная -> н регрессиониая с» зависимосг|> между
основными пока.1ателямн СД и уровнем HbAlc, определен­
ного мепгодом ИЭФ^-ФК
В то же время не обнаружено корреляционной зависимости между
гликемией натощак и уровнем HbAlc при использовании других методов.
17
также как и отсутствовало влияние вариации первого параметра на вариа­
цию второго. Выявлена заметная нелинейная корреляций между уровнями
гликемии после еды и HbAlc
также при использовании метода
Abbott(t=4,57), а параболическая зашкимосгь HbAlc от гликемии после
еды была на 41.38%, Определяя уровень HbAlc другими методами, мы не
обнаружили корреляции меду гликемией после еды и HbAlc, а гипотеза
параболической регрессии между этими парамегграми была равна нулю.
По другому выглядел анализ зависимости между суточной глюкозурией и
HbAlc. Так, нелинейная корреляции меаеду этими показателями обнару­
жена при использовании метода Диабет-теа- и И Э Ф в капиллярах. А зави­
симость изменений HbAlc ot изменений суточной глюкозурии прн ис­
пользовании метода Диабег-тест была только на 8,66*?'{ь, тогда как при
применении метода И Э Ф в капиллярах на 36,53%, а при применении ме­
тодов Abbott и колориметрического с использованием фосфорной кислоты
не обнаружено достоверньис корреляции и регрессии между этими юучаемыми уровнями. Между уровнями общего холестерина сыворотки и
HbAlc также устанавливалась высокая нелинейная зависимость при ис­
пользовании методов И Э Ф в капиллярах и н колориметрического с при­
менением фосфорной кислоты, и отсутствие зависимости при применении
методов Abbott и Диабет-тест. В то же время при гфоведении регрессионното анализа изменения в вариациях уровня общего холестерина сыворот­
ки не влияли на вариацию уровня Н|>А1с, определенного всеми четырьмя
методами Параллелизм между суточной протеннурией и HbAlc выглядел
следующим образом При определении HbAlc методом И Э Ф в капиллярах
отмечалась достоверная нелинейная корреляция между уровнем суточной
протеинурии и HbAlc, при этом вариация уровня суточной протеинурии
на 58,76% влияла на вариацию HbAlc. В то же время при использовании
щругих методе» (колориметрического с применением фосфорной кислоты,
Abbott) не обнаружено зависимости между этими показателями, а гийотеза параболической регрессии была равна нулю. Изучена связь индекса
массы тела с уровнем HbAlc. Так, при использовании метода И Э Ф в ка-
18
пиллярах обн^ужена достоверная нелинейная корреляция, а вариация
уровня HbAlc зависела огг вариации уровня индекса массы тела на 31,47%.
При использовании других методов определения результаты корреляци­
онного и регрессионного анализов были недостоверными Не отмечено
существенного влияния возраста на уровень HbAlc при использовании
различны:); методов определв1П1я эторо показателя. При изучении влияния
длительности заболевания на уровень HbAlc обнаружено, что при исполь­
зовании метода И Э Ф в капиллярах устанавливается умеренная нелиней­
ная корреляция между этим критерием и уровнем HbAlc. При этом зави­
симость вариации уровня HbAlc от вариации длительности СД имело па­
раболический вид и составило 9,35%. При применении метода Диабеттест на фойе отсутствия влияния длительности чаболейания не уровень
HbAtc наблюдалась нелинейная корреляция между -yniUvi двумя показа­
телями. При использовании метода Abbott коэффициекг линейной корре­
ляции существенно не отличался от выборочного корреляционного отно­
шения на фоне »улево^ гипотезы параболической регрессии. Определяя
HbAlc методом кож)риметрин с использованием фосфорной кислоты, не
выявлено зависимости дтгтельности заболевания и уровня HbAlc. В за­
ключении необходимо отметить, что тактика использования гликированного гемоглобина у больных СД основана на доказательтюм определении
HbAlc, который устанавливает нелинейную связь с основными пролоигированнымр показателями С Д .
Значение ис110ль10вания гликированного гемоглобина в
нефрологии
Контроль диабетической нефропатии
Проводили контроль диабетической нефропатии. Диагноз диабе­
тической нефропатии на различных стадиях формулировался следующим
образом: — диабетическая нефропатия, стадия микроальбуминурии (до
19
0,3 г/л); диабетическая нефропатия» стадия пршеинурии с сохраненной
азотвыделятельмой функцией почек; диабетическая нефропатия, стЬдия
хронической почечной недостаточности. При изучении характера измене­
ния выраженности протеинурии в зависимости от изменения уровня
HbAlc обнаружена параболическая функция у всех больных . А сущест­
венными прогностическими показателями протеинурии у брльных СД
являются содержание креатииина крови, скорост|» клубочковой фильтра­
ции и уровень HbAlc (рис 6.).
У больных с иммунными гшфртттиями, находящихся на лечении
в нефрологическом отделении обнаружена весьма высокая нелинейная
корреляция между НЬД1с и суточной протеинурии. Обнаружено, что ме­
жду HbAlc и основными показателями у больных с хроническими гломерулонефритами
устанавливалась
нелинейная
корреляционная
связь
(рис.7,). Так, например, выявлена достоверная корреляция HbAlс/возраст
больных
(р<0.0О5), длительность
заболевания/ HbAlc
(р<0,05)
и
НЬА1с/дл1ггельность заболевания (р<0,0]) Не обнаружено какой-либо
связи между уровнем HbAlc и СЭБ В то же время отмечено усиление
нелинейной корреляции НЬА1с/СЭБ: суточный диурез (t=2,235,p ~ 2,235).
Отсутствовала связь между уровнем мочевины, креатинина крови и
HbAlc. Следует отметить весьма вь(сокую корреляцию как длительность
хронической почечной недостаточности у
больных
с
ХГН/НЬА1с
(р<0,002), так и НЬА] с/длительность хронической почечной недостаточносги (р<0,001), А изменения в уровне HbAlc на 95,6% (р<0,05) были свя­
заны с изменениями в длительности хронической почечной недостаточно­
сти (согласно ур&внению парйболической регрессии). А у больных с тер­
минальной почечной недостаточностью, находящихся на прч^гранлиюм
ге.шм)иалте, изменения в уровне HbAlc в 61,3% могут привести к изме­
нениям в скорости перфузии крови, в 89,1% — к изменениялв в объеме
перфузш! крови, на 65,6% — к изменениям в kt/v и на 89,99?(i — к изме­
нениям в длительности хронической почечной недостаточности на диали­
зе.
20
SI
тг
рэ
Рнс.(. Определение предиктора протеянурии у больных СД:
lTbAlc/суточная лротепнурня (28,76%,p<0,0t);
Креатииин крови/суточная протеииуряя (W,66%, р<0,05);
Скорость клубочковой фильтрации/суточная протеинурия
(95Д}%4)<0,05),
Соопюшми* уровня НЬА1е и «емммлг помзчштй у ОМьнык зет
_
(flopp^mHiuoHHb^emimit
Рие.7. Белый нпрямая связь, черный - обратная; иггриховкд - дос­
товерный анализ
21
{Слиническое з н а ч е н и е опре;деления И Ь Л 1 с в к л и н и к е
внзпгренних болезней в оггсутствии С Д
Клиническое значение определения HbAlc в кардиологии выгля­
дело следующим образом. При изучении связи уровня HbAtc с основны­
ми показателями, характеризующими состояние метаболизма не обнару­
жено какой-либо связи между этим параметром и основными биохимичес ю т н показателями и функцией миокарда. В то же время следует отме­
тить усиление корреляционной связи протромбнновый индекс / HbAlc
(К=Ю,796) и HbAlc / фракция выброса (R==0,6478). У больных с гепати­
тами я пирропми печени обнаружена весьма высокая, корреляционная
связь мезкду уровнем HbAlc и процентным содержанием альбумина в сы­
воротке (рис.8).Следует отмегить, что, хотя1 не обнаружено достов^ной
корреляции между уровнем щелочной фосфатазы и содержанием HbAlc
(р > 0,05Ху больных гастроэнтерологического отделениях однако соглас­
но KpHTqjwiM Фишера-Стьюдента (2,726 и 2,776, соответственно), данные
связи незначительно отличались от досговерносго,
Комшчщиотый аиаяиз минбу основными (Шохимичёстми
покаатттит/ и уроени» HbAlc у больных, ni^xoam^uxcn на
MHWuu я авепроФнтррлоаичветм тФиниши
,
,
*
о.»\
0.»
0.Г
в1в
'у
Г'
0:5
у
0.4
0.3
у
0.1-1
■
0.1
0
-
'•
1.- ^ .-
|_ ._
1- |_ ..
1-—
1
Г"
1—~
1—
!^ш
м ' i.
«ill §
РнсиХ
22
При определении клинического значения HbAlc в реаниматоло­
гии обна|)ужено преимущественно достоверная корреляционная связь
между основным покаэагтелями у больнъоЕ с кртгическими и тяжелыми
формами различных заболеваний и уровнем H b A l c например, мочевина/НЬА1с, креатНнин крови/HbAlc, фибриноогенвмия/НЬА1с, сорбцнонная способность эритроцитов/HbAlc общий белок кровн/НЬА|с, уровень
н8триемии/НЬА1с(рис.9). А изменения в уровне с(ф6ционной способности
эритроцитов на 96% влияли на изменения НЬА1 с (рис. 10).
лйиттт шишЩг/ттштши тпмтчтнпчцрыштНЬИНу
1
t
4
6
»
г
»
»
w
ti
а
13 и
и
1-И0ЧЛ<ЬА1сг-КЮИЬАИ^3-Н*М>А1с*Нг*1НЬА1с S-ap^n/HbAlc, S-HMtAle.TCt
MhAH Ь-Фн/НЫИе, *41ПШЬА1С1, lOCCa/HbAle, 1U)(UlbA1o, П-ШИЬАи^, ПВшт/НЬА1е, 14-Атт1НЬА1е^ IS-rve/HbAit, 11-а»^М1с(шт1МиттЛоаттрюЛшшш^
РЧС.9
23
-|—»—I—•—I—.—p-i—I—1—f-
i90
to
t
«0
40 •
to
ol,,.l.li,"i:.,, «ill,
S
3
4
I
l„ ,> I
б
в
I—l__i 11,t , ,t;,,j ,,l
T
8
»
10
i l . l „I > . I
11
It
Ряс.10. Изякнення в уройне сорбциойной способности эритро­
цитов на 96% влияли на изменения НЬА! с
Значение определения гликированного гемоглобина в ус­
ловиях санатория
Изучали уровень HbAlc у лиц с клиническими симптомами на­
рушения обмена веществ, находящихся на курорте (преимущественно у
отдыхающих здравниц). Для этого обследовано 97 человек с а^инментарноконституциональным ожирением, а также с настоящими или анаынеспгическими данными за гипергликемию. Уровень HbAlc определял^ капилляр­
ным методом, Уровнц HbAlc и гликемии натощак представлены на
рис.11. Все обследованные были условно разделены на две группы: с
уровнем HbAlc < 8% и с уровнем HbAlc > 8%, При этом уровень глике­
мии натощак в гюследней группе существенно был выше, ч^( в предыду­
щей.
24
Содержание гликемии натощак
(млюль/лХштриховка) и
НЬА1сС/о)(*1«рный) у больных с
нарушением глюкозы натощак
f .-все обследуемые, 2.-е уровнем HbAlc
до 8%, З.-с уроенем HbAic выше 8%.
РисИ.
Для определения возможны?? путей использования HbAlc в усло­
виях санаторно-курортвого лечения был разработан алгоритм контроля
сахарного диабета и транзиторной гипергликемии яа курорте (таблица 3).
Согласно предложенного алгоритма обследованные больные были рвспределень^ следующим образом (таблица 4)>
25
Ajuoputtm контроля СД и "щншзиншрной гинергликшни "
Имеются саммт»мы
Уровень H b A l c
птй^ляомон
ГНоривпмнмшя
яаттпак (3,3^^
моль/л)
ХГняерглшкемия
(>5/i nMumJji)
аарчшхчтЛ
жшышетшй
Заключеняе.
Заключите:
Нирз'гпеная угаеволи'*^»
< ^ е ш ве яыянпевы
Имеются варутснш
углеводного о^ена
Имвегся отрессоная
(веется иаруюение
углеводного oweim
1-П№рГЛИ|а!МИ1С,
ип фсбуеггся Kimipiiuib
1Л1к«мики[1ЬЛ1о
ИмампгсаСД
Гликемия яитощак, МША/Л
<«^.
>«,»%
Заксомчвши
Лечение пе MemeWH, если >кт гапоглихшии
Нв4)бхо|(има корреШкИх утлево^рюго обмена сйхароо'
нижаюшями оредсгвамн
У большинства больных с анамнестическими симптомами за
"Чранзиторную гапергдикемйю" в момент обследования был выявлен
нормальный уровень глюкозы натощак, тогда как HbAlc был выше б%.
Это сввдетельствует о т о ч что согласно повышенному содержанию гликированного гепиоглобина, у таких больных уже имеются нарушения об­
мена веществ, и особенной ценности определения НвА1с у этой группы
обследованных. В то же время у 4 обследуемых с повьш1енной тощаковой
гликемией уровень H B A I C был нормальным. В таком случае гиперглике­
мий рассматривалась как стрессовая. В другом исследотнии устанавлива­
ли возможность использования HbAlo в контроле различных хронических
заболеваниях (за исключением СД) у больных в санатории. При изучении
средних арифметических значений уровней HbAlc у взрослых и детей на
курорте обн^>ужено, что их величины в различных группах неодинако№1.
26
Тавлиг^4
JPactgtedmenue обследуемых больных согласна tmaiputHMa
"пдк/нзитерной гиперглмкемии'^и (Щ
Больные с
клтншиь
йюишеетн'
ч«асш1и
ЯЯНВЫИИ
ш'тряат-
торнующпсргдикемтр*
Ксмщчеспо
Бодьяыес
СД
Вымшсяр
НормоГипергликемия
глихеиия
иНЪА1с>
иНЬА1с<
б%
Нормогляке»
ния
м HbAlc
Г|ше|>гяихрмия
иНЬА1с>
6%
т
<в%
22
45
контроля
4
21
глмжеиия шггощак; тлот/я
<6,0
>6,0
0
20
Квммлоци^ммыв « т л м /ммву ввпотлмш приазлтятш
и 1(ум«<юм НЫМ« у м Ь я » ^ « ы х • в«мм*#>и1г.
1>Н|БЛ2
Х о т я уровни гликемии иаггощак, общего холеспгерина сыворотки,
^-глобулинов, фибриногена крови были в пределах нормы, средний уро­
вень H b A l c у этих больных находился на неадекватном уровне. У «rjjuex?лых, находящихся в санатории, не обнаружено связи между H b A l c и О С ­
НОВНЫМИ биохимическими показателями. В то ж е время у demefi отмеча-
27
лась достоверная связь нелинейного вида при сопоставлении между
al/MbAlc, а2/НЬА1с, С-бел/НЬА1с, у-гл/НЬА1с и га11тоглобин/НЬА1с
(рис.12.),
Модель гликированного гемоглобина
На завершающем тгаме, на основании использдвания различных
методов определения HbAlc и при сопоставлении этого параметра с ос­
новными показателями у болы1Ых сахарным диабетом, были выведены
математические модели гликированного гемоглобина. Модель уровня
HbAlc (рис.13.), модель линейной корреляции НЬА^показатель СД, мо­
дель нелинейной корреляции НЬА]с/пока'за1тель С Д модель влияния (па­
раболическая регрессия) показатель СД/НЬА1с. Мы проанализировали
влияние основных показателей больных С Д а также методов определения
HbAlc на эти модели. Влияние гликемии натощак на формирование моде­
ли уровня HbAl с было позитивным при определении гликированного ге­
моглобина большинством методов. Только при использовании метода аф­
финной хроматографии Abbott влияние гликемии натощак было негатив­
ным (-19,55), тогда как при применении «Диабет-тест», ИЭФ в капилля­
рах, колориметрии с использованием фосфорной кислоты влияние было
позитивным, соответственно +2,92, +8,14, +18,49. Суммарное влияние
гликемии натощак на модель уровня HbAlc при определении последнего
всеми четырьмя методг^ми составило +10. На вторую модель — линейная
корреляция показатель (1-8)/НЬА1с гликемия натощак влияла следующим
образом. При определении HbAlc меггодом Abbott определялось позитив­
ное влияние +229,13. при использовании «Диабет-тест» — отрицательное
-%3,61, И Э Ф в капиллярах — позитивное +25,99, колориметрия с фосфор­
ной кислотой — отрица1тельное — 34,63. Суммарное влияние гликемии
натощак на вторую модель было цоложительньщ +106,83. Нелинейная
корреляция показателя (1-8)/НЪА1с гликемия наторщак оказывала на мо­
дель преимущесг1венно негативное воздействие При определении HbAlc
методом ^bott определялось позитивное влияние гликемии наторщак
28
+52,73, а «Диабет-тест», И Э Ф в капиллярах и колориметрии с фосфорной
кислотой — негативное, соответственно; -27,85, -36,90, -63,30. Суммар­
ное влияние гликемии натощак было негативным -75,22. На четвертую
модель регрессивный анализ показатель (1-8)/НЬА1с гликемия натощак
оказывал негативное влияние при определении НЬс методами Abbott и
«Диабет-тест», соотвегственно: -94,21 и -^5,72, а при использовании ме­
тодов И Э Ф в капиллярах и колориметрического с фосфорной кислотой негативное, сосггветственно: +35,20 и 104,92. Суммарное влияние глике­
мии натоишк было негативным -19,81,
Рис 18. Модель уровня HbAlc
Влияние гликемии после еды на формирован№ различных моде­
лей HbAlc выглядело следующим образом. Наиболее значимо влияние
гликемии после еды на формирование модели уровня HbAlc было при
определении последнего методом И Э Ф в капиллярах (+9,24), методом с
использованием фосфорной кислоты (+8,73), «Диабет-ттест» (+3,64), тогда
как при определении HbAlc методом Abbott гликемия после еды оказыва-
29
ла отрица1«льное воздействие на фсфмирование модели (-18,44). Суммар­
ное влияние гликемии после еды на формирование первой модели было
+3,17. Влияние гликемии после еды на формирование второй модели (ли­
нейная корреляция показатель (1-8)/НЬА1с) представляется следующим
образом. HaM6oj|ee существенно влияние гликемт! после еды (+274,81)
при определении HbAlc методом Abbott, тогда как при использовании
метода «Диабет-тест» (+13,08), И Э Ф в капиллярах (+135,63) и колоримет­
рии с применением фосфорной кислоты (-2,61) было значительно меньше.
Суммарное влияние гликемии после еды иа формирование второй модели
было позитивным +149,35. Влияние гликемии после еды на формироваиие
третьей модели (нелинейная корреляция цoкaзateль (1-8)/НЬА1с) было
схожим Шиболее существещюе влияние гликемии поС1ю еды было при
определении HbAlc методом Abbott (+79,42), тогда как при исполь5|овании методов «Диабет-тееп> (-56,49). И Э Ф в капилляра?? (-54,04) и коло­
риметрии с фосфорной кислотой (-54,09) было негативным Суммарное
влияние гликемии после еды на формирование третьей модели было нега­
тивным -95,16. Четвериа модель регрессивного аналиэа показатель ( 1 8)/НЪА1с выполнялась гликемией после еды так. При определении HbAlc
меггодом Abbott (-79,50) и «Диабет-тест» (-25,40) отмечено отрицател|>иое
воздействие, а при использовании метода И Э Ф в капиллярах (+20,51) и
колориметрии с применением фосфорной кислоты (+117,43) воздействие
гликемии после еды было положительным. Суммарное воздействие глиKeMtffl после еды на четвертую модель было позитивным (+33.04).
Воздействие суточной глюкозурии на формирование первой мо­
дели при использовании метода Abbott для определения HbAlc было не­
гативным (-18,44), методом «Диабег-тест!» (+3,64), И Э Ф в капиллярах
(+9,24) и колори1У№трии с фосфорной кислотой (+8,73) было позитивным.
Суммарное влияние суточной глюкозурии на формирование первой туюдели представлено гюзитивно +14. На формирование вт^юй модели влияние
суточной глюкозурии при использовании для определения HbAlc метода
Abbott (+62,94) было положительным, метода «Диабет-тест» (-73,41),
30
И Э Ф в капиллярах (-3]7,59) и колориметрического метода с цспольЮванием фосфорной кислоты (-29,43) — негативным. Суммарное влияние
суточной глюкозурии на вторую модель было отрицательным -357,49.
Фсфмироваяие т|1етьей модели суточной глюкозу{Я1ей было положитель­
ным при определении HbAlc методом Abbott (+85,53) й И Э Ф в капилля­
рах (+68,58), а при использовании методов «Диабет-тест» (-17,92) и колоpHtterpHH о фосфорное кислотой (-8.40) — отрицательным. Суммяриое
влияние суточной глюкозурии на третыо модещ> было положительным
+127,7. На четвертую модель влияние суточной глюкозурии было отрица­
тельным при определении HbAlc методами Abbott (-80,44), «Диабет-тест»
(-39,44), И Э Ф (-64,09) и незначительно положительным при использова­
ний метода с фосфорной ктслотой (+15,33). Суммарно -168,84.
Влияние суточной протеин^ии предстарлядосЬ таким образом.
На первую модель влияние этого показателя при определетвд HbAlc все­
ми четырьмя методами было отрицательным, соответственно: -9,79, -4,26,
-0,49, -5,36, а суммарное влияние составило -19,9 На формирование вто­
рой модели уровень суточной проте1шурии при определении HbAlc мето­
дами Abbott и «Диабет-тест» оказывал отрицательное воздействие, йоответетвеино: -14,97 и -100,0, а наиболее выраженное позитивное воздейст­
вие суточной протшнурии оказывало при определении гликированного
гемоглобина методом И Э Ф в капиллярах (+281,83) и значительно меньше
колориметрического метода с использованием фосфорной кислотой
(+36,66). Суммарное же воздействие составило +202,92 . На модель нели­
нейная корреляция показатель (1~8)/НЬА1с суточная прогеинурия оказы­
вали позитивное воздействие при использовании методов Abbott (+50,67)
и ИЭФ в капиллярах (+49,19), а отрицательное (-100,0) и (-44,94) соответ­
ственно методами «Диабет-тест» и колориметрического с использованием
фосфорной кислоты, а суммарное воздействие -45,08. На модель регресоипвный анализ показатель (1-8)/НЬА1с суточная протеинурия оказывала
отрицгельное воздействие при использовании большинства методов
(Abbott -97,30, «Диабет-тест» -97,05, И Э Ф в капиллярах -82,57) и лишь
31
незначительное при определении HbAlc мстотн с фосфорной кислотой
(+7,33), Суммарное влияние Суточной протеинурии на четвертую модель
было негативным (-269,59).
На модель уровня HbAlc общий холестерин сыворотки оказывал
как nosvfTHBHoe воздействие (+2.51) при определении HbAlc «Диабеттест» и (+25,99) колориметрическим методом с применением фосфорной
КИСЛОТЫ, так и отрицательное (-19,14) Abbott и (-0,37) И Э Ф в капиллйрах.
А суммарное влияние рбщего холестерина сыворотки на эту модель было
позитивным +8,99. На вторую модель общий холестерин сыворотки ока­
зывал при испол)>зовании метода Abbott как отрицательное воадействие (32,37), «Диабет-тест» (-101,39), так и положительное — И Э Ф в капилля­
рах (+306,97) и метода С использованием фосфорной кислоггц (+275,43).
Суммарное воздействие на зту модель было значигеии.но позитивным
+448,64. На третью модель влияние общего холестерина сьшоротки при
определении HbAlc различными методами было схожим — 1фи использо­
вании методов Abbott (-2,69) и «Диабет-тест» (-70,46) было отрицатель­
ным, а при применении И Э Ф в капиллярах (+107,87) и Ph (+157,34) было
положительным. Суммарное воздействие общего холестерина сыворотки
на третью модель было также позитивным +192,06. На четвертую модель
общий холестерин сыворотки оказщы отрицательное воздействие при
определении HbAlc всеми четырьмя методами — Abbott, «Диабет^тест»,
И Э Ф в капиллярах и колоримеггрического метода с использованием фос­
форной кислотой -85,72, -76,53, -92,57, -92,45, соответственно. А сум­
марное воздействие было выражено негативным (-347,27).
На модель уровня HbAlc индекс массы тела оказывал отрица­
тельное воздействие при определении HbAlc методами Abbott (-141,51),
«Диабет-тест» (-157,04) и позитивное воздейстане при использовании
И Э Ф в капиллярах(+272,11) и колориметрическоро метода с использсжа*
нием фосфорной кислотой - (+55,23). Суммарное воздействие индекса
массы тела на модель уровни HbAlc было положительным (+28,79) На
модель линейная корреляция (параметр 1-8)/НЬА1с индекс массы тела
32
оказывал также отрицательное воэдействие при использовании меггодов
Abbott (-141,51), «Диабегрт«сг» (-157,04) и позигтивное воздействие
(+272,11) И Э Ф в капиллярах h колоримегричесякого метода с использова­
нием фосфорной кислотой - (+85,20). Суммарное воздействие было пози­
тивным. А на третью модель индекс массы тела оказывал позитивное воз­
действие при определении HbAlc методом Abbott (+28.33), негативное —
«Диабет-тест» (-25,17). И Э Ф в капиллярах - также позитивное (+56.47),
колориметрического метода 6 использованием фосфорной кислотой
—
неИггивное (-29,38), а суммарное воздействие ивдексва массы тела на тре­
тью модель было позитивным (+30,25). Модель регрессивного анализа
показателя (1-8)/НЬА1с выполнялась индекс массы тела при определении
HbAlc всеми четырьмя методами; Abbott, «Диабет-теег», И Э Ф в капилля­
рах, колориметрического метода с использованием фосфорной кислопгой соответственно: -98,73, -88,43, -51,36, -2,18, а суммарно — выраженное
негативное воздействие (-240,7).
Возраст больных негативно "влиял" на формирование модели
уровня HbAlc при определении последнего методом Abbott (-19,44), по­
ложительно — методом «Диабет-тест» (+2,49), положительно — методом
И Э Ф в капиллярах (+8,62) и отрщ^ательно — методом РЬ (-4.26), Сум­
марное воздействие возраста на первую модель было отрицательным (12,59) На вторую модель при определении HbAlc методами Abbott,
«Диабет-тест», И Э Ф в капиллярах и колориметрического метода с исполь­
зованием фосфорной кислотой - тчрает больных оказывал негатиЬиое
воздействие, соотаегственно, -371,39, -134,47, -26,41, -16,37, а суммарное
воздействие было выражено негативным (-548,64) На модель нелинейная
корреляция параметр (1-8)/НЬА1с возраст оказывал при определении
HbAlc методом Abbott позитивное воздействие (+3,62), а при использова­
нии другах методов —- негативное «Диабет-тест)) (-35,63), И Э Ф в капил­
лярах (-80,78), колориметрического метода с испрльзованием фосфорной
кислотой (-59,98), суммарно также негативное воздействие (-548,64) На
модель регрессивного анализа параметра (1-8)/НЬА1с возраст оказывал
33
при использовании метода Abbott негативное воздействие (-11.63), «Диа­
бет-тест» -- позитивное (+181,24), И Э Ф в капиллярах — позитивное
(+34,34), колориметрического метода с использованием фосфорной кисло­
той
позитивное (+442,51) Суммарное же воздействие было выражено
позитивным (+646,46).
Длительность заболевания оказывало негативное влияние на пер­
вую модель при определении HbAlc методом Abbott (-17,35), а при опре­
делении HbAlc методами «Диабет-тест», ИЭФ+ФК, Ph позитивное, соот­
ветственно +3,63, +8,57, +10,06. Суммарное воздействие длительность
заболевания на первую модель было незначительно положительным
(+4 91). На модель линейная корреляция параметр (1-8)/НЬА1с длитель­
ность заболевания оказывал как положительное влияние при определении
HbAlc методами АЬЬоШ и «Диабет-тест», соответственно +301,094 и
+120,45, так и отрицательное влияние при использовании мегодов И Э Ф в
капилл^фвх, колориметрического метода с использованием фосфорной
кислотой -, соответственно -297,17 и -185,03 при общем негативном воз­
действии длительности заболевания на вторую модель (-59,81) На третью
модель длительность заболевания оказывал схожее влияние — при опре­
делении HbAl с методами Abbott и «Диабет-тест» — позитивное воздейст­
вие (+53,21 и +32,71), а при Использовании ИЭФ в капиллярах и колоримеггрического метода с использованием фосфорной кислотой — негатив­
ное (-14,74 и -62,93). Суммарное же воздействие было позитивным
(+8,25) А на четвертую модель длительность 34болев^1ния "оказывала"
позитивное воздействие при определении HbAlc вышеуказан1^ыми мето­
дами Abbott, «Диабет-тест», ИЭФ в капиллярах, колориметрического ме­
тода с использованием фосфорной кислотой -, соответственно +58,10,
+23,78, +32,84, +251,79. Суммарное воздействие было значительно пози­
тивным (+366,51).
Влияние различных методов определения HbAlc на ггервую мо­
дель представлялось следующим образом: Abbott -117,44; «Диабет-тест» 4,69; И Э Ф в капиллярах +54,53; колориме! »#8fe^dвMMMMM!JЙ*>»4Лпoльзo•^
БИБЛИОТВКА
f» т
т
тшштттш^ш-ттяш^т^шшт-
,
•А
34
ванием фосфорной кислотой +67,61. На вторую модель: Abbott +307,73;
«Диабет-тест» -516,39; И Э Ф в капиллярах +109,49; колориметрического
метода с использованием фосфорной кислотой +99,17. На третью модель:
Abbott +350,82; «Диабет-тест» -300,8; ИЭФ в капиллярах +115,72; коло­
риметрического метода с использованием фосфорной кислотой -165,73.
На четвертую модель: Abbott -489,43; «Диабет-тест» -187,55; И Э Ф в ка­
пиллярах -16,77; колориметрического метода с использованием фосфор­
ной кислотой +844,67.
Таким образом, "основная масса" гликированного гемоглобина
была представлена именно теми пролонгированными показателями, кото­
рые ответственны за прогноз СД, а уровень HbAlc при использовании
большинства методов его определения — трех (из четырех) в первую оче­
редь связан с длительностью заболевания, общим холестерином крови и
постпрандиальной гликемией.
ВЫВОДЫ
1. На основании проведенных исследований уровень H B A I C пред­
ставляется существенным гликоконъюгатом в процессе гликирования, его
следует рассматривать не просто как пролонгированный индекс гликемии,
а как важный прогностический показатель как на диабетическом, так и
недиабетическом уровнях, поскольку данный гликопротеин устанавливает
заметную связь с кардинальными параметрами СД , а на недиабетическом
уровне - с наиболее важными маркерами различных патологических со­
стояний, в первую очередь, в реаниматологии, в нефрологии, в детской
ревматологии, кардиологии, гастроэнтерологии.
2. Сочетание качественного метода ИЭФ и количественного —
колориметрии позволяет специфично определять HbAlc, что доказано
схожей электрофоретической миграцией со стандартом HbAlc и имеет
35
клиническое отображение. Значения HbAlc, полученные методом с ис­
пользованием И Э Ф наиболее полно по сравнению с общеизвестными ко­
лориметрическими методами совпадают с эталонными значениями по
отображению основных контрольных параметров СД и контролю диабе­
тической иефропатии.
3. Метод ИЭФ в капиллярах является принципиально иным и аль­
тернативным способом определения HbAlc. Обладая доказанной специ­
фичностью и достаточной чувствительностью, данный метод имеет вос­
производимость по коэффициенту вариации значительно отличающейся
от общепринятых норм для HbAlc. А при сравнении методов предлагае­
мый способ для определения HbAlc не совпадает с ионообменной хрома­
тографией и имеет принципиально иную ассоциацию с углеводным обме­
ном.
4. Метод И Э Ф в капиллярах для определения уровня HbAlc мо­
жет быть применен при оценки эффективности проводимых лечебных
мероприятий у больных СД, так показано, что применение традиционной
инсулинотерапии и стандартного мананнила-5 не приводит к должной
метаболической компенсации по уровню HbAlc у 73,7% из 19 больных
СД 1 типа и у 83,3% из 12 больных СД 2 типа на амбулаторном этапе ле­
чения.
5. На основании примененной интерпретации результатов иссле­
дований с использованием экранной системы координат, заключающейся
в изучении средней погрешности по гликогемоглобину в единицах изме­
рения HbAlc до середины зоны разброса и от средней координаты тощаковой, постпрандиальной гликемии и холестерина, уровень HbAlc пред­
ставляется более информативным при 2-м типе СД.
6. Разные параметры СД неординарно связаны с уровнем HbAlc.
Изменения в случайных гликемиях натощак и после еды, общем холесте­
рине сыворотки, возрасте пациентов не коррелируют и существенно не
36
влияют щ изме1^ения в уровне HbAlc. В тоже время и:^менения в оод|ержаниях суточной глюкозурии на 36,5%, суточной протей1Ч>урии на 28,6%,
индекса массы тела на 31,5%, длительности заболеваний на 9.4% влияют
на изменения в ^ювне НЬА i с.
7. В не^фологцческоЙ практике уровень HbAlc является существ
венным предиктором протеииурии у больных СД и у больных с хроничеошми гломеруяовефритамв, Кроме этого HbAlc на 95,6% может отра­
жать развитие хронически почечной недостаточностя у больных с хро­
ническими гломеруяонефритами, а у больных с терминальной почечной
недостаточносшо,
получающих
программный гемодиализ,
уровень
HbAlc на 61,3% отражает сксфость перфузии 1фОви, 89,1% — изменения
в объеме парфузия крови, на 65,6% — изменения в kt/v и на 89,99% связан
с изменениями в длительности хронической почечной н^достаггочности на
диализе.
8. Определение уровня HbAlc значимо при кардиапьноб патоло­
гии. У больных с ИБС между содер^канием HbAlc, основными биохими­
ческими ггоказателями и фуюсци^|{ миокарда следует отметить усиление
корреляционной связц, особенно протроибиновый кидасе / HbAlc
(R=0,7%) н HbAlc / фракция вы^)0са (R'4),6478). А значение уровня
HbAlc у больных с гепашггеми и циррозами печени заключается в нали­
чии достоверной связи мокду уровнем этого показателя и содержанием
альбумина в кроьи, а тс^кже в усилении связи с уровнем щелочной фосфатазы,
9. Повышение уровня HbAlc у больных с тяжелыми состояниямир, находящихся в реанимационном отделении, связь этого шфаметра с
основным^ показателями, отражающими состояние метаболизма, реоло­
гические свойства плазмы и эндогенную интоксчикацию у этих больных
свидетельствуют о ценности использования уровня HbAlc ва реанимаци­
онной практике для прогноза критических патологических состояний.
37
10. В условиях санаторно-курортного лечений уровень HbAlc
значим для скрийниига обменных нарушений и является методом выбора
по сравнению с ппокозотолерантным тестом при контроле "транзигорноЙ
пипергликемии". А у д{етей с ревматоидной патологаей^ находящихся на
лечении » санатории, уровень HbAlc связан с основнми показателями,
отражающими воспалительный процесс в - отсутствии СД определение
HbAlc может иметь значение у детей с ревматоидной патологией. При
этом содержание HbAlc отличается у больных в обостренной форме забо­
левания и в стадии ремиссии.
П . Согласно модели гликированною гемоглобина, определенного
четырьмя методами по его уровню, линейному и ныияфиацу паралле­
лизму, а также регрессионному аналюу с гликемией иаюшак, после еды,
суточной глюкозурией, протеятурие^, индексом массы тела, общим холе­
стерином сыворотки, длительностью заболевания и возрастом больных
данный показатель при использовании большинства методов его опреде­
ления — трех (из четырех) в перщлю очередь связан с длительностью за­
болевания, общим холертерином крори и гликемией после еды.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ
ДИССЁГГАЦИИ
1. Королев в.А., FoAQBCKajf Г Г . , Селиванова К.Ф., Молодован
К.Й., Бориоенко С.Н. Содержание гемогзюбина A l e и модифяцироваккюго
альбумина сыворотки крови у больных сахарным диабетом //Вопр.мед.
XH»Offl.-1991.-T,37..N3.-C.41-43.
2, Королев В Л . , Ушаков А.В. Метод определения глщсозилированного гемоглобина. Конгресс молодых ученых по клинической меднци-
за
нвЛГез.докл..Кий^ 1992,-С.121.
3. Королев В.А., Петров А.В. Капиллярный метод определевия
глихознлирован1к>го гемоглобина.-В кн.:ГУ Украинский биохимический
сяье8л1992..С.120.
4. Королёв В.А., Петров А.В.. Чуманский Л.И. Сравнение методов
определения гликозющрованного гвмог*обина//Клин.Даб.диагн.- 1992,N5,6-C.
5. Королев В.А., Петров А.В., Борнсенко С,Н., Молдован К.И.
Микрометод
определения
гликсоилироааинога
г«ик>глобина//Юшн.
лаб.диатн.-1993.-К2.-С,28-30.
6. КороЯЁв В.А., Петров А.В., Колита И.Ц., Петрова А.А. ПримеНвпЖ
элттрофорепгических методов для огфеделения м(№фт1иров4йных
белков у больных сахарным диабетом/Жлик.мб,диагн.- 1998.- N7.С.15-17.
7. Кор011в8 В.А, Петров А.В., Головсхая Г Г . Использование ка­
пиллярного метода для оИределения гликированных белков крови
//Клин.лаб.ди8П1.-1998.-Н9.-С.38.
8. ХороМв В.А, Гордеева Г.И., Лобко И В . , Шгров А.В., КЦоев
0.А Зяйчеит определения гликироаанного гемоглобина в условиях Санатория//Ввст.физ«1отер.и курорт.-2000.-N2.-C.50-51.
9. Короле В.А^ Приступкж A M . , Глушкова О.В., Дураева Д.Д.,
Белокурсзш) В.П.. Малахова О.Ю., Сапетий И.Д Клиническая оценка ко­
лориметрического кютода определояия глюсироэанного гемоптоюика "Дйабег-тест7/Врач,дело/;нк.справа.-2000.-Ы5-6.ц:.9б-98.
Ш. К<фолев В.А., Головсквя Г.Г., Бело1дфенко В.П., %миричкнна
Н.И., Малахова О.Ю., Гордеева Г.И. Анализ колориметрического м&тода
опрецеяения гаикозилнрованного гемоглобина //Клин.лаб.диаги,-2001.NI2.-C. 12-14.
11. Корольов В.О., Петров ОВ. Cnoci6 визначейня гшюрованого
гемя-яоКну. Декяарашйний патент на вивах1д N33S40A иш 15.02.2001.
12. Гордеева Г.И., Королев В-А. Контроль диабетичес^сой не^хь
39
патки//Нефрологаческий сеиишф,2001.-Сб.ш^чн.1р. Спб нефроло1№еского семинара, 18-21 июня 2001. Спб, ТНА,200Н. 123-124.
13. Королев В.А., Мошко Ю А , Лобю И В . Испопыювание хагошлярного меюда для определения гликозилироваянсхго альбумина/7Гаврич.ие;д. биод.вестн,-200!2.-К2.-С. 172-172.
14- Королев В Л , Лукиче» Т.И.. Пепувииа Н.А.. Гошмская Г.Г.»
Андреева Е В . . Мошко Ю.А., Гордеева T i t . Сравнюие меггалов и тфкшененве вычислительной »р<граммы с использованием экранной системы
координат для вш^прртации reMWJK>6mu A l e у больных сахцжым диабеггйм типрв 1 и ^/Клян.лаб.днагя.->Г12.-С. 16-20.
15. К<ч)Олев В.А., СекИтваГА.. Ксрев О.А., ГордееваГ.И,, Лобхо И.В.. Мошко Ю.А. Алгоритм контроля бахаряого диабета и транзтор*
ной гипе|>глике1|1ии на курорте //Вести.физиотер.и Kypopr.-2002.-N3.С.68-69.
16. Королев В,А., Зинчешео О.В.. Головская Г.Г. Модификация
метода изоэлжгри<«ского фокуофсжания гемоглобина Ale// |[аб,ди8гн.2003,-N.l4:.44-47.
17. Королев В.А., Глушков!» О.В.,Дуиаева Д Д Глиюфоваяный
ге1югло&нн и состояние метаболизма у 6ojtbHbix сахарным диа|$ег(ш: Ма­
териалы научно-практической конференции (Друп Дашлевсью читанйя).27-28 февраля 2003г.- С.
1^. К(фопев В,А., Кцоев О.А., Ухов В.А ГликирОванный гилоглобин и контроль гиперглюсемии на курорте. В кн.: Проблемы, достижения
и Лерспективы развития медико-биологических наук и практическогро
здравоохранения. Труды Крымского государственного медицинского универсетета им.С.Й[.Георгиевокого.- 2002.-Том.138,Ч. 1.-С.105-108.
19. К<Ч)0лев В . Л Контроль нарушений углеводного oQkieia на ку­
рорте. Труды Крымского государственного медицинского университета
им.С.И.Георгиевского.-2002.-Том. 138,4-11 .-С. 101.
20. Зинченко О.В., Королев В.А., Мошко Ю.А Модификация ме­
тода 01феделения гдикировашюго гемоглобина. Труды Крымского rqcy-
40
дарственного медицинского уняверситегта им.С.И.Георгиевского.-2002.ТОМ.138ДП.-С.101.
21. Королев В.А., Глушкова О.В., Гордееаа Г.И. Гли»1ров81<иый
гемоглобин у больных с диабетической нефроп8тей//Нефрожмп1я.-2003.То11.7Д1.-С.7б —79.
2 1 Королев В.А.. Лопатина С И . . Лопатина Г.Л OipeAef№HMe пре­
диктора протеинурии у больных сахарным диабетом.В кн.: Нефрологачеосий сечттр
2003. Сбортк трудов Междукаррдной мефрологичеекоб
хокф^)енцни "БЕЛЫЕ НОЧИ^ X I ежегодак»х> Санкт-Пегербурского йефрологического семинара и V Балтийской нефрологической конференция,
17-23 июня 2003 г. Сашгг-ПетЦ)бург,Россия.С.б4-б5.
23. Kq)OJ№B В.А., Левченко М.В., Мошхо Ю.А., Гордеева Г.И. Ре­
комендации по проведению корреляционно-регрессионного анализа в
]ашвикв/'/Таврич,мед.б1ТО1Л.весгн.-20ОЗ.-Н. 1-С.80-83.
24- Королев В.А., Белокуренхо В.П., Чимиричкина Н И . Лабора­
торная стандартизация калил11ярного метода определения гликнрованМого
гемогло&яна. Шциоиальные дня лабораторной медицины России-2003
(Мйсква 6-9 окгйбря 2003). На1учно-практйческий симпозиум "Организа­
ция, менеджмент и экояокшка кпиническоЙ лабораторной службы"//
Клйн.лаб.диагя.-2003.- N9.- С.35.
25. Королев В А , Левченко М.В., Мошко Ю,А, Гордеева Г.И.,
Левченко В.Л. Опыт применения критерия Краскела-Уоллиса в клиниче­
ских спщ^стических расчетах.
В
кн.: Щюблемы, достижения и
п^>спектцвы развития медико-
биологаческих наук и практического здравоотфанения. Труды Крымского
государственного иек1щиинс1^>п> университета ям.С.(1Георгаев(ясого.2003.-T.13ft-C.83-85.
2$. Королев В.А, Стратегический подход к определению гликогемогло6ина//Клин.лаб.диагн.-2004.-К1.-С. 18-23.
27. Королев В.А., Всеволожская Л Д. Значение гликозилированного гемоглобина у больных на программном гемодиализе. В кн.: Нефро-
41
логический семинар 2004. Сборников трудов X I I ежегодного СанктПетербургского нефрологического семинара 15-18 июня 2004 г. СанктПетербург, Россия, Фолиант, 2004, с.46.
28. Королев В.А., Лопатина Г.Л ГликозилированныЙ гемоглобин
у больных с иммунными нефропзтиями. В кн • Нефрологмческий семинар
2004 Сборников трудов X I 1 ежегодного Санкт-Петербургского нефроло­
гического семинара 15-18 июня 2004 г.Санкт-Петербург, Россия, Фолиант,
2004. с.7-8.
29. Молчанов В.И., Королев В А , Козинец И Ю., Харитошина
М В ГликозилированныЙ гехюглобин в реаиимаггологии В кн: Актуаль­
ные проблемы гбспитальной медицины. Материалы международной науч­
но-практической конференции. СевастопольБиблекс,2004.-С.171-172
30. Ксфолев В, А , Молчанов В.И, Беленький А И., Рабопгягов С В .
ГликозилированныЙ гемоглобин (HbAlc) - важный прогностический по­
казатель в нефрологии. В кн. Актуальные проблемы госпитальной меди­
цины Материалы международной научно-практической конференции.
Севасто1ЮльБи6лекс,2004.-289-290.
31. Королев В. А . , Молчанов В.И., Белокуренко В.П. и соавт. Гликированый
тюглобин
в
клинике.
Новое
понимание
пробле-
мы.//Лаб.диагн.-2004..Т.31.-N 1 ,-С.64-69.
32. Королев В.А„ Молчанов В.И., Харитош1ша М.В. Клиническое
значение определения гликированного гемоглобина в реаи(тматолопт
/ЛВест.инт терапии.-2О05.-К1.-С. 74-76.
33. Семенова Г А., Королев В А., Мешков В.В. Внедрение алго­
ритма контроля гипергикемии в санатории (информационное сообщение).
Актуальные вопросы курортологии, физиотерапии и медицинской реаби­
литации: ТрНИИ им.Сеченова М.А.ЯлтаНИИ им.Сеченова М.А..-2004.С.94-96,
34. Молчанов В.И., Гриицов А.Г., Королев В.А., Козинец И.Ю.,
Харитошина М В Прогностическое значение гликированного гемоглоби­
на в реаниматологии//Хирургия Украины.-2005.-КЗ,-С.112-114.
42
35. Молчанов В.И., Королдев В А , Козинец И.Ю, Холодов Д.А,,
Харитошина М.В., Беленький А.И., Ванащов Ю.В. Гликнрованный гемо­
глобин у больных с хронической почечной недостаточностью, получаю­
щих программный гемодиализ//Б1пь,знеболюваит i 1нтенсивна тврап1я.2005.-N3.-C.4<M2,
36. Корольов В.О., Молчапюв B.I., Козинвиь 1.Ю,, Безруков 0,Ф.
Вивчения феномена глшруваиня в екстремальнШ медиц1Ш|//Укра!нський
журнал екстремально! медицини [иш Г.О.Можаева.-2005.-Том 6.-N2.-5962.
37. Молчанов В.И., Королев В.А. Гликоэилированный гемоглобин
у больных, находящихся в критическом состоянии // Бшь, знеболювання i
1нтенси»т терагая.-2005.-М2.С.57-59,
38. Королев В.А. Гликированный гемоглобин - важный прогно­
стический показатель на куроргге/|'Нефрология.-2005.-Т.9.-КЭ, С.60-66,
39.Королев В А.,Каладзе Н.Н., Молчанов В.И. Значение контроля
нгликироваиия (гликозилирования) накурорте,-2005,-1МЗ.-С.32-33.
40. Королев В.А. Трактовка и прогнозирование протеинурии в
стационаре и на курорте// Вестн.физиотер.и курорт.-2О05.-НЗ.-(в печати).
41. Королев В.А.. Молчанов В.И,,Молдован К.И. Применение
гликированного гемоглобина для контроля сахарного диабета на амбула­
торном этапе лечения//Клин.вест. (принята к публикации).
42. Королев В.А. Метод изоэлектрического фокусирования в ка­
пиллярах + фоггоколориметрия//Биомедицинская химия (принята к публи­
кации).
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
]. при использовании различных методов определения Г Г необ­
ходимо выделять фракцию HbAl с и устранять фоновые значения.
43
2. Применяя колориметрические методы необкодимо учитывать,
что гидролиз неполный и выводить коэффициент при расчете гликированиого гемоглобина.
3. Для более полного суждения о состоянии обмена веществ у
больных сахарным диабетом необ1Шдимо совместное определение глнкированного
гемоглобина,
гликироааннога
альбумина
и
модифи-
ииброваиного альбумина.
4, При обследовании людей в санапгории рекомендовано опреде­
ление HbAlc, который является альтернативой глюкозотолерантному тес­
ту и имеет преимущества nepeui последним при контроле "транзиториой
гипергликемии",
5. Для мониторинга сахарного диабета на курорте достаточен еже­
дневный неоднократный в течение суток контроль и самоконтроль глюко­
зы крови.
6, HbAlc может быть рекомендован для использования при раз­
ных заболеваниях внзггренних органов в оггсустаии сахарного диабета как
прогностический показатель, в первую очередь в реаниматологии, в дет­
ской ревматологии и при использовании программного гемодиализа.
7, Уровень HbAlc может быть применен для прогноза экстре­
мальных стуаций в медицинской сортировке наэтапахмедицинской эва­
куации.
Выношу глубсмсую 1ртмситяыюсть академику РАМН иНАН Ущзаины,
щюфесхору А^СЕфимову.
44
Xbstnet
Clinical Significance of glycated Hemoglobin and Method
Of isoelectrical focusing in the capillaries
The objective of the present research was the elaboration of a different
approach to the determination of the usage level of this indication for the pur­
pose of screening the exchange anomalies and a constant glucose monitoring in
the patients , suffering from diabetes mellitus {DM} as weM as control over
various chronically pathological conditions within the process of a routine doc­
tor's practice.
Four hundred ninety two {492} patients have been examined.
The level of glycated hemoglobin (HbAlc) had been determined with two hun­
dred ninety two {292} patients sufferingfi-omD M (155 patients with D M l and
173 patiems with DM2}. Besides, the dwiors and the patients with various
chronic diseases with no evident D M {total two hundred men} have been ex­
amined.
Among the aforesaid examined contingent there were blood transfu­
sions donors, stationary patients suffering from various chronic diseases, holi­
day-makersfi-omsanatorium as well as the stationary patients with the anomaly
<^ glucose regulation ami sanatorium holiday makers. The following methods
were applied to determine HbAlc level: method of isoelectrical focusing in
capillaries, colorimetric methods , based on a partial bydrolyze with an oxalic
acid, calibrati<M) with respect to fitictose and without i t , based cxn a partial hydrolyze with phosphorous acid ; method of ion-exchange chromatography on
micro columns (Seminel , Italy}; method of affine chromatography {Abbott,
USA}.
Statistic data processing was carried out with the application
of ^Kcial computer program , executed in Turbo Pascal language. Mean atithmetical and mean quadric values were calculated as well as their deviations.
Correlation and regression analyses have been carried out. We have created and
applied, for the first time, a new techni9ie to determine glycated hemoglobin
45
; the method combines the process of singling out HbAlcfractionby means of
isoelectrical focusing {DBF} and the subsequent determination of its value by
photocolormetry with tiobarbituric acid after partial hydrolyze with oxalic acid
{lEF method + PhC}.
Newly created method was also a^ilied to study the possibility of de­
termining
the glycated albumin level in a blood serum and its combination
with determination of modified albumin will be able to create more vivid pic­
ture of the albumin level of affection in case of DM. It is for thefirsttime that
volume wise evaluation of lEF + PhC technique reliability had been carried out
, accompanied by the study of its major criteria : correctness, reproducibility ,
specificity , sensibility. It has also been proven the aforesaid technique can be
applied as an alternative method to determine HbAlc On the basis of compar­
ing the various methods to determine HbAlc we have elaborated a new com­
prehension of the parameter to reflect D M control and its major manifestations.
For the first time we have revealed the value of HbAlc detenranation
under the conditions of sanatorium- resort treatment and created the algorithm
€^DM control as well as transitory hyperglycemia at the health resort.
There has been scientifically demonstrated the possibility to
make use of HbAlc, to exercise c(»itrol and scientifK prognostication in the
cases of various chronic diseases, which are not associitted with DM under
stationary treatment as well as the health resort. The thesis has been established
that capillary method of determining HbAlc, involving lEF HbAlc in the nar­
row ph gradient , corresponding to pi HbAlc with the subsequent photocolorimetiy with 2- TBA after partial hydrolyze with the oxalic acid , is consid­
ered to be an alternative technique to determine HbAlc, as the values of the
present parameter , that had been determined in the way of the aforesaid
method, differ and do not correlate while comparing with the values of HbAlc,
determined by the method of ion exchange chromatography {lEC}. And the
variation coefficients , while determining the intro-series and in-between series
reproducibility of lEF + PhC m^hod , differ essentially from generally ac-
46
cepted norm. In this case, HbAlc appears not as a mere prolongated index of
^ycemia but turns out as an important prognostication indication on a diabetic
as well as non-diabetic levels. HbAlc is regarded as a plausible marker of
pathological changes in case of diseases that are not connected with D M ; first
andforenaost,under aitical conditions in re-animation , to prognosticate protennria , chronic renal failure in case of nephropathies and as an additional
adequacy criterion of a programmed hemodialysis in nephrology, as well as to
fM'ognosticste inflammatwy process in juvenile rheumatic disease. At the health
resort
the determination of HbAlc is a choice in case of a control
ovei^transitory hyperglycemia ".
47
Условные сокращения
Билл - бшипфубин крови.
ИЭФ - изоэлектрическое фокусирование.
КК - креатинин крови.
МАУ - микроальбуминурия.
ОБ ~ общий белок |фОви
0см - осмолярность плазмы.
ОХС - общий холестерин сьюоротки.
преГл, - препрандиальная гликемия, гликемия натощак.
ПТИ - протромбиновый ивдекс, протромбиновое время.
Щ Ф - щелочная фосфагаза.
HbAlc, - гликозилированный (гликированный) гемогло­
бин, гликогемоглобин.
Ш - гемагго1фИ1.
К+ - уровень калиемии
.kt/v - индекс адекватности диализа по мочевине.
N - азот мочевины,
Na+ - уровень натриемии
PI - изоточка.
48
г. Симферополь
ЧППошювВ.П.
Свидетельство № 0405 5647Ф0012346
Производство полиграфической
продукции
тел. 49-92-01
Зак. №121 от02.11.05тир. ИОзкз.
05-22118
РНБ Русский фонд
2006-4
19751
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
2
Размер файла
2 086 Кб
Теги
bd000100892
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа